Какая калорийность у спермы, и можно ли на ней поправиться?

Тема довольно необычная, но вместе с тем весьма обсуждаемая. Давай же рассчитаем калораж спермы и выясним, какие полезные элементы есть в ее составе и действительно ли от нее можно прибавить в весе.

Содержание статьи

Белки и углеводыi

Наличие белка в сперме – не миф, а абсолютная правда. Как такое возможно? Как ты знаешь, главная задача сперматозоидов – оплодотворить яйцеклетку. В этом-то как раз им и помогает высокое содержание белка в составе спермы.

Сперма содержит в себе не только белок, но и свободные аминокислоты. Белки поступают из простаты, а аминокислоты – из семенных пузырьков. Вычислить точное количество белка в сперме довольно сложно, но некоторые исследователи считают, что речь может идти о примерно 50% этого элемента от общего объема спермы.

Также некоторые исследования показывают, что на 10 мл мужской спермы приходится около 500 мг белка.

Также в сперме содержатся кальций, цинк, кислая фосфатаза, соль, лимонная кислота, питательные вещества, расщепляющие белок, калий и фибринолизин. А также небольшое количество воды.

В сперме помимо белка есть еще и все виды сахара. Зачем в сперме сахар? Он выступает в роли поставщика энергии и помогает сперматозоидам преодолевать свой путь к яйцеклетке.

Стоит ли девушкам специально глотать сперму во время секса? Разве что в том случае, если этот процесс нравится обоим партнерам и возбуждает их. Надеяться на то, что вышеупомянутые полезные вещества в составе спермы каким-либо образом повлияют на организм девушки, не стоит.

Некоторые парни любят хвалиться, что их сперма содержит примерно столько же белка, сколько и в обычном курином яйце. Что ж, это правда. Но чтобы получить такую дозу этого питательного элемента, придется употребить примерно половину стакана спермы. Не проще ли использовать более традиционные методы внесения белка в свой рацион?

Поэтому девушкам, которые сидят на диетах и боятся, что от спермы они не уложатся в дневную норму КБЖУ (Калории Белки Жиры Углеводы), стоит расслабиться. Кстати об углеводах: на 100 г спермы приходится приблизительно 11 г. Жиров – 6 г.

Калории2

Вот мы и подошли к теме, которая так волнует девушек, строго следящих за своим питанием и регулярно проверяющих сантиметры в талии и килограммы на весах. Наслушавшись красочных мифов, они начинают всерьез переживать, что за свое желание порадовать мужчину минетом им придется расплачиваться лишними килограммами.

Но нет, это так не работает.

Научные источники утверждают, что на одну порцию спермы приходится примерно 5-25 калорий. И даже если партнеры решат посвятить весь вечер минету, а девушка будет каждый раз глотать сперму, поправиться у нее все равно не получится.

Кроме того, вышеуказанный калораж, вероятнее всего, рассчитан для довольно большого количества спермы. В обычной порции эякулята калорий будет и того меньше. С белками переборщить тоже не получится даже при всем желании.

В Сети довольно много обсуждений на тему того, сможет ли регулярное употребление спермы восполнить суточную норму белков и помочь в наращивании мышц. Ученые вынуждены разочаровать всех, кто всерьез на это надеется – в обычной порции спермы белка еще меньше, чем калорий.

Исследователи высчитали, что средний объем эякулята взрослого мужчины равен одной чайной ложке. Хотя у молодых парней в подростковом возрасте организм обычно производит большее количество спермы.

В чайной ложке эякулята содержится примерно 5-6 калорий. Зато сперматозоидов – от двухсот до шестисот миллионов. Но они составляют лишь 1% от общего состава спермы. Все остальное – это различные ингредиенты и питательные вещества. Например, витамин C и цинк.

Стоит ли ее «есть»?3

Нормально ли это? Или отвратительно? Не будет ли от употребления спермы какого-либо негативного воздействия на организм?

Студенты колледжа в Нью-Йорке провели исследование и выяснили, что мужское семя имеет свойство антидепрессанта. Такой эффект сперма оказывает при регулярном употреблении. Стоит ли это того? Зависит от каждой отдельно взятой пары.

Одним мужчинам принципиально важно, чтобы женщина глотала сперму. Другим на это все равно – лишь бы партнерша и сама получала удовольствие от секса. Есть женщины, которые относятся к этому спокойно, но и есть и те, для кого это отвратительно. Нет никаких правил и норм. Все индивидуально.

Можно сказать, что сперма полезна – ведь в ней так много различных питательных веществ! Но если и стоит ее «есть» во время секса, так это только в том случае, если это приносит удовольствие обоим партнерам.

Типичная порция эякулята не способна заменить продукты, богатые белком, и мультивитаминные комплексы. Но и навредить фигуре она так же не сможет.

Цифры и факты4

Для любителей конкретики и цифр мы приведем результаты исследования, проведенного в 2005 году. В обычной порции эякулята (3,4 мл) содержится:

• Белок – 0,171 г;
• Цитрат – 18,0 мг;
• Натрий – 10,2 мг;
• Фруктоза – 9,25 мг;
• Хлорид – 4,83 мг;
• Глюкоза – 3,47 мг;
• Калий – 3,71 мг;
• Молочная кислота – 2,11 мг;
• Мочевина – 1,53 мг;
• Кальций – 0,938 мг;
• Магний – 0,374 мг;
• Цинк – 0,561 мг.

Скучные расчеты – это не для тебя? Окей. Тогда вот тебе задачка: в среднем человек потребляет около 2000 калорий в день. Допустим, мужчина кончает очень бурно и в обычной порции его спермы содержится 25 калорий. Сколько минетов нужно сделать, чтобы набрать суточную норму калорий?

Ответ: 80.

А если представить, что обычная порция эякулята у мужчины меньше и ее калорийность равна приблизительно 5 калориям? Сколько минетов за день нужно сделать в таком случае?

Ответ: 400.

К чему мы пришли в итоге? От спермы поправиться невозможно, зато она хороша в качестве легкой белковой добавки. Принимать ее довольно занятно, да и во время ее производства оба партнера сжигают калории.

Вот такая занимательная математика для взрослых.

Врач сексолог высшей категории, психиатр, психотерапевт.

Работаю сексологом более 10 лет. Помогаю парам разрешить проблемы в сексуальной жизни.

Мужчинам нравится кончать женщинам в рот в завершения минета – это факт. Однако далеко не каждая девушка любит этот процесс. Даже если парень ведет здоровый образ жизни и вкус его спермы относительно нейтральный, сам процесс эякуляции может вызвать у женщины рвотный рефлекс. С этим можно бороться при помощи различных упражнений. Сегодня даже существуют курсы горлового минета, где девушек учат справляться с разными дискомфортными моментами оральных ласк. Минет – неотъемлемая часть сексуальной жизни современной пары. А глотать сперму или нет – выбор каждой девушки. Тем более, можно кончать на лицо или грудь – это очень эротично!

Сперма Калории – Telegraph

👉🏻👉🏻👉🏻 ВСЯ ИНФОРМАЦИЯ ДОСТУПНА ЗДЕСЬ ЖМИТЕ 👈🏻👈🏻👈🏻

Сперма Калории
Если вы у нас впервые: О проекте FAQ
Сколько всего калорий содержится в сперме?
автор вопроса выбрал этот ответ лучшим
Вот уж природный дар — сперма! Во всех отношениях. Только нужно правильно ее использовать)
Сперма имеет достаточно непростой химический состав. Как ни удивительно, но сами сперматозоиды составляют всего лишь десятую часть выработанной спермы. А калорийность ее колеблется в пределах от пятнадцати до тридцати калорий. В пересчете на один миллилитр калорийность будет раза в четыре меньше.
Кроме того, сперма содержит белок, холестерин, ряд микроэлементов, например, натрий, цинк, кальций. А еще в ее состав входят витамины С, В12. Сахар, лимонная кислота и фруктоза тоже являются составными частями спермы.
Вкус же спермы зависит от качества съеденной пищи.
То есть можно сделать вывод, что никакого вреда сперма не приносит. Но и наделять ее уж слишком полезными свойствами, явно переоценивать тоже не стоит. Потому что для достижения эффекта ее нужно потреблять в очень больших количествах).
Когда девушка глотает сперму, она глотает настоящее природное биологически активную добавку. Но на вес она влияет мало- лишь немного увеличивает распад молекул сахаридов и жиров. Зато чуть ли не половина субстратов лечит атеросклероз сосудов, некоторые вещества лечат печень, содержится куча полезных микроэлементов. Ну и, конечно же, есть много веществ для строительства женских половых гормонов.
Так что съесть сперму- это все равно что подкрепиться таблеткой с микроэлементами. Вроде и сахар есть, но мало.
94% массы спермы в сперме- это, вообще, вода.
Вопрос конечно же интересный, и я никогда об этом не задумывался…
Но всё же. Считается, что чайная ложка спермы (средняя доза эякуляции) содержит всего несколько калорий, то есть 5 миллилитров спермы содержат около 20 калорий.
В найденной мной информации сказано, что исследование проводилось на основе спермы всего лишь 10 мужчин, поэтому в дальнейшем цифры могут и измениться, но не думаю, что очень значительно.
Нашла вот такую таблицу. Оказывается, что сперма содержит и жиры, и белки, и углеводы. И в 1 порции спермы, а это 5 миллилитров, содержится 20 калорий. За 1 половой акт среднее семяизвержение составляет 5 миллилитров, это указана как 1 порция, а максимальное количество спермы за 1 раз может достигать 5 порций.
Сперма — вещество, которое выделяют железы мужского организма.
Калорийность спермы — 4-15 калорий.
Как говорят некоторые, от неё сильно не поправишься.
Белка достаточно — почти как в курином яйце.
По химическому составу сперма сложное вещество. Там есть калий, магний, фосфор, цинк, креатин, холестирол, глутатион, пиримидин, сорбитол, спермин, мочевина, фруктоза, витамин В12, аскорбиновая кислота, лимонную и дезоксирибонуклеиновую кислота и другое.
В одном миллилитре содержится 20 калорий.’Так что это не калорийное вещество. Существуют разные мифы, что она полезна и питательна, но это все выдумки. Кроме того, это также жидкость организма и если человек чем-то болен, то можно заразиться. И вкус довольно специфический.
А сколько из нее детей родиться могло..
Состав и калорийность спермы индивидуальны, зависит это от возраста мужчины, его питания и образа жизни.
Но в среднем одна порция спермы (чуть меньше чайной ложки) содержит менее одной калории.
Есть вот такая табличка калорийности спермы на английском:
Нашла информацию, что всего в одной порции спермы содержится 20 калорий. А в 1 миллилитре меньше — 4. В основном, в сперме много содержится белков. Эти данные выявлены на основе спермоанализа, думаю, что этому исследованию можно доверять.
Примерно всего от 4 до 15 калорий содержится в 1 миллилитре мужской спермы. Если принять во внимание, что спермы выделяется при семяизвержении около 5 миллилитров, то в одной порции спермы будет от 20 калорий до 75. Зато белка много.
В сперме мужчины — если считать, что за одно семяизвержение выделяется от 5 мл до 25 мл семенной жидкости (спермы), соответственно от 100 до 500 калорий, так как в одном миллилитре содержится примерно 20 калорий.
Трибулус купить недорого
magazintrav.ru
Травы Алтая, сборы трав, масла, бальзамы и др. в магазине Русские Корни. Недорого!
Наши магазины
Акции
Доставка
Оплата
Адрес и телефонМосква
Не является лекарством
добавить:ссылку|фото|видео|аудио|карту
Давала обещание похудеть в 2020?!
letbefit.ru
Еще есть время! Рацион Extra Light от BeFit — похудей до боя курантов!
Адрес и телефонМосква
₽
Медленные углеводы: список продуктов
multisport. ru
Таблица. Медленные углеводы: список продуктов для похудения. Рекомендации и советы
Москва
Есть интересный вопрос? Задайте его нашему сообществу, у нас наверняка найдется ответ!
Делитесь опытом и знаниями, зарабатывайте награды и репутацию, заводите новых интересных друзей!
Задавайте интересные вопросы, давайте качественные ответы и зарабатывайте деньги. Подробнее..

Сколько калорий в сперме?
Мужская сперма — факты, состав, калорийность — Фото-Мир и обо всем…
Ответы Mail.ru: я на полном серьезе. Какова калорийность спермы?
Состав спермы, чем полезна и вредна для женщин: из чего на самом деле…
Что содержится в мужской сперме : химический состав, количество калорий…
Несколько ответов и фактов о мужской сперме, данные из тестовой лаборатории sexhelper.info с точными таблицами и наглядными иллюстрациями
Сперма — явный признак конца полового акта, частый признак мужского оргазма и жидкость вызывающая массу споров: глотать или не глотать, вкусно или противно, полезно или вредно для женского организма и т. п. Сегодня мы ответим на ряд вопросов и даже покажем наглядное пособие для лучшего запоминания материала.
В качестве эталона взяты пробы семенной жидкости ( спермы ) 10 случайных мужчин после естественного семяизвержения. Экспериментально установлена средняя доза одной эякуляции ( порция ) — 5мл и предельные объемы семяизвержения за один половой акт ( от 1 до 5 порций ).
Как это не парадоксально, но сперма при семяизвержении состоит не из сплошных сперматазоидов, а из целого коктейля полезных составляющих, витаминов и примесей, более того, сперматазоидов в ней не более 10-15%, основные группы элементов в составе:
В общем случае, сперма взрослого и здорового мужчины состоит из сперматозоидов, витамина С, кальция, белков, натрия, цинка, лимонной кислоты, сахара и фруктозы, и т.
В одной порции ( 5 мл спермы ) содержится около
Судя из таблицы, выражение «глотнуть белков» не далеко от истины …
О том, как повлиять на вкус с пермы написанно много как в мире так и на нашем сайте, большинство пользователей сходятся во мнении, что негативно на вкус влияют алкоголь и никотин, положительно ананасы и прочие фрукты за 2 часа до семяизвержения.
Кроме всего прочего, регулярное употребление мяса и молочных продуктов придает сперме солоноватость, а иногда горечь, а фруктовая диета делает семя «мягким» и сладковатым.
Понравилась статья? Подпишитесь на канал, чтобы быть в курсе самых интересных материалов
Для женщин ничего не жалко, берите все!
Эта тема с раздела «Очумелые ручки » )))

Порно Махова
Порно С Огромными Сиськами
Внешние Признаки Девственницы
Смотреть Бесплатно Шоколадный Заяц
Грязные Брюнетка Шлюха Ее Жадный

Вынашивать ребенка помогает отец — Российская газета

Драма со стажем

…Стройные колонны свечей, выставленные перед ликами православных мучеников в самых намоленных российских церквах, паломничества к святым могилам, прикладывание к мощам. И все та же, доводящая до мигрени и депрессии мысль, что она никогда не станет мамой. Хотя 26 лет – какие годы! В принципе, можно было бы еще раз пройти обследование и убедиться в том, что она здорова.

И спокойно ждать своего «материнского часа». Но сочувствующие взгляды родственников, подозревающих ее в том, что она завидует своей младшей беременной сестре, и утешительное поглаживание просто выводили Татьяну, замужнюю даму со стажем, из себя. Татьяна даже не подозревала, что сбои в цикле, которые то и дело случались в последнее время, означали только одно: беременность уже неоднократно наступала, но просто не могла долго удержаться…

Это всего лишь одна история болезни из бесконечного цикла подобных семейных драм. Ведь помимо бесплодия существуют еще внематочная беременность, спонтанные выкидыши, детская смертность и детская инвалидность. Но самое главное, что у этих, казалось бы, чисто женских напастей в восьмидесяти процентах случаев виновник один. Его специалисты называют гордым именем «мужской фактор».

За мужественным названием скрывается то, что можно увидеть, лишь вооружившись электронным микроскопом, – белок.

Подопытным был муж

Направление по изучению молекулярных составляющих репродуктивной системы  человека родилось в 1970 году с открытием отечественными учеными Татариновым и Масюкевичем белка ТБГ  (трофобластический бета-гликопротеин).

Одной из знаковых находок того времени стал и белок-гликоделин, обнаруженный в 1976 году Дмитрием Петруниным только у беременных женщин. Позже выяснилось, что этот белок содержится в мужской сперме. Он оказался совершенно удивительным по своей роли в жизни человечества, за что впоследствии специалисты уважительно нарекли его «мужским фактором».

Любовь Посисеева, директор Ивановского научно-исследовательского института материнства и детства, стала номинантом национальной медицинской премии «Призвание» 2004 года нынешнего года за создание нового направления в медицине. «Мужской фактор» она изучает тридцать лет – с момента его открытия.

Посисеева работала в роддоме маленького городка Тейково Ивановской области акушером-гинекологом и сотрудничала с лабораторией своего учителя, знаменитого профессора Татаринова. Ее миссия как практикующего врача заключалась в том, чтобы практически оценить важность открытий своих коллег.

Сочетание исследовательской деятельности с врачебной практикой стало причиной собственного сенсационного открытия: она обнаружила, что у большинства ее пациенток, которые либо не могли забеременеть, либо не вынашивали потомство, была общая проблема – у глав семейств наблюдался очень низкий уровень гликоделина в сперме.

– Сначала над моим «хобби» все смеялись, – рассказала мне  Любовь Посисеева, – потому что первые свои эксперименты я проводила на собственном муже. Оказалось, что если  этот белок присутствует в достаточном количестве, он позволяет сформировать здоровое плодное яйцо, защищает будущего малыша от негативных внутренних и внешних воздействий и не выпускает плод  на свободу раньше положенного срока.

В сперме с низким уровнем гликоделина сперматозоиды ведут себя крайне вяло и неактивно. Причиной внематочной беременности тоже нередко является нехватка «мужского фактора», то есть вялость сперматозоидов. От этого же зависят врожденные патологии и детская смертность.

– Безусловно, мать в ответе за жизнь малыша, но наши исследования показали, что за развитие, здоровье и жизнь потомства ответственность полностью лежит на отце, – говорит Посисеева. 

Навострили уши

Как только Посисеева и ее коллеги определили роль гликоделина, а случилось это, когда она уже работала старшим научным сотрудником Ивановского НИИ материнства и детства, была срочно организована лаборатория, в которой отцов бездетных семей начали тестировать на «мужской фактор». Базировалась лаборатория сначала… на подоконнике.

Любовь Посисеева подчеркивает, что определение уровня «мужского фактора» ни в коем случае не носит унизительного характера для мужчины – сперму может в пузырьке принести и жена.

Кроме того, низкий уровень белка еще не означает, что мужчина не «настоящий мужик». Уровень «мужского фактора» может быть низким из-за разных обстоятельств – стрессов, экологии, как следствие заболеваний. Его несложно повысить, назначив курс индивидуального лечения, если, конечно, будущий отец не болел в детстве свинкой или водянкой яичек.

Если женщина уже лежит на сохранении из-за низкого уровня «мужского фактора», то его уровень можно повысить белком донора. Как правило, не мужа.

К девяностым годам в Ивановском НИИ материнства и детства вычисление «мужского фактора» приобрело такой  размах, что количество белка подсчитывалось за очень короткое время фактически по тестовой системе, аналогичной знаменитому тесту на беременность. Однако с началом кризиса в стране интерес к проблемам демографии заметно притупился. В настоящее время тестовая система создается заново.

В качестве реактива на выявление белка используется кровь из уха кролика, из которой получают антисыворотку. За границей это вещество на вес золота – 0,2 мл стоят 250 евро. В ивановской лаборатории от пузырьков с волшебными антисыворотками ломится холодильник, и о коммерциализации обследований нет и речи.

Ивановские специалисты надеются, что внедрение тестовой системы в жизнь поможет людям внимательнее относиться к планированию семьи, что впоследствии позволит избежать семейных трагедий и снизит детскую смертность.

Сколько в сперме содержится белка

Биохимический анализ спермы

Биохимический анализ спермы стал проводиться относительно недавно, но уже успел завоевать популярность среди медиков и пациентов с разными патологиями по части половой системы. Зачастую проходить подобное тестирование отправляют тех мужчин, у которых подозревают бесплодие. Результат расскажет о фертильности пациента. Причем отклонение от среднестатистических норм иногда может носить временный, а не постоянный характер. Из-за этого опытные врачи рекомендуют повторять контрольный срез, либо привлекать дополнительные форматы исследования.

Обычно временной промежуток между сдачей спермы на предмет биохимической расшифровки составляет около двух недель. В обоих случаях пострадавший обязан придерживаться правил, установленных сводкой подготовительных требований.

Во время такого исследования лаборанты учитывают морфологический состав семенной жидкости. Это означает, что специалисты будут учитывать не только степень подвижности сперматозоидов.

Дополнительно производится изучение параметров других элементов, входящих в состав, вроде белка акрозина.

Изучаемый материал

• Изучаемый материал
• Подготовительные меры
• Схема проверки
• Приблизительная расшифровка

Даже при стандартном микроскопическом осмотре спермы становится понятно, что эта биологическая жидкость представляет собой неоднородный состав. Он не отличается особенной прозрачностью и по текстуре напоминает слизистую консистенцию. Материал имеет специфический запах, который некоторые считают похожим на запах сырого каштана.

Привкус биологической жидкости напрямую связан с привычным рационом питания мужчины. Если представитель сильного пола переживает частые эякуляции, то они сказываются на вкусовых характеристиках, превращая ее в горькую жидкость. Причем состояние биологического материала изменяется уже через полчаса после выделения. Он становится вязким и изменяет цвет на белесый с серым оттенком. Здоровый партнер выделяет за один половой акт около 10 мл спермы.

Особенности биохимического содержания спермы отличаются в зависимости от стадии ее образования. Так, вещество, за выработку которого отвечает предстательная железа, содержит высокий процент лимонной кислоты и кислой фосфатазы. Данный этап предусматривает наличие ферментов, которые направлены на ее разжижение.

Отдельно рассматриваются параметры иммуноглобулинов, ведь именно они отвечают за формирование антител, которые напрямую влияют на качественную способность оплодотворять женские половые клетки.

Жидкая спермальная составляющая представлена несколькими секретами:

• семенных пузырьков;
• предстательной железы;
• уретральной железы;
• бульбо-уретральной железы.

Первый пункт отвечает за стабильное образование фруктозы, которая призвана обеспечивать стабильной передвижение сперматозоидов. Вещество в процессе метаболизма преобразуется в полезную энергию. Для нормального осуществления возложенных на него обязанностей биохимический тест должен показать около 12-15 ммоль/л.

Чем важна фруктоза

Снижение официального предела содержания фруктозы свидетельствует о том, что пациент страдает патологией семенных пузырьков. Чем больше отклонение, тем запущеннее оказывается стадия течения заболевания.

Также эта железа является ответственной за синтез трех других важных «топливных» элементов:

Все вышеперечисленное направлено на то, чтобы обеспечить сперматозоидам повышенную выживаемость, а также защитить их от возможных повреждений.

Если забор биологического материала для анализа был произведен верно, а результаты продемонстрировали сниженный процентный показатель фруктозы, то это первый признак олигоспермии. Болезнь характеризуется снижением концентрации сперматозоидов.

Причиной подобной аномалии становится воспалительный процесс, который локализируется в предстательной железе. Если же искусственным путем поднять уровень столь важного компонента до необходимой отметки, то получится восстановить подвижность сперматозоидов.

Но тут есть важный нюанс, который доктор озвучивает при изучении полученных в ходе биохимического обследования сведений. Касается он составления индивидуальной программы выравнивания уровня фруктозы при условии отсутствия недугов наследственного толка, затрагивающих активность семенных пузырьков. Если с этим все в порядке, то эксперт будет настаивать на обязательном пересмотре рациона питания.

Вместо вредной пищи и негативных привычек следует налегать на большее количество полезных овощей, фруктов, свежих соков, сделанных самостоятельно.

Дополнительно при изучении фруктозной составляющей внимание уделяют кислотной среде. У здорового представителя сильного пола она должна составлять 7,3 pH. Если параметры находятся в норме, но самочувствие все еще остается нестабильным, то стоит обратить внимание на простагландины.

Именно они отвечают за сокращение маточных труб женщины, заставляя яйцеклетку выполнять свои прямые обязанности. Если анализ не выявил простагландины, то это повод обратиться за помощью к квалифицированному урологу.

Параметры лимонной кислоты

Не менее важную часть работы выполняет предстательная железа, которая является генератором для предоставления лимонной кислоты. Она выступает ферментом, положительно сказывающимся на скорость транспортировки сперматозоидов.

Здоровая норма вещества должна фиксироваться в радиусе около 3,5 ммоль/л. Если же по заданной части имеются отклонения, то это говорит о дестабилизации простаты. Только представленный формат анализа способен качественно раскрыть состав эякулята в вопросах содержания лимнной кислоты.

Немаловажным пунктом числится щелочная и кислая фосфатаза, которая направлена на способствование разжижению спермы. Только при сохранении оптимальных условий спермии способны передвигаться достаточно активно, чтобы добраться до женских половых клеток.

За поддержку кислотно-щелочной среды отвечает всего два белка:

• спермин;
• спермидин.

Также часть выработки простагландин для сокращения мышечной ткани тоже вырабатывается простатой.

Когда цинк не в норме

Заключительным столпом для полноценного мониторинга состояния мужского полового здоровья выступает цинк, который непосредственно участвует в образовании биологической жидкости. Норма представляет собой 2,4 ммоль.

Если элемента обнаружено слишком много, то это практически всегда говорит о бесплодии. Но для подтверждения диагноза все равно придется провести ряд дополнительных клинических испытаний, заодно сдав спермограмму повторно приблизительно через половину месяца.

Угрозу представляет другая крайность – заниженное процентное содержание микроэлемента. Оно подскажет, почему созревших сперматозоидов оказывается всегда так мало.

Отрегулировать цинковую недостачу можно попытаться вручную. Для этого эксперт прописывает своему подопечному индивидуальный рацион питания, в изобилии предлагающий продукты с высоким содержанием цинка.

Вспомогательными маркерами отклонений числятся секреты уретральных желез, которые вырабатывают слизистые компоненты. Они являются гарантом образования стабильной щелочной среды.

Если среда во время лабораторного испытания оказалась кислой, то это говорит о постоянном попадании в нее остатков мочи.

Подготовительные меры

Подготовка к обследованию начинается приблизительно за пять дней до предполагаемого приема. На это время следует полностью отказаться от интимной близости, а также перестать употреблять алкогольные напитки.

Отдельно рассматриваются ситуации, когда мужчина еще до осмотра принимал назначенные лечащим доктором препараты. Иногда на период подготовки от них рекомендуют отказаться ради чистоты эксперимента. Но самостоятельно снимать лекарства из ранее одобренной программы лечения строго запрещено. Сначала стоит проконсультироваться с врачом.

Также за пять дней нужно воздержаться от посещения парной, сауны, физиопроцедур, которые тесно связаны с прогреванием и УВЧ.

Алгоритм сбора материала в клинике или на дом сохраняется идентичным:

1. Сначала следует помочиться, чтобы максимально опустошить мочевой пузырь.
2. Произвести подмывание.
3. Приготовить стерильный контейнер.
4. Начать мастурбировать, следя за тем, чтобы не дотрагиваться половым членном до стенок медицинской баночки.

Некоторые сомнительные советчики рекомендуют использовать для упрощения процедуры презерватив, но медики категорически против подобной «помощи». Она лишь способствует изменению показателей.

Также необходимо собрать всю порцию целиком, ведь сперма состоит из нескольких фракций, а проверке подлежат все из них:

• жидкость из мочевого канала;
• фракция, поступающая из простаты;
• основная масса сперматозоидов, поступающих из яичек и придатков;
• материал из семенных пузырьков для измерения фруктозы.

Последний аспект иногда предусматривает вообще полное отсутствие фруктозы, что говорит об азооспермии.

Схема проверки

Биохимический тест призван отыскать первоисточник проблем, связанных с резким или плавным уменьшением жизнеспособных сперматозоидов. Также методика позволяет разобраться с фертильностью, чтобы узнать, насколько хорошо сперма готова к непосредственному оплодотворению.

К способу прибегают даже тогда, когда следует детально изучить функциональные особенности простаты, семенных пузырьков, произвести контроль проходимости семявыводящих протоков.

Чтобы все это выявить, нужно задействовать фотометрическую технологию. Предложение подразумевает наличие в лаборатории специального высокоточного оборудования, а также определенных навыков лаборанта. Последний будет в ручном режиме сравнивать длину световых волн, которые поглощает сперма с этанолом. Для этого мастера пропускают световой луч сквозь особенные светофильтры строго заданного диапазона.

Собранные сведения выступят основанием для определения корня бесплодия. Удобства добавляет тот факт, что при невозможности зачать ребенка сразу по нескольким причинам, метод поможет выявить одним махом сразу все первоисточники.

На основе полученной информации о трех главных компонентах спермы уролог составит дальнейшую схему лечения и восстановительной терапии.

Приблизительная расшифровка

Кроме общепринятых требований, выдвигаемых к спермальным составляющим, лаборант обязательно изучит ряд других важных параметров.

Среди них выделяют:

• объем;
• время разжижения;
• кислотность;
• содержание лейкоцитов.

Здоровым объемом выступает около 2-5 мл. Но если уровень упал меньше допустимых 2 мл, то это повод задуматься о нарушениях функциональности семявыводящих каналов, семенных пузырьков или предстательной железы.

Олигоспермия является следствием патологии. Но существует также небольшая вероятность того, что причиной является недостаточная подготовленность пострадавшего. Не зря ведь медики настаивают на повторном мониторинге через две недели после предыдущего.

На объем почти всегда влияет отказ от воздержания в течение указанного срока. При частных половых актах проблема возрастает, ведь женское влагалище имеет кислотную среду. Во время длительных и частых половых актах качество и количество активных сперматозоидов резко снижается, что уменьшает их шансы на успешное выживание.

Учитывается время разжижения для составления общей картины здоровья. Отвечает за это особенный фермент, который генерирует предстательная железа. У каждого организма свои индивидуальные нормы для этого требования, но среднестатистическим показателем тут выступают рамки от 10 до 60 минут.

Если консистенция биологического материала остается неизменной свыше часа, то это обычно говорит о нестабильности работы простаты.

Замеры делаются по общей кислотности спермы, которая должна укладываться в строгие нормативы 7,2–8 единиц. Этот уровень является залогом стабильного передвижения спермиев к матке, успешно преодолевая повышенную для них кислотность влагалища.

• Почему нельзя самостоятельно садиться на диету
• 21 совет, как не купить несвежий продукт
• Как сохранить свежесть овощей и фруктов: простые уловки
• Чем перебить тягу к сладкому: 7 неожиданных продуктов
• Ученые заявили, что молодость можно продлить

Несмотря на то, что кислотность, выявленная через спермограмму, не является серьезным основанием для определения патологий. Из-за того что параметр является частой причиной для установления неправильного диагноза при других патологиях, следует очень внимательно относиться к изучению собранной информации.

Дополнительными оценочными принципами становится цвет и запах спермы. Несмотря на то, что эти два пункта являются вспомогательными, ведь микроскопия позволяет точно подсчитать эритроциты и сперматозоиды, его тоже берут на вооружение.

Нормальный цвет собранного материала должен предусматривать белый с серым или желтоватым оттенком, но если присутствует красноватый тон, то это расскажет о кровянистых вкраплениях.

Подобное развитие сценария является следствием новообразования любого характера, а также травмирование простаты, либо камня в предстательной железе.

Заключительным фактором полноценного мониторинга числятся лейкоциты. Образец, который является стандартом единицы для замеров посредством микроскопического исследования – «поле зрения», обязан содержать точную норму таких элементов. На 1 мл приходится 1 миллион эритроцитов.

Если лейкоцитов оказалось больше, то это сигнал о серьезных воспалительных процессах с локализацией в половых органах. Корнем проблемы могут оказаться урогенитальные инфекции, орхит или простатит.

В отличие от лейкоцитов в образце для изучения эритроцитов, а также слизи быть вообще не должно. Таков протокол Всемирной организации здравоохранения. Если же они себя проявили, то практически всегда позже доктор обнаружит онкологическое новообразование, либо камни в железе или же симптоматику везикулита. Слизь поведает о воспалении в придатках.

Также на выводы влияет оценивание подвижности сперматозоидов. Всего их существует три категории, которые маркируются латинскими буквами алфавита от А до D. Процент содержания каждого вида определяется индивидуально. Но самым важным типом из них выступает формат А, который представляет исключительно здоровые и молодые спермии.

Они передвигаются со скоростью приблизительно 0,025 мм/с. У здорового мужчины спермиев группы А должно быть хотя бы 25% от общего числа обнаруженных.

Если после всех произведенных расчетов у уролога все еще остается сомнение, то тогда назначается дополнительный тест MAR.

foodandhealth.ru

Сколько в протеине белка?

Отказ от ответсвенности

Обращаем ваше внимание, что вся информация, размещённая на сайте Prowellness предоставлена исключительно в ознакомительных целях и не является персональной программой, прямой рекомендацией к действию или врачебными советами. Не используйте данные материалы для диагностики, лечения или проведения любых медицинских манипуляций. Перед применением любой методики или употреблением любого продукта проконсультируйтесь с врачом. Данный сайт не является специализированным медицинским порталом и не заменяет профессиональной консультации специалиста. Владелец Сайта не несет никакой ответственности ни перед какой стороной, понесший косвенный или прямой ущерб в результате неправильного использования материалов, размещенных на данном ресурсе.

Чтобы принимать протеин правильно, любой спортсмен должен знать дозировку белка, которая ему необходима. Для этого следует ориентироваться на вес и рост спортсмена, а также на физические нагрузки, которые он испытывает. Если принимать добавку больше нормы, можно навредить здоровью.

Сколько белка в протеине

По сути, протеин – это непосредственно белок. Поскольку существует несколько видов протеина, содержание белка в них различается. Если взять средние показатели по всем видам продукта, то в 100 граммах протеина содержится от 70 до 90% белка.

Виды протеина

В спортивном питании представлено несколько разновидностей протеина, каждая из которых имеет свои особенности усвоения:

• сывороточный – производится на основе молочной сыворотки, которая проходит несколько степеней очистки;
• яичный – усваивается дольше сывороточного, но практически не имеет углеводов;
• казеиновый – производится из молочных продуктов, усваивается до 8 часов;
• соевый – имеет растительное происхождение и неполный аминокислотный состав;
• говяжий – мясной налог сывороточного протеина.

Также в продаже имеются комплексные протеины, которые включают в себя несколько видов белка.

Сколько раз в стуки следует употреблять

Чтобы сориентироваться в дозировке, необходимо узнать вес. На 100 кг веса спортсмена потребуется 250 грамм протеина в день.

Но употреблять его необходимо за несколько приемов. Обычно суточную норму делят на 6 частей.

Внимание! Важно помнить, что за один раз организм человека не способен усвоить больше 50 грамм белка.

После употребления одной дозы протеина полное усвоение состава происходит через 1–1,5 часа.

Чтобы понять, сколько именно нужно протеина конкретному человеку, следует определиться с целью, зачем он употребляет дополнительный белок:

1. Наращивание мышечной массы. При приеме протеина для наращивания массы мужчинам с нормальным и тучным весом необходимо 4 г белка на каждый кг веса. У женщин эта норма меньше примерно на 50 грамм. Если дама склонна к полноте, то общее количество протеина за день не должно превышать 250 грамм. При таком питании обязателен прием протеина утром на голодный желудок, чтобы предотвратить распад мышечной ткани, за полчаса до и после тренировки следует принимать быстрые протеины.
2. Для похудения. Если цель спортивного питания и походов в спортзал похудение, то норма белка для мужчин – до 160 грамм, а для женщин – 100–140.
3. Для создания рельефа мускулатуры. Женщинам – 180–220 г, а мужчинам – 200–260 грамм.

При похудении и для обретения рельефа необходимо использовать протеин с минимальным содержанием углеводов. Также параллельно можно использовать в питании различные жиросжигатели.

Внимание! При организации спортивного питания важно помнить, что белок не должен поступать исключительно из протеина. Нельзя забывать про обычное питание, в котором присутствуют белки животного и растительного происхождения.

Состав протеиновых смесей

Самым главным компонентом любой протеиновой смеси является белок. Его содержание всегда указано на упаковке. Например, если смесь 80%, то в 20 граммах протеина будет 16 граммов белка. Для более быстрого усвоения белков в смесях присутствуют жиры и углеводы. Также обязательно имеются аминокислоты. Остальные добавки зависят от производителя. Это могут быть витамины, минералы. Для более приятного потребления в протеин в небольших количествах добавляют пептиды и ароматизаторы.

Отказ от ответсвенности

ru.siberianhealth.com

Китайские ученые впервые в мире обнаружили ген, мутации которого ведут к патологии головки сперматозоидов_Russian.news.cn

Хэфэй, 11 октября /Синьхуа/ — Как сообщили во вторник в первой больнице Аньхойского медицинского университета, специалистам этой больницы впервые в мире удалось обнаружить ген SUN5, мутации которого приводят к патологии головки сперматозоидов, ведущей к мужскому бесплодию. Результаты исследования ученых опубликованы в последнем выпуске журнала The American Journal of Human Genetics.

«Здоровый сперматозоид имеет форму головастика, однако иногда возникает патология, при которой у него нет головки, либо соединяющая головку с хвостиком шейка искривлена», — рассказал профессор центра репродукционной медицины Аньхойского медицинского университета Чжу Фуси. В настоящее время около 15 процентов супружеских пар сталкиваются с проблемой бесплодия, и в 50 процентах случаев это происходит из-за мужского фактора, а главной причиной мужского бесплодия является тератоспермия — патология строения сперматозоидов. С 1981 года, когда был опубликован первый доклад об обнаружении «безголовых» сперматозоидов, в мире было зарегистрировано свыше 20 подобных случаев, однако до настоящего времени не было выявлено никаких генных мутаций, способных вызвать структурные изменения сперматозоидов.

Группа специалистов отделения урологии под руководством Чжу Фуси выявили мутацию гена SUN5 в восьми из 17 родословных, всего было обнаружено десять мутаций в различных участках. Белок SUN5 вырабатывается яичками, в зрелой сперме он содержится в средней части сперматозоида — между головкой и хвостиком. Ученые сравнили концентрацию и расположение белка SUN5 в сперматозоидах здоровых мужчин и мужчин с бесплодием. Им удалось доказать, что мутация гена SUN5 приводит к снижению содержания данного белка либо полному его отсутствию в зрелой сперме мужчин с патологией.

Результаты исследования свидетельствуют, что мутация гена SUN5 является главной причиной заболеваний, ведущих к патологии головки сперматозоидов /в 47,06 процента рассмотренных в ходе исследования случаев/. Ген SUN5 также является первым выявленным геном, оказывающим влияние на возникновение «безголовых» сперматозоидов. Результаты исследования китайских ученых предоставляют теоретическую базу для диагностирования патологии головки сперматозоидов и лечения бесплодия.

Феромоны: секрет сексуальной привлекательности или заблуждение?

• Алекс Райли
• BBC Future

25 мая 2016

Автор фото, Getty

Действительно ли запах человека несет в себе феромоны, которые действуют как афродизиаки, привлекая потенциальных сексуальных партнеров? Обозреватель BBC Future решил выяснить всю правду.

В 2010 году несколько десятков человек собрались в арт-галерее в нью-йоркском Бруклине, чтобы понюхать грязные футболки.

Вечеринка фетишистов? Вовсе нет — собравшиеся лишь хотели проверить, можно ли использовать обоняние для завоевания симпатий противоположного пола.

Правила на «феромонной вечеринке» были простыми: человек открывал запечатанный пакет с номерком, где лежала футболка, которую другой участник успел поносить.

Если запах открывшему нравился, с владельцем футболки можно было организовать свидание.

Необычное мероприятие имело успех, и с тех пор подобные встречи уже проходили в Лос-Анджелесе и Лондоне. Как писал один журнал, это отличный вариант для тех, кто «ищет любовь, полагаясь на свой нюх и святую веру во всесилие науки».

Представление о том, что феромоны могут помочь человеку найти сексуального партнера и спутника жизни, прочно укоренилось в массовой культуре. Некоторые даже покупают духи, которые рекламируются как «приворотное зелье».

В некоторых таких духах содержится андростенон — самое мощное вещество из тех, которые призваны повышать сексуальное влечение.

Как заявляют продавцы, оно усиливает женское либидо, а мужчин делает более привлекательными.

Другое вещество — андростенол — как утверждается, облегчает переход к более близкому общению.

Если верить рекламе различных феромонов, они могут сделать человека более раскованным, подчеркнуть мужественность или помочь расслабиться во время сексуальной близости.

Что же думает по этому поводу наука? Могут ли феромоны сделать нас сексуальнее? Действительно ли любовь витает в воздухе — или же это просто банальный запах человеческого тела?

Автор фото, Getty

Подпись к фото,

Термин «феромон» появился в 1959 году, когда ученых увлекло новое направление науки

Термин «феромон» появился в 1959 году, когда Петер Карлсон и Мартин Люшер из Института биохимии имени Макса Планка в Мюнхене предположили, что в облаке молекул, испускаемых животными, есть те, которые играют особую роль.

Эти вещества чем-то похожи на гормоны, однако они не циркулируют в крови, а выбрасываются наружу, чтобы влиять на поведение и физиологию других животных.

В отличие от обычных пахучих веществ, молекулы которых могут вызывать самую различную реакцию, механизм выделения феромонов развился в ходе эволюции для достижения вполне определенной цели при взаимодействии представителей одного вида.

В том же году был открыт первый феромон — бомбикол. Это вещество, которое выделяется самками тутового шелкопряда (Bombyx mori) и привлекает самцов на расстоянии многих километров.

Таким образом, бомбикол стал первым известным сексуальным феромоном — природным афродизиаком, переносимым по воздуху.

Бомбикол идеально подошел под определение феромона: во-первых, это простое вещество, состоящее всего из одной молекулы. Во-вторых, его действие узконаправленно — он действует только на один вид бабочек.

А в-третьих, он стабильно вызывает одну и ту же реакцию: самцы устремляются на источник этого вещества, даже когда поблизости нет ни одной самки.

Научную общественность охватил ажиотаж. Гормоны сразу были забыты как прошлый век, все бросились на изучение феромонов.

Вскоре после публикации пары сенсационных исследований один автор писал: «Последние 40 лет были поистине блестящим временем для эндокринологии; теперь же мы стоим на пороге расцвета экзокринологии».

Автор фото, Thinkstock

Подпись к фото,

Рецепторы мышей могут улавливать целый ряд химических сигналов, людям же этого не дано

И расцвет действительно начался. Упоминания о феромонах все чаще стали встречаться на страницах научных журналов.

Оказалось, что все формы жизни, от микробов до мышей, используют эти химические регуляторы, чтобы изменять поведение своих соплеменников.

Феромонами пронизаны воздух, земля и Мировой океан. Некоторые из них даже передаются напрямую, от особи к особи, как персональные молекулярные сообщения.

Кроме того, сексуальные феромоны были лишь началом. Ученые стали находить молекулы со всё новыми функциями: от регулирования репродуктивных циклов потенциальных партнеров до участия в механизме памяти.

И вот в 1971 году исследователи феромонов добрались и до людей.

Сначала было сделано открытие, которым в наше время никого уже не удивишь: у женщин, долго находящихся в одном пространстве, синхронизируются менструальные циклы.

Эта закономерность была отмечена в знаменитом исследовании Марты Макклинток, опубликованном в журнале Nature, когда она была еще студенткой Колледжа Уэллсли в штате Массачусетс.

Макклинток обратила внимание на то, что у 135 девушек, живших в одном пригородном студенческом общежитии в течение полугода, менструальные циклы сдвигались в сторону синхронизации.

С тех пор на это исследование многократно ссылались как на доказательство существования человеческих феромонов, способных синхронизировать репродуктивный период у женщин.

«Всем, кто рассказывает подобные истории, хочется, чтобы это было правдой, — говорит Тристрам Уайатт из Оксфордского университета. — Но на поверку оказывается, что это, скорее всего, не так».

Многочисленные исследователи, пытавшиеся воспроизвести результаты Макклинток, так и не смогли этого сделать, и в какой-то момент один из ее научных сотрудников, внимательно изучив данные, пришел к выводу, что наблюдаемый феномен мог быть не более чем статистическим артефактом.

Автор фото, SPL

Подпись к фото,

Обонятельные рецепторы в нашем носу отлично воспринимают запахи, но феромоны — совсем другое дело

Иными словами, к одному и тому же результату могла с равной вероятностью привести как химическая коммуникация, так и банальная случайность.

Длина и периодичность менструального цикла (5 дней из 28), а также его нерегулярность делают подобную синхронизацию весьма вероятной.

Однако в 70-е это предполагаемое открытие вскружило многим голову. Основываясь на исследовании Макклинток, британский врач Алекс Камфорт написал статью под названием «Вероятность обнаружения человеческих феромонов», где выразил уверенность в том, что до открытия феромонов homo sapiens осталось совсем немного.

В том же году в журнале New Scientist было опубликовано письмо Х. Кука, где автор рассказывал о том, что ему удалось обнаружить как минимум два феромона — в человеческом дыхании и поту.

Один, насколько автор мог судить, имел чесночный запах.

«Он содержится в воздухе, выдыхаемом женщиной, которая находится в состоянии полового возбуждения, и при этом не связан с поеданием чеснока», — уверял Кук.

Он также предположил, что этот феромон оказывает на мужчин возбуждающее действие, и именно поэтому женщины издревле добавляют чеснок в пищу.

«Второй человеческий феромон — это запах страха, который, безусловно, ощущают собаки», — продолжал автор, забыв о том, что феромоны по определению действуют в рамках одного вида.

Разумеется, такие заявления научным сообществом не принимались всерьез.

Однако были и другие, которые оставили более существенный след. Так, если попытаться проследить, откуда появилась современная идея о сексуальных феромонах человека, то наши поиски приведут нас на конференцию, которая состоялась в 1991 году в Париже.

Автор фото, Thinkstock

Подпись к фото,

У нас мало фактов, которые могли бы подтвердить, что люди или их братья-приматы могут чувствовать наличие химических веществ в воздухе так же, как, например, мыши

В начале того же года биохимики Линда Бак и Ричард Эксел из Колумбийского университета в Нью-Йорке обнаружили у мышей группу рецепторов, отвечающих за обоняние, каждый из которых кодируется отдельным геном.

Было доказано, что рецепторы, расположенные в носу млекопитающего, связываются с определенными пахучими веществами, запуская каскад сигналов, идущих по нейронам в мозг.

В зависимости от объема и соотношения веществ возникают различные запахи — мозг в некотором смысле считывает обонятельный штрихкод.

«Тогда мы впервые увидели, как работает обоняние», — говорит Уайатт. В 2004 году Бак и Экселу за эту работу присудили Нобелевскую премию.

Вместе с тем на конференции 1991 года внимание публики привлекло еще одно исследование. Двое психиатров из Университета Юты заявили о том, что нашли у людей два сексуальных феромона.

«Они тогда наделали шуму, — вспоминает Ричард Доти, директор Центра исследования обоняния и вкуса при Пенсильванском университете в Филадельфии. — Хотя всем и показалось, что это довольно странная история».

Исследователи заявили, что у 49 добровольных участников эксперимента «предполагаемые человеческие феромоны» увеличивали интенсивность электрических сигналов между вомероназальным органом и головным мозгом.

У мышей, а также многих других млекопитающих, этот орган, который также называют «вторичным носом», улавливает ряд химических сигналов — независимо от первичной обонятельной системы.

Исследование 2000 года, автором которого была Марта Макклинток, подтвердило эти выводы, что и привело к росту популярности идеи о человеческих феромонах.

Автор фото, Getty

Подпись к фото,

Запах, особенно знакомый, может привлекать, но к феромонам это не имеет никакого отношения

Тем не менее нет никаких доказательств того, что приматы, к которым относится и человек, умеют различать химические сигналы так же, как мыши.

У людей вомероназальный орган — это лишь рудимент, оставшийся от животных предков. Он состоит всего из нескольких пор внутри носовой полости, а нейронные связи между ним и мозгом у приматов почти отсутствуют.

«У людей ничего подобного нет», — говорит Джордж Прети из Центра исследования органов химического чувства в Филадельфии.

Но и сегодня на рынке можно найти все те же человеческие феромоны.

На самом деле некоторые исследователи, среди которых Ричард Доти, директор Центра исследований обоняния и вкуса в Филадельфии, считают, что феромоны не имеют существенного влияния ни на один из видов млекопитающих.

«Нет никаких фактов, подтверждающих наличие сигналов, которые воздействуют на поведение так, как нам хотелось бы думать», — говорит ученый.

Эта точка зрения была наиболее популярна в 1970-е годы, и Доти был одним из ее главных сторонников.

Млекопитающие, по мнению многих исследователей, слишком сложно организованы, чтобы такие простые молекулы могли влиять на их поведение.

Как писал один автор в 1976 году, «вероятно, не стоит извращать понятие феромона, столь полезное в исследовании поведения и физиологии насекомых, используя его для описания поведения млекопитающих».

Возьмем, к примеру, копулины — молекулы, обнаруженные в конце 1960-х у лабораторных макак-резусов.

Копулины, представляющие собой вагинальный секрет самок, вызывают сексуальное возбуждение, позывы к мастурбации и активное сексуальное поведение у самцов.

Автор фото, Thinkstock

Подпись к фото,

Проверить действие феромонов можно только на новорожденных младенцах

Тем не менее они не являются феромонами. Самцы, принимавшие участие в исследовании, уже встречали тех самок раньше и возбуждались, поскольку узнавали их по характерному запаху.

Таким образом, копулин представляет собой скорее ароматическое вещество, чем феромон. И действительно, его часто используют в производстве духов.

И таких примеров много, отмечает Доти, — многие исследования страдают от такой неточности в терминологии.

«Феромоном называют все что угодно — это слово уже давно перестало быть научным термином», — констатирует ученый.

Значительная часть так называемых феромонов содержит множество химических веществ, поэтому не удовлетворяют критерию простоты.

Некоторые из них «работают» лишь на отдельных испытуемых и не оказывают никакого эффекта на других.

И так же, как в случае с копулинами, их действие в основном объясняется наличием предыдущего опыта общения особей и распознаванием знакомого запаха.

Несколько лет назад Джейн Херст из Ливерпульского университета была согласна с Доти: млекопитающие и тем более люди слишком сложны, чтобы феромоны могли сыграть в их жизни сколько-нибудь значимую роль.

Однако в 2010 году она обнаружила новый вид белка — дарцин, который содержится в моче самцов мышей.

Этот белок, названный в честь любимца всех женщин мистера Дарси из романа «Гордость и предубеждение», не только привлекает самок, но и выступает в качестве стимулятора памяти, помогая им запомнить специфический запах самца и место встречи с ним.

Таким образом, белок функционирует и как аттрактант (вещество, привлекающее противоположный пол), и как усилитель памяти.

Интересно, что без дарцина — одного-единственного вида сигнального белка — самка перестает испытывать интерес к противоположному полу и не помнит предыдущих отношений.

«Я изменила свое мнение, — говорит Херст, ранее решительно опровергавшая идею существования феромонов у человека. — Есть определенные химические вещества, которые имеют право называться феромонами».

Для того чтобы выделить дарцин, Херст и ее коллегам пришлось вернуться к истокам. Они выделили активное вещество из мочи при помощи метода, взятого из первоначального исследования бомбикола 1959 года.

Выделенный феромон испытали на мышах. Оказалось, что чистый дарцин вызывает у животных ту же реакцию, что и моча.

Для того чтобы исключить фактор знакомого запаха, самок растили отдельно от самцов — они не видели, не слышали и не чувствовали запах самца ни разу в жизни.

В таких условиях реакция может быть только врожденной — обусловленной генами и нормальным развитием, а не опытом, полученным в течение жизни.

Вопрос в том, можем ли мы сделать то же самое с людьми? Ответ ученых: маловероятно.

«У людей практически невозможно проверить действие феромонов изолированно», — объясняет Херст.

Многолетний опыт общения с противоположным полом, личные предпочтения и отсутствие рефлекторных реакций — это помехи, влияние которых неизбежно исказит результаты исследования, как бы тщательно оно ни было организовано.

Поведение человека определяется столь огромным количеством внешних факторов, что однозначных выводов из эксперимента сделать будет нельзя.

Тем не менее это, возможно, не касается новорожденных. «С детьми работать гораздо проще, чем со взрослыми, — они еще не накопили опыта и не подверглись воздействию культуры», — говорит Уайатт.

Исследование, проведенное в 2009 году, указало возможный путь вперед.

При грудном вскармливании железы возле соска матери набухают и выделяют вместе с молоком дополнительный секрет.

Когда сосок оказывается возле лица младенца, это неизменно вызывает стереотипное поведение: дети открывают рот, высовывают язык и начинают сосать. Они так пытаются получить питание.

Важным фактом оказалось то, что секрет, взятый у других матерей, вызывает у детей точно такую же рефлекторную реакцию.

Следовательно, можно исключить вероятность того, что дети просто опознавали запах своей матери.

Как говорит Тристрам Уайатт, ученые надеются найти первый человеческий феромон именно при помощи этого ареолярного секрета.

Если искомое вещество удастся выделить и синтезировать в лаборатории, оно сможет помочь детям, имеющим проблемы с захватом груди — одной из основных причин детской смертности во многих развивающихся странах.

В сельских районах Ганы, например, по имеющимся оценкам, один час задержки в кормлении грудью после рождения является причиной 22% детской смертности.

Это также способствовало бы изучению феромонов в целом.

«Если мы обнаружим феромон молочных желез, то с большей уверенностью сможем вести поиск и других феромонов, способных воздействовать уже на взрослый организм», — отмечает Уайатт.

«Хотя в конечном итоге мы можем прийти к выводу, что человеческих феромонов не существует: ведь ни одна молекула такого рода до сих пор не найдена».

Получается, единственное, что можно с уверенностью сказать на данный момент, — это то, что у людей есть запах…

Helix

Выпуск 55 Здравствуйте! Вы получили 55-й выпуск рассылки Лабораторной службы Хеликс. Напоминаем, вы всегда можете обратиться с любыми вопросами, касающимися работы Хеликс, с помощью формы обратной связи на сайте. Также мы ждем вас в соцсетях: ВКонтакте, Фейсбук, Одноклассники, Твиттер. Присоединяйтесь! В вопросах кормления мамы не всегда слушают специалистов Мамы, кормящие грудью своих детей старше года, поступают так по совету других мам, а не врачей. Американская педиатрическая академия провела исследование, показавшее, что женщины в этом вопросе чаще ориентируются на мнение непрофессионалов. Прекращать грудное кормление, когда ребенку исполняется год, не обязательно. Обычно после года питание ребенка становится более разнообразным и грудное кормление постепенно прекращается. Исследователей заинтересовал вопрос, почему женщины все-таки продолжают кормить грудью подросших детей. Читать дальше Пара чашек чая в день могут спасти от остеопороза У любителей чая реже ломается бедренная кость. Исследователи из Шанхая подсчитали – 2-3 чашки чая в день снижают риск перелома бедра. Изучив данные о 200 тысячах людей, исследователи выявили зависимость между количеством регулярно выпиваемого чая и частотой переломов бедра. У тех, кто пьет одну или две чашки в день, переломы случаются на 28% реже, а у тех, кто пьет 2-3 чашки – на 37%. Читать дальше У подростков, пьющих сладкую газировку, портится память Тот, кто пьет много сладкой газировки, рискует не только фигурой, но и интеллектом. Напитки с большой концентрацией сахара, помимо влияния на метаболизм, оказывают негативное влияние на мозг. Память подростков, употребляющих подслащенные напитки, становится слабее, говорится в статье, опубликованной в журнале «Hippocampus». Читать дальше Для лечения бесплодия предложили использовать белок спермы Бесплодным парам в некоторых случаях не помогает экстракорпоральное оплодотворение, и беременность не наступает. Новое исследование, опубликованное в журнале Американской федерации обществ экспериментальной биологии, дает надежду на то, что в будущем проблема будет решена. Ученые синтезировали белок, который содержится в сперме и стимулирует процесс оплодотворения. В яйцеклетку вводились молекулы РНК (транскрипты), кодирующие этот белок, и происходило оплодотворение. Когда вместе со сперматозоидом в яйцеклетку вводилось вещество, замедляющее действие белка, оплодотворение не происходило. Читать дальше

Семенная плазма – обзор

1 Получение семенной РНКазы из природных источников

При наличии бычьей семенной плазмы можно получить умеренное количество BS-РНКазы с помощью одноступенчатой ​​процедуры очистки, которая дает около 1,2 мг белка на мл. плазмы. ¹⁰ Большие количества BS-РНКазы можно более удобно получать из семенных пузырьков быка, как подробно описано в следующем протоколе, который является модификацией процедуры Tamburrini et al . ¹⁰ предназначен для получения более 200 мг BS-РНКазы из 500 г семенных пузырьков за 3 дня.

Семенные пузырьки следует собирать у быков в течение нескольких часов после их смерти, освобождать от окружающей соединительной ткани и жира и либо немедленно обрабатывать, либо хранить при температуре -20° до 1 года. Если не указано иное, следующие шаги выполняются при 4°. Семенные пузырьки (500 г ткани примерно от 10 пар пузырьков) измельчают на мясорубке, смешивают с 500 мл 0.75 N H ₂ SO ₄ , затем гомогенизировали блендером Waring на полной скорости в течение 3 мин. Гомогенат время от времени перемешивают в течение 1 часа, затем центрифугируют при 14000 g в течение 20 мин. Супернатант фильтруют через марлю и отделяют. Осадок суспендируют в 500 мл 0,75 N H ₂ SO ₄ , повторно гомогенизируют, центрифугируют и фильтруют, как описано выше. Затем два отфильтрованных образца объединяют, добавляют твердый сульфат аммония до 50% насыщения (291 г/л) и перемешивают в течение 1 часа. Осадок удаляют центрифугированием, как указано выше, и надосадочную жидкость доводят до 100% насыщения сульфатом аммония (348 г/л). После 2–16 ч перемешивания образец центрифугируют, как описано выше, и осадок, содержащий около двух третей от общего количества BS-РНКазы, и супернатант сохраняют. Последнюю доводили до рН 9 добавлением по каплям 10 М NaOH и перемешивали в течение 3 часов. Это осаждает остаточную фракцию BS-РНКазы, которую собирают центрифугированием, как указано выше.Осадок после двух последних центрифугирований растворяют в общем объеме воды 80 мл и подвергают экстенсивному диализу против воды с использованием пробирок с отсечкой <12000 Да.

Диализированный препарат осветляют центрифугированием при 11 000 g в течение 40 мин, добавляют трис-HCl pH 8 и NaCl до конечной концентрации 0,1 М каждого и наносят на колонку 2,5×6 см из карбоксиметилцеллюлозы ( Whatman Clifton, NJ CM-32 или -52), предварительно уравновешенные в том же буфере. Хроматографию проводят при комнатной температуре при скорости потока 1 мл/мин с отбором фракций по 5 мл. Затем смолу промывают уравновешивающим буфером до тех пор, пока поглощение элюата при 280 нм не станет стабильно ниже 0,1. В этих условиях промывки все белки, кроме BS-РНКазы, элюируются из колонки. Затем BS-РНКазу элюируют со смолы 0,1 М Трис-HCl, pH 8, содержащей 0,3 М NaCl. После удаления соли диализом против воды белок концентрируют ультрафильтрацией и количественно определяют спектрофотометрически, используя значение E ^0.1% при 278 нм 0,465. Готовый препарат можно хранить при температуре -20° не менее года.

Чистоту образцов BS-РНКазы можно оценить с помощью SDS-PAGE ¹¹ с 12% полиакриламидными гелями. Ферментативная активность на РНК дрожжей в качестве субстрата, проверенная спектрофотометрическим анализом Кунитца, ¹² , должна давать удельную активность 30–40 ЕД/мг.

Гель-электрофорез спермы человека: простой метод оценки качества белков спермы | Базовая и клиническая андрология

Субъекты

Образцы свежей спермы были получены от 245 мужчин, обратившихся для оценки спермы в отделение вспомогательной репродукции нашей больницы (Медицинский центр Университета Лилля, Лилль, Франция). Все образцы оценивали в отношении (i) общепринятых параметров (объем спермы, концентрация сперматозоидов, количество сперматозоидов в эякуляте, подвижность и жизнеспособность) в соответствии с рекомендациями ВОЗ [4] и (ii) морфологии сперматозоидов в соответствии с модифицированным методом Дэвида. классификации [7].

Экстракция белков спермы

Каждый образец свежей спермы готовили для анализа белков, как описано ранее [6]. Семенную плазму, незрелые зародышевые клетки и несперматозоиды удаляли центрифугированием (350×g, в течение 20 минут при комнатной температуре) в среде 50 % PureSperm (Nidacon, Mölndal, Швеция)/FertiCult (FertiPro N.В., Бернем, Бельгия). Осадок спермы один раз промывали ресуспендированием в 1 мл трис-буферного солевого раствора (10 мМ Трис-HCl, pH 7,6, 100 мМ NaCl) и последующим центрифугированием (350×g, в течение 20 мин при комнатной температуре). Затем осадок спермы ресуспендировали в 500 мкл буфера для лизиса, содержащего 20 мМ Трис, 2% SDS и 1% смеси нуклеаз (GE Healthcare Life Sciences, Пискатауэй, Нью-Джерси, США). Лизаты обрабатывали ультразвуком на льду (40 Гц, 60 импульсов) и центрифугировали (14 000×g, в течение 20 мин при 4 °C). Супернатанты извлекали, а осадки отбрасывали.Концентрацию белка определяли по методу Брэдфорда (BioRad, Hercules, CA, USA) в соответствии с инструкциями производителя набора. Белковые лизаты до анализа хранили при температуре - 80 °C.

Одномерная СТРАНИЦА

Пятнадцать мкг экстрагированных белков из каждого подготовленного образца спермы разводили в буфере с додецилсульфатом лития (LDS 2×, Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США) в соответствии с инструкциями производителя. Белковые гомогенаты кипятили в течение 10 мин, быстро центрифугировали при 500×g (с использованием настольной центрифуги) и загружали в 4–12% полиакриламидный гель (NuPage® Bis-Tris PreCast, 12 лунок, Life Technologies).В первую лунку загружали маркеры молекулярной массы (Novex и Magic Marks, Life Technologies). Электрофорез проводили при постоянном напряжении 200 В в течение 1 ч. Полиакриламидные гели окрашивали реактивом Coomassie Blue (0,1% Blue G250 BioRad, Hercules, CA, США, 50% этанола ( v /v), 10% уксусной кислоты (v/v) и H ₂ 0). Белковые полосы визуализировали после обесцвечивания 7% (об./об.) уксусной кислотой и 10% этанолом в H ₂ O. Гели оцифровывали с помощью сканера Perfection V750 Pro (Epson France, Levallois-Perret, France) и Photoshop. Программное обеспечение Element 9 (Adobe, Париж, Франция).Чтобы оценить потенциальное влияние концентрации белка, большие количества общего белка (т.е. 20, 25 и 30 мкг) из образцов спермы загружали в 4–12% акриламидные гели и окрашивали реагентом кумасси синим. Для ингибирования семенных протеаз образцы спермы обрабатывали коктейлем ингибиторов протеаз (cOmplete™, Roche Diagnostics GmbH, Мангейм, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Одномерный ПААГ проводили дважды на каждом независимом образце. Денситометрическая интенсивность полос молекулярной массы от 110 до 80 кДа была количественно определена с использованием программного обеспечения ImageJ (версия 1. 47с, Национальный институт здравоохранения). Данные были выражены в условных единицах.

Идентификация белков

Белковые полосы, окрашенные кумасси-синим, трипсинизировали, и наносепарацию проводили с помощью системы высокоэффективной жидкостной хроматографии (ЖХ) U3000 (Dionex-LC-Packings, Саннивейл, Калифорния, США). После этапа предварительного концентрирования (с использованием картриджа C18, 300 мкм, 1 мм) образцы пептидов разделяли на колонке Pepmap C18 (75 мкм, 15 см) с применением градиента ацетонитрил/0,1% TFA: 0% ацетонитрил в течение 3 мин, от 0 до 15% в течение 7 мин, от 15 до 65% в течение 42 мин, от 65 до 90% в течение 5 мин и, наконец, 90% ацетонитрила в течение 6 мин.Скорость потока была установлена ​​на 300 нл/мин, и фракции автоматически собирались каждые 30 с (всего 110 фракций) на мишени AnchorChip™ MALDI с использованием коллектора фракций Proteineer™ FC (Bruker Daltonics, Бремен, Германия). Два мкл матрикса α-циано-4-гидроксикоричной кислоты (0,3 мг/мл в ацетоне:этаноле; 0,1% TFA-подкисленная вода, 3:6:1  v /об/об) добавляли на этапе сбора. Масс-спектрометрию (МС) и измерения МС/МС проводили в автономном режиме с использованием времяпролетного (TOF)/TOF масс-спектрометра Ultraflex™ II (Bruker Daltonics).Параметры спектрометра приведены в следующем разделе. Фрагментацию пептидов управляли программным обеспечением Warp LC™ (Bruker Daltonics) с использованием следующих параметров: отношение сигнал/шум > 15, более трех шагов МС/МС на фракцию, если был доступен сигнал МС, допуск 0,15 Да для пика слияние и устранение пиков, появившихся более чем у 35% фракций.

Измерения на приборе Ultraflex™ II TOF/TOF проводились в автоматическом режиме (с использованием FlexControl™ 3.0, Bruker Daltonics) для определения молекулярной массы, в режиме рефлектрона для MALDI-TOF пептидного массового фингерпринтинга (PMF) и в режиме «LIFT» для MALDI-TOF/TOF пептидного фрагментарного фингерпринтинга (PFF). Внешнюю калибровку в диапазоне 1000–3200 масс проводили с использованием [M + H] + моноизотопных ионов брадикинина 1–7, ангиотензина I, ангиотензина II, субстанции Р, бомбезина и адренокортикотропного гормона (ролик 1–17 и ролик 18–39). с использованием стандартного набора для калибровки пептидов (Bruker Daltonics).Вкратце, спектры МС были получены при ускоряющем напряжении 25 кВ, напряжении отражателя 26,3 кВ и импульсной экстракции ионов 160 нс. Каждый отдельный спектр был получен путем накопления данных от 800 лазерных импульсов. Для анализа LIFT-TOF/TOF MS/MS было выбрано не более пяти ионов-предшественников на образец. Ионы-предшественники были ускорены до 8 кВ и отобраны в ионном вентиле с синхронизацией. Метастабильные ионы, образовавшиеся в результате лазерно-индуцированного разложения, были дополнительно ускорены путем подачи напряжения 19 кВ в ячейку LIFT, а их массы были измерены в рефлектронном режиме.Списки пиков из спектров МС и МС/МС были созданы с использованием программного обеспечения Flexanalysis™ 3.3 (Bruker Daltonics). Комбинированные поиски PMF и PFF в базе данных UnitProt 2012_06_database (ProteinScape™ 2.1, Bruker Daltonics) выполнялись с помощью Mascot 2.3.02 (Matrix Science Ltd., Лондон, Великобритания). Таксономический анализ был ограничен человеческими последовательностями. Допустимы массовые допуски 75 частей на миллион и 1 отсутствующий сайт расщепления (для PMF) и допуск МС/МС 0,5 Да и 1 отсутствующий сайт расщепления (для МС/МС). Карбамидометилирование цистеина и окисление остатков метионина считали фиксированной и вариабельной модификациями соответственно.Релевантность идентичности белков оценивалась в соответствии с оценкой поиска молекулярной массы на основе вероятности; порог статистической значимости был установлен на уровне p  < 0,05.

Статистический анализ

Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения SAS (версия 9.3, SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США). Количественные данные были представлены в виде медианы [межквартильный размах (IQR)]. Нормальность распределения данных проверяли с помощью критерия Шапиро-Уилка. Количественные переменные спермы сравнивались с применением критерия Стьюдента.Количественные значения денситометрии для гелей сравнивали в тесте Крускала-Уоллиса. Потенциальные связи между значениями денситометрии и переменными спермы были проанализированы с использованием теста Спирмена. Порог статистической значимости был установлен на уровне p  < 0,05.

Границы | Экспрессия генов и синтез белка в митохондриях увеличивают продолжительность высокоскоростной линейной подвижности спермы кабана

Введение

Сперматозоиды млекопитающих находятся в половых путях самок в течение нескольких часов с момента эякуляции до процесса оплодотворения.Линейная подвижность, определяемая низкой поперечной амплитудой и высокой прямолинейной скоростью, необходима для миграции сперматозоидов из шейки матки в матку, а затем в яйцеводы (Shalgi et al., 1992; Suarez and Pacey, 2006). Сразу после овуляции капацитированные сперматозоиды покидают эпителиальные клетки яйцевода и перемещаются в ооцит (Demott and Suarez, 1992; De Lamirande et al., 1997). Капацитированные сперматозоиды демонстрируют гиперактивированный статус (Suarez, 2008), определяемый как высокая криволинейная скорость, а также высокая латеральная амплитуда, и проникают в ооцит для успешного оплодотворения (Stauss et al. , 1995). Паттерны подвижности сперматозоидов зависят от движения жгутиков; симметричное движение жгутика индуцирует линейный паттерн подвижности, тогда как асимметричное движение связано с гиперактивацией (Phillips, 1972; Suarez et al., 1991; Ho et al., 2002; Curtis et al., 2012). Жгутик сперматозоидов млекопитающих состоит из девяти сросшихся пар дублетов микротрубочек, окружающих две центральные одиночные микротрубочки (Fawcett, 1970; Woolley and Fawcett, 1973). Кроме того, теория скользящих филаментов адаптирована к жгутикам сперматозоидов, а именно, подвижность сперматозоидов индуцируется продукцией АТФ (Huxley, Niedergerke, 1954; Summers, Gibbons, 1971; Brokaw, 1972).

Гликолиз и митохондриальное окислительное фосфорилирование (OXPHOS) являются двумя основными метаболическими путями образования АТФ в клетках млекопитающих. Метаболические пути клеток изменяются в зависимости от доступности кислорода и состава метаболических субстратов в окружающей их среде (Gohil et al., 2010; Potter et al. , 2016). Когда клетки HepG2 культивировали в среде с высоким содержанием глюкозы, путь гликолиза сильно активировался; однако снижение уровня глюкозы в среде выключало гликолитический путь, чтобы включить путь OXPHOS для образования АТФ в клетках (Marroquin et al., 2007). Аминокислоты и пируват являются субстратами цикла ТСА в митохондриях и присутствуют в высоких концентрациях как в семенной плазме, так и в маточной жидкости (Marden, 1961; Brown-Woodman and White, 1974; Harris et al., 2005). С другой стороны, высокий уровень глюкозы выявляется в жидкости яйцевода, особенно после овуляции (Nichol et al., 1992; Vecchio et al., 2007; Umehara et al., 2018). Следовательно, для успешного оплодотворения in vivo сперматозоиды, вероятно, используют различные метаболические пути для производства АТФ в каждом состоянии, как и в соматических клетках (Ruiz-Pesini et al., 2007; Стори, 2008). Общепризнанно, что путь гликолиза необходим для гиперактивации сперматозоидов (Du Plessis et al., 2015). Однако имеется ограниченная информация о роли митохондрий в производстве АТФ в отношении моделей подвижности сперматозоидов.

Митохондрии, субклеточные органеллы с двойной мембраной, имеют собственный наследуемый от матери геном митохондриальной ДНК (мтДНК), который кодирует 13 полипептидов, 22 тРНК и 2 рРНК. Полипептиды являются важными субъединицами комплексов митохондриальной цепи переноса электронов (ЭТЦ), в то время как тРНК и рРНК необходимы для трансляции полипептидов (Anderson et al., 1981). Транскрипция митохондриальной мРНК (например, субъединицы 1–6 НАДФН-дегидрогеназы ( mt-Nd1 – mt-Nd6 ), субъединицы 1–3 цитохром-с-оксидазы ( CoxI – CoxIII ) и т. д., а также процессы их трансляции) активируются с повышением митохондриальной активности и уровня АТФ в стимулированных сывороткой клетках HeLa (Xiong et al., 2012), поэтому мы предположили, что митохондриальный OXPHOS активируется в сперме для снабжения АТФ, и их процессы транскрипции и трансляции начинают функционировать в подвижность сперматозоидов. Следовательно, настоящее исследование было проведено, чтобы (1) определить, изменяются ли модели подвижности сперматозоидов и метаболические пути при различных уровнях глюкозы, (2) понять индукцию экспрессии генов и синтеза белка в митохондриях сперматозоидов и (3) выяснить роль митохондриальной транскрипции и трансляции в подвижности сперматозоидов.

Материалы и методы

Материалы

Рутинные химикаты и реагенты были получены от Nakarai Chemical Co. (Осака, Япония) или Sigma Chemical Co.(Сент-Луис, Миссури, США).

Коллекция животных и спермы

В этом исследовании использовались пять здоровых, плодовитых и половозрелых хряков (в возрасте от 2 до 4 лет). Хряки содержались индивидуально, содержались при естественном дневном свете, получали базовый рацион и имели свободный доступ к воде. Обогащенную спермой фракцию еженедельно собирали у каждого хряка с использованием техники «рука в перчатке». Обогащенную спермой фракцию фильтровали через двойную марлю.

Заявление об этике

Все животные и экспериментальные процедуры подвергались лечению в соответствии с Руководством Национального института здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных, одобренным Комитетом по уходу и использованию животных Университета Хиросимы (номер утверждения: E18-1).

Инкубация спермы

Свежую сперму разводили раствором Модены, состоящим из 153 мМ D -глюкозы, 26,7 мМ тринатрийцитрата, 11,9 мМ гидрокарбоната натрия, 15,1 мМ лимонной кислоты, 6,3 мМ ЭДТА-2Na, 46,6 мМ Трис, 1000 МЕ/мл пенициллина G. калия и 1 мг/мл амикамицина (Okazaki et al., 2012). Концентрацию глюкозы в растворе Модены (153 мМ) принимали за 100%. Лактоза частично использовалась с глюкозой для приготовления различных доз разбавителя глюкозы (153, 122.4, 91,8, 61,2, 30,6 и 0 мМ; а именно 100%, 80%, 60%, 40%, 20% и 0%), потому что сперматозоиды не использовали лактозу в качестве энергетического субстрата. Сперматозоиды инкубировали в течение 1 ч при 37°С в каждой среде с разным содержанием глюкозы. Часть спермы инкубировали с различными концентрациями ротенона (0, 10, 100 нМ, ингибитор комплекса I) в течение 3 ч при 37°С в 30,6 мМ глюкозной среде (20% глюкозы). Другие сперматозоиды инкубировали с различными концентрациями D -хлорамфеникола (ингибитор митохондриальной трансляции, CRP: 0, 200, 400, 600, 800 нг/мл), циклогексимида (ингибитор трансляции мРНК, CHX: 0, 50, 100 нг/мл). мл) и α-аманитин (нуклеарный ингибитор транскрипции, AMNT: 0, 10, 50, 100 нг/мл) в течение 3 ч при 37°C в течение 30.6 мМ глюкозная среда (20% глюкозы). Кроме того, сперматозоиды также инкубировали в среде с 30,6 мМ глюкозы (20% глюкозы) в течение до 6 ч при 37°C, чтобы оценить, работают ли транскрипция и трансляция в митохондриях сперматозоидов или нет.

Оценка подвижности сперматозоидов с помощью системы компьютерного анализа спермы (CASA)

После инкубации спермы при различных обработках в предварительно нагретую счетную камеру помещали в общей сложности 10 мкл образца. Согласно нашему предыдущему исследованию (Umehara et al., 2018), треки сперматозоидов (0,5 с, 45 кадров) снимали с частотой 60 Гц с помощью системы CASA (HT CASA-Ceros II; Hamilton Thome, MA, USA). Зафиксировано более 200 индивидуальных траекторий. Непрогрессивная моторика (%) = общая моторика (%) — прогрессивная моторика (%).

Целостность мембраны

Целостность мембраны оценивали с использованием набора LIVE/DEAD Sperm Viability Kit (L7011; Thermo Fisher Scientific), как описано ранее (Zhu et al., 2017). Вкратце, образцы окрашивали SYBR-14/PI.Окрашивание анализировали на проточном цитометре (FAC-S Calibur, BD Biosciences) при возбуждении/испускании = 485/535 нм для флуоресценции SYBR-14, возбуждении/испускании = 525/590 нм для флуоресценции PI. Всего было проанализировано 50 000 событий, специфичных для сперматозоидов. Данные обрабатывали с помощью программы CellQuest (BD Biosciences).

Митохондриальная активность

Митохондриальную активность сперматозоидов измеряли с помощью набора для анализа MitoPT ^® JC-1 (911, ImmunoChemistry Technologies, llc. ) в соответствии с Treulen et al.(2016). Вкратце, образцы спермы инкубировали с 500 мкл однократного рабочего раствора при 37°C в течение 30 мин в темноте, митохондриальную активность анализировали методом проточной цитометрии с использованием фильтра с полосой пропускания 574/26 нм (Attune ^® NxT Acoustic Focusing Cytometer). , Invitrogen) и измеряли как среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) оранжевых агрегатов JC-1. Всего было проанализировано 50 000 сперматозоидов.

Измерение уровня АТФ в сперме

Набор

Enzylight ^TM ATP Assay Kit (EATP-100, Bioassay System, Hayward, CA, США) использовали для определения уровня АТФ в сперме в соответствии с инструкциями производителя.Вкратце, образцы спермы смешивали с буфером для анализа и субстратами, а затем измеряли люминесценцию с помощью люминометра (2030 Multilabel Reader ARVO X4; PerkinElmer Inc., Уолтем, Массачусетс, США). Производство АТФ рассчитывали по концентрации сперматозоидов и выражали в нмоль/10 ⁷ сперматозоидов.

Экстракция РНК и полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР)

Тотальную РНК получали из свежей спермы и клеток гранулезы (положительный контроль) с использованием мини-набора RNAeasy (QIAGEN Sciences, Джермантаун, Мэриленд, США) в соответствии с инструкциями производителя.Обратную транскрипцию (ОТ) выполняли с использованием 500 нг полидезокситимидина и 0,25 ед. обратной транскриптазы вируса миелобластоза птиц (Promega, Мэдисон, Висконсин, США) при 42°С в течение 75 мин и 95°С в течение 5 мин. Анализы ОТ-ПЦР проводили с помощью KOD FX Neo (TOYOBO Life Science, Осака, Япония) в соответствии с инструкциями производителя. Конкретные пары праймеров, использованные в ОТ-ПЦР, показаны в таблице 1; Продукты ПЦР разделяли на 2% (вес/объем) агарозных гелях.

Таблица 1. Список праймеров, используемых для ОТ-ПЦР, и ожидаемый размер.

Количественные ПЦР-анализы

Количественный ПЦР-анализ в реальном времени выполняли, как и ранее (Shimada et al. , 2008). Вкратце, кДНК и праймеры, показанные в таблице 1, добавляли к 15 мкл общего реакционного объема мастер-микса Power SYBR Green PCR (Applied Biosystems). Затем проводили ПЦР с использованием системы ПЦР в реальном времени StepOne (Applied Biosystems).

Иммунофлуоресценция

Сперматозоиды промывали PBS и фиксировали 4% параформальдегидом в течение 5 мин.Сперму наносили на предметные стекла, затем пермеабилизировали 0,5% Triton X-100 в PBS. Неспецифическое связывание блокировали с помощью PBS, содержащего 10% бычьего сывороточного альбумина (масса/объем) (Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США) в течение 30 минут при комнатной температуре. Сперматозоиды подтверждали с помощью антител к субъединицам НАДФН-дегидрогеназы 1 (MT-ND1) (1973-1-AP, Proteintech, США), разбавленных в соотношении 1:100, антител к субъединицам 6 НАДФН-дегидрогеназы (MT-ND6) (bs-3955R; Bioss, Inc., Бостон, Массачусетс, США) и антитело к субъединице A7 НАДН-убихиноноксидоредуктазы (NDUFA7) (ab140871; Abcam, США). Антигены визуализировали с помощью биотинилированного козьего антикроличьего Cy3-IgG или ослиного антикозьего FITC-IgG (1:200). Затем сперму инкубировали с 4 ^‘ ,6 ^‘ -диамидино-2-фенилиндолом (DAPI; 5 мкг/мл; Sigma-Aldrich). Цифровые изображения были получены с использованием микроскопа BZ-9000 (Keyence Co., Осака, Япония). Одновременно готовили отрицательный контроль без первичных антител.

Вестерн-блоттинг

вестерн-блоттинга были выполнены в соответствии с нашим предыдущим исследованием (Umehara et al., 2018). Общий белок экстрагировали из спермы в буфере для образцов с додецилсульфатом натрия (SDS). Белок разделяли с помощью 12,5% SDS-PAGE и переносили на мембрану для блоттинга PVDF (GE Bioscience, Ньюарк, Нью-Джерси, США). Сайты неспецифического связывания блокировали инкубацией в трис-буферном солевом растворе (TBS), содержащем 0,1% (об./об.) Tween-20 и 5% (вес./об.) бычьего сывороточного альбумина (Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США). ). Мембраны подвергали иммуноблотингу с первичными антителами [анти-MT-ND1, анти-MT-ND6, анти-NDUFA7 и анти-α-тубулин (2148; Cell Signaling Technology, Inc.)] разбавляли 5% бычьим сывороточным альбумином в TBS-Tween (разведение 1:1000) в течение ночи при 4°C. Затем инкубировали с HRP-конъюгированными вторичными [козьими антикроличьими антителами (7074S, Cell Signaling Technology, Inc.) для MT-ND1, MT-ND6 и α-тубулином, ослиными антикозьими антителами (ab97110, Abcam, США) для NDUFA7, разведение 1:5000]. После промывки в TBST выполняли детекцию усиленной хемилюминесценции (ECL) с использованием реагентов ECL ^TM Prime Western Blotting Detection Reagents (RPN2235, GE Bioscience) в соответствии со спецификациями производителя и соответствующим экспонированием блотов на рентгеновскую пленку Fuji (Fujifilm , Токио, Япония).Интенсивность полос анализировали с использованием анализатора Gel-Pro (Media Cybernetics, Роквилл, Мэриленд, США).

Статистический анализ

Перед статистическим анализом все данные были проверены на нормальность и однородность дисперсии. Данные были преобразованы путем преобразования квадратного корня арксинус, когда это необходимо. Данные из трех повторов для сравнения были выполнены либо с помощью теста Стьюдента t , либо однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки (Statview; Abacus Concepts, Inc., Беркли, Калифорния, США). Все значения представлены как среднее ± стандартная ошибка (SE). Лечение считали статистически отличающимся друг от друга при p <0,05.

Результаты

Состояние с низким содержанием глюкозы повышает митохондриальную активность и характер подвижности сперматозоидов при 1-часовой инкубации

Следы подвижности сперматозоидов, полученные с помощью CASA, показали, что инкубация в среде с высоким содержанием глюкозы приводила к образованию кругообразных следов, а в условиях низкого уровня глюкозы — к линейным следам (рис. 1А).Общая подвижность сперматозоидов существенно не изменилась при всех концентрациях глюкозы [от 30,6 мМ (20%) до 153 мМ (100%)] в средах (рис. 1В). Однако снижение уровня глюкозы со 153 мМ до 30,6 мМ значительно увеличило поступательную подвижность сперматозоидов и прямолинейную скорость, уменьшило непрогрессивную подвижность дозозависимым образом (рис. 1А, С-Е). Высокая линейная подвижность наблюдалась до 3 ч; однако общая подвижность, прогрессивная подвижность и прямолинейная скорость были значительно снижены через 6 часов инкубации (дополнительная фигура 2).Между тем, не наблюдалось существенной разницы в боковой амплитуде (рис. 1F), показателе оценки гиперактивации среди групп лечения. Митохондриальная активность также значительно увеличилась за счет снижения уровня глюкозы в среде инкубации (рис. 1G и дополнительная рис. 1). Однако уровень АТФ не показал существенной разницы между группами лечения (рис. 1H).

Рисунок 1. Состояние с низким содержанием глюкозы улучшает подвижность сперматозоидов за счет усиления митохондриальной активности через 1 час инкубации. (A) CASA определил изменения подвижности сперматозоидов с кольцевой на линейную путем снижения уровня глюкозы со 153 мМ до 0 мМ (а именно 100–0%). (B–F) Динамические изменения параметров сперматозоидов: (B) общая подвижность, (C) непрогрессивная подвижность (D) прогрессивная подвижность, (E) прямолинейная скорость и (F) боковая амплитуда. (G) Кинетические изменения активности митохондрий. (H) Уровень АТФ в сперме.Значения указаны как среднее значение ± стандартная ошибка среднего (SEM) трех повторностей. Столбцы с разными строчными буквами значительно различаются ( p < 0,05). Буквы по оси X обозначаются как – G, глюкоза; л, лактоза; ФС, свежая сперма.

Добавление ротенона в инкубационную среду снижает активность митохондрий, уровень АТФ и кинетические характеристики сперматозоидов

Чтобы понять взаимосвязь между характером подвижности сперматозоидов и продукцией митохондриальной АТФ, в среду с низким содержанием глюкозы добавляли ротенон (ингибитор комплекса I) [30.6 мМ (20%) глюкозы]. Треки подвижности сперматозоидов и аналитические данные CASA показали, что прогрессивная подвижность и прямолинейная скорость значительно снижались при лечении ротеноном в 1- и 3-часовые точки в зависимости от дозы, тогда как непрогрессивная подвижность увеличивалась. (Рисунки 2А-D). Однако добавление ротенона не повлияло на общую подвижность сперматозоидов во время инкубации (рис. 2Е). Помимо данных о подвижности, целостность мембран сперматозоидов, использованная для оценки выживаемости, не показала значительных различий между группами лечения (рис. 2F).Митохондриальная активность и уровни АТФ были значительно снижены при добавлении ротенона дозозависимым образом (рис. 2G, H) через 1 час.

Рисунок 2. Сперматозоиды, инкубированные с ротеноном в 30,6 мМ глюкозной среде, изменяют митохондриальную активность, уровень АТФ и кинетические паттерны. (A–E) Кинетические изменения паттернов подвижности сперматозоидов через 1 и 3 ч инкубации, (A) треков подвижности, полученных из CASA, (B) непрогрессивная подвижность, (C) прогрессивная подвижность , (D) прямолинейная скорость, (E) общая подвижность. (F–H) Ротенон-индуцированные изменения митохондриальных свойств через 1 час инкубации, (F) целостность мембраны, (G) митохондриальная активность и (H) уровни АТФ. Значения указаны как среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. Столбцы с разными строчными буквами значительно различаются ( p < 0,05).

Транскрипция и трансляция в митохондриях сперматозоидов работают во время инкубации

Чтобы выяснить, работают ли транскрипция и трансляция в митохондриях сперматозоидов, мы проверили экспрессию 13 генов, полученных из мтДНК, и 3 генов, полученных из ядерной ДНК, в сперме.Клетки гранулезы использовали в качестве положительного контроля. Мы обнаружили все 13 мРНК, кодируемых митохондриями, как в сперматозоидах, так и в гранулезных клетках. Однако кодируемые ядром мРНК NDUFA7, NDUFB10 и NDUFS4 не были обнаружены в сперме с помощью 40-цикловой ПЦР, хотя сильно экспрессировались в гранулезных клетках (рис. 3А). Кроме того, экспрессия генов mt-Nd1 и mt-Nd6 была значительно увеличена в 3-часовой и 6-часовой точках, но не изменилась в 1-часовой точке (рис. 3B, C). Точно так же положительные полосы вестерн-блоттинга MT-ND1 и MT-ND6 показали, что интенсивность митохондриальных белков значительно увеличилась через 3 часа и 6 часов, но не изменилась через 1 час (рис. 3D-F, p <0.05). При этом сигнал белка NDUFA7, кодируемого ядром, не менялся в течение 6-часового периода инкубации (рис. 3D, G). Мы также заметили, что иммунолокализация MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7 была в средней части спермия, которая также является местом расположения митохондрий (рис. 3H).

Рисунок 3. Транскрипция и трансляция в митохондриях сперматозоидов. (A) Полученная ОТ-ПЦР экспрессия митохондриальных и ядерных генов, где – S, сперма хряка; P, положительный контроль (клетки гранулезы яичника свиньи). (B,C) Зависимые от времени изменения экспрессии генов mt-Nd1 (B) и mt-Nd6 (C) генов в течение 6 ч инкубации. (D) Изображение вестерн-блоттинга, показывающее экспрессию белка, кодируемого митохондриями (MT-ND1 и MT-ND6), белка, кодируемого ядром (NDUFA7), и α-тубулина во время 6-часовой инкубации. (E–G) Количественная экспрессия MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7 на α-тубулине (контроль), полученная в результате вестерн-блоттинга. (H) Иммунолокализация MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7 в сперме хряка, шкала показывает 5 мкм. Значения указаны как среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. Столбцы с разными строчными буквами значительно различаются ( p < 0,05).

Ингибитор митохондриальной трансляции (CRP) снижает митохондриальную активность, уровень АТФ, синтез белка, а также модели подвижности сперматозоидов

спермы инкубировали с различными дозами (0, 200, 400, 600, 800 нг/мл) CRP, специфического митохондриального ингибитора трансляции, в течение 3 часов.Через 3 часа прогрессивная подвижность, прямолинейная скорость, митохондриальная активность и уровни АТФ были значительно снижены при дозах 400, 600 и 800 нг/мл (рис. 4A, C-F), в то время как непрогрессивная подвижность увеличилась ( Рисунок 4Б). Более того, наблюдается значительное снижение интенсивности белков MT-ND1 и MT-ND6 только при более высоких (600 и 800 нг/мл) дозах (рис. 4G-J). Целостность мембраны сперматозоидов не показала существенной разницы (рис. 4K).

Рис. 4. Влияние D -хлорамфеникола (CRP) на сперму хряка при 3-часовой инкубации с различными дозами (0, 200, 400, 600, 800 нг/мл). (A–F) Дозозависимые изменения в сперматозоидах (A) общая подвижность, (B) непрогрессивная подвижность, (C) прогрессивная подвижность, (D) прямолинейная скорость, (E) митохондриальная активность и (F) уровень АТФ. (G) Изображение вестерн-блоттинга, показывающее экспрессию MT-ND1, MT-ND6, NDUFA7 и α-тубулина. (H–J) Количественная экспрессия MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7 на α-тубулине (контроль), полученная в результате вестерн-блоттинга. (K) Целостность мембран, измеренная в сперме. Значения представляют собой средние значения ± SEM для трех повторов. Столбцы с разными строчными буквами значительно различаются ( p < 0,05).

С точки зрения эксперимента, зависящего от времени, наблюдалось значительное ( p < 0,05) снижение прогрессивной подвижности сперматозоидов, прямолинейной скорости (рис. 5A, D, E), митохондриальной активности и АТФ при 600 нг/мл CRP. уровни (рис. 5F, G) через 3 часа инкубации, но не через 1 час.Кроме того, добавление 600 нг/мл CRP значительно увеличивало непрогрессивную подвижность в 3-часовой точке инкубации (рис. 5C). Однако общая подвижность не изменилась при добавлении 600 нг/мл CRP как через 1 час, так и через 3 часа (рис. 5В). Кроме того, когда сперму инкубировали с 600 нг/мл CRP, интенсивность белков MT-ND1 и MT-ND6 значительно снижалась через 3 часа, но не изменялась через 1 час (рис. 5H–J, p < 0,05), тогда как сигнал белка NDUFA7 не изменился во время инкубации (рис. 5H, K).

Рисунок 5. Влияние 600 нг/мл CRP на сперму хряка во время 3-часовой инкубации в 30,6 мМ глюкозной среде. (A) Изменения следов подвижности сперматозоидов, генерируемых системой CASA. (B–G) Зависимые от времени изменения сперматозоидов (B) общая подвижность, (C) непрогрессивная подвижность (D) поступательная подвижность, (E) прямолинейная скорость, (F) митохондриальная активность и (G) уровень АТФ. (H) Изображение вестерн-блоттинга, показывающее экспрессию MT-ND1, MT-ND6, NDUFA7 и α-тубулина. (I–K) Количественная экспрессия MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7 на α-тубулине (контроль), полученная в результате вестерн-блоттинга. Значения представляют собой средние значения ± SEM для трех повторов. Столбцы с разными строчными буквами значительно различаются ( p < 0,05).

Ингибитор цитоплазматической трансляции (CHX) и ингибитор ядерной транскрипции (AMNT) не влияют на качество спермы

Для дальнейшего подтверждения нашей гипотезы о том, что паттерны линейной подвижности сперматозоидов зависят исключительно от транскрипции и трансляции в митохондриях, но не в ядре и цитоплазме, мы инкубировали сперматозоиды с CHX и AMNT в течение 3 часов.Однако сперматозоиды, инкубированные с различными дозами (0, 50, 100 нг/мл) CHX, показали, что следы подвижности сперматозоидов не изменились (рис. 6А). Кроме того, не наблюдалось существенной разницы между лечебными дозами в характеристиках подвижности [общая подвижность, непрогрессивная подвижность, поступательная подвижность и прямолинейная скорость (рис. 6B–E)], митохондриальной активности (рис. 6F) и интенсивности двигательной активности. белки (MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7) (рис. 6G-J). Точно так же сперматозоиды, инкубированные с AMNT, показали незначительные различия в общей подвижности, прямолинейной скорости и митохондриальной активности (рис. 6K-M).

Рисунок 6. Влияние циклогексимида (CHX) и α-аманитина (AMNT) на сперму хряка через 3 часа инкубации в среде с 30,6 мМ глюкозы. (A) Следы подвижности сперматозоидов, инкубированные с различными концентрациями CHX (0, 50 и 100 нг/мл), полученные с помощью системы CASA. (B–E) Паттерны моторики: (B) общая моторика, (C) непрогрессивная моторика, (D) прогрессивная моторика, (E) прямолинейная скорость. (F) Митохондриальная активность. (G) Изображение вестерн-блоттинга, показывающее экспрессию MT-ND1, MT-ND6, NDUFA7 и α-тубулина. (H–J) Количественная экспрессия MT-ND1, MT-ND6 и NDUFA7 на α-тубулине (контроль), полученная в результате вестерн-блоттинга. (К) Общая подвижность, (Л) прямолинейная скорость и (М) митохондриальная активность сперматозоидов не изменялась через 3 ч инкубации с различными концентрациями АМНТ (0, 10, 50 и 100 нг/мл). Значения представляют собой средние значения ± стандартная ошибка для трех повторов.Столбцы с разными строчными буквами значительно различаются ( p < 0,05).

Обсуждение

При оплодотворении in vivo сперматозоиды эякулируются в женские половые пути вместе с семенной плазмой и плывут к яйцеводу для оплодотворения (Suarez and Pacey, 2006). Во время путешествия сперматозоидов по женским половым путям характер подвижности сперматозоидов меняется с линейной подвижности в матке на зигзагообразную подвижность в яйцеводе (De Lamirande et al., 1997). Хорошо известно, что подвижность сперматозоидов регулируется АТФ, продуцируемым либо гликолитическим путем в цитоплазме, либо OXPHOS в митохондриях, либо тем и другим (Story, 2008; Mukai and Travis, 2012; Du Plessis et al. , 2015). В частности, Odet et al. (2008) продемонстрировали, что гликолиз важен для гиперактивированной подвижности с использованием модели мышей с нокаутом Ldh-c . С другой стороны, инкубация in vitro в среде BWW с низким содержанием глюкозы или без глюкозы с ротеноном, ингибитором комплекса I, снижала прогрессивную подвижность сперматозоидов и прямолинейную скорость у жеребца (Plaza Davila et al., 2015) и человека (Barbonetti et al., 2010), предполагая, что митохондриальная продукция АТФ также важна для подвижности сперматозоидов. Однако различные роли путей метаболизма в подвижности сперматозоидов остаются неясными. В этом исследовании с использованием среды, содержащей различные дозы глюкозы, мы обнаружили, что митохондриальная активность увеличивалась в условиях низкого уровня глюкозы, а АТФ, продуцируемый в митохондриях, был связан с высокоскоростной линейной подвижностью спермы хряка.

Митохондрии выполняют несколько функций, таких как гомеостаз кальция в клетке (Contreras et al. , 2010), липидный гомеостаз (Labbe et al., 2014), высвобождение цитохрома с (Wang, 2001) и синтез АТФ через OXPHOS (Bratic and Trifunovic, 2010) и т. д. Особенно важно производство АТФ в митохондриях. для выживания клеток и клеточного гомеостаза (Osellame et al., 2012). Однако в процессе производства АТФ в митохондриях в качестве побочных продуктов образуются активные формы кислорода (АФК), а затем избыточное накопление АФК снижает продукцию митохондриального АТФ за счет ферментативной деградации.Митохондриальные (ТК) комплексы, включающие НАДН-дегидрогеназу (комплекс I), сукцинатдегидрогеназу/фумаратредуктазу (комплекс II), цитохром-с-редуктазу (комплекс III), цитохром-с-оксидазу (комплекс IV) и АТФ-синтазу (комплекс V), необходимы для Продукция АТФ в митохондриях (Lenaz and Genova, 2010). Кроме того, 13 полипептидов, кодируемых мтДНК, частично являются субъединицами комплекса I, III, IV и V (Chomyn et al., 1985; Amaral et al., 2013). Таким образом, для поддержания уровня АТФ в сперме необходима экспрессия генов и синтез белка в митохондриях.

Чтобы выяснить функцию митохондриальной транскрипции и трансляции в сперме, в нашем исследовании были изучены экспрессия и синтез белка в митохондриях. Гены, кодирующие митохондрии, высоко экспрессировались в сперме, но гены, кодирующие ядерный геном, при инкубации не обнаруживались. Система оборота белков в митохондриях была необходима для подвижности сперматозоидов, когда сперматозоиды инкубировались в среде с низким содержанием глюкозы. Гур и Брейтбарт (2006) показали, что добавление D -хлорамфеникола, ингибитора митохондриальной трансляции, в модифицированную безглюкозную среду Тирода подавляет синтез белка в сперме быка.Более того, транскрипты всех митохондриальных генов были обнаружены в эпидидимальных сперматозоидах мышей (Alcivar et al., 1989). Интересно, что циклогексимид (CHX), ингибитор цитоплазматической трансляции, в этом исследовании не подавлял интенсивность белков, кодируемых не только мтДНК, но и ядерным геномом, что указывает на то, что белок, кодируемый ядерным геномом, более стабилен и устойчив к окислительному стрессу. во время инкубации. Кроме того, когда клетки HeLa культивировали с генератором АФК, уровни белков, кодируемых митохондриями (MT-ND6, MT-ND1 и MT-CYB), были значительно снижены, но уровни HSP9A, кодируемого ядром и локализованного в митохондриях белок не показал значительных изменений (Xie et al., 2012). Около 92% белков у млекопитающих имеют по крайней мере один остаток цистеина, содержащий открытый тиол, который свободен для взаимодействия с водным растворителем (Miseta and Csutora, 2000). Рекехо и др. (2010) сообщили, что митохондрии млекопитающих имеют большое количество редокс-активных экспонированных тиолов на поверхности нативных белков, особенно комплекса I субъединицы 75 кДа (NDUFS1), который кодируется ядром (Hurd et al., 2008). Кроме того, остаток цистеина в митохондриальном кодируемом белке сравнительно ниже, чем в ядерном белке в митохондриальных комплексах ETC (остаток цистеина на белок: 1.69 против 3,56; остаток цистеина% белковой последовательности: 0,773 против 1,667%; данные были подсчитаны из последовательности белка в базе данных GeneCards), что означает, что эффективность устойчивости к очистке АФК митохондриально-кодируемого белка ниже, чем у белка, кодируемого ядром. Кроме того, посттрансляционные модификации, включая образование сульфеновых кислот (Charles et al., 2007) и S -нитрозотиолов (Hogg, 2002) или глутатионилирование (Cotgreave and Gerdes, 1998) белковых тиолов, важны для поддержания клеточного окислительно-восстановительного потенциала. сигнализация и стабильность белков.Обычно большинство ядерно-кодируемых белков в митохондриях потенциально посттрансляционно модифицируются в цитоплазме до перемещения в митохондрии (Hofer and Wenz, 2014), что позволяет предположить, что митохондриально-кодируемые белки были более чувствительны к АФК и нестабильны, чем ядерные. -кодируемые белки спермы. Таким образом, чтобы сохранить продукцию АТФ и линейный характер подвижности, транскрипция и трансляция в митохондриях активируются во время инкубации, а также могут происходить в матке для успешного оплодотворения in vivo .

В этом исследовании активность митохондрий и высокоскоростная линейная подвижность, как у матки, повышались при снижении концентрации глюкозы. Предыдущее исследование показало, что концентрация глюкозы в матке мышей ниже, чем в яйцеводе во время процесса оплодотворения (Harris et al., 2005). Кроме того, линейная подвижность сперматозоидов индуцируется в плазме спермы и матке (De Lamirande et al., 1997), указывая на то, что митохондрии сперматозоидов будут активированы в матке, когда они будут представлены в маточной жидкости с низким содержанием глюкозы.Однако, когда сперму вводили в матку методом искусственного осеменения, сперму разбавляли средой для трубной жидкости человека (HTF), которая обычно используется для оплодотворения in vitro у человека, и раствором Модены, который содержит высокую дозу глюкозы у свиней. . Метод искусственного осеменения коммерчески применяется во всем мире для разведения свиней; однако этот метод по-прежнему неэффективен, так как для получения высокой репродуктивной способности, аналогичной той, что достигается при естественном спаривании, требуется большое количество сперматозоидов на свиноматку в период течки (5–7 × 10 ⁹ сперматозоидов на оплодотворение одной свиноматки) (Knox, 2016). Большое количество сперматозоидов является критическим ограничением для применения искусственного осеменения не только у свиней, но и при лечении бесплодия у людей. Поскольку при искусственном осеменении человека требуется 1 × 10 ⁷ или более подвижных сперматозоидов (Van Voorhis et al., 2001), в случае олигоспермии обычно выбирают оплодотворение in vitro или интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ИКСИ). Наше новое понимание того, что высокоскоростная линейная подвижность индуцируется средой с низким содержанием глюкозы, может обеспечить новую стратегию для улучшения метода искусственного осеменения как сельскохозяйственных животных, так и лечения бесплодия человека.

Заключение

В заключение, транскрипция и трансляция в митохондриях сперматозоидов активны, а состояние с низким уровнем глюкозы улучшает прогрессивную подвижность сперматозоидов, прямолинейную скорость и митохондриальную активность во время инкубации in vitro . Снижение уровня глюкозы в разбавленной среде увеличивает продолжительность высокоскоростной линейной подвижности за счет активации митохондриальной активности по выработке АТФ в настоящем исследовании. Таким образом, высокоскоростная линейная подвижность, вызванная средой с низким содержанием глюкозы, является новым фактором, улучшающим оплодотворение при искусственном осеменении сельскохозяйственных животных и лечении бесплодия человека.Возможно, что разбавление сперматозоидов средой для осеменения с низким содержанием глюкозы повысит линейную подвижность сперматозоидов в женских половых путях и улучшит оплодотворение, что является простым и недорогим подходом.

Доступность данных

Все наборы данных, созданные для этого исследования, включены в рукопись и/или дополнительные файлы.

Вклад авторов

ZZ и TU отвечали за экспериментальный план, выборку, анализ данных и написание рукописи.TO, MG, YF и TK собрали образцы и интерпретировали данные. SH написал рукопись и отредактировал ее. WZ отвечали за обсуждение экспериментального дизайна, анализа данных и написания рукописи. М.С. руководил всеми аспектами этого исследования и написал рукопись.

Финансирование

Эта работа была частично поддержана грантом No. h40-279 и Hiroshima Cryopreservation Service Co., грант №. h40-1 (к МС). ZZ получил поддержку Китайского стипендиального совета во время визита «Чжэндун Чжу» в Хиросимский университет (#CSC201706300110).

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphys.2019.00252/full#supplementary-material

.

Сноски

1. https://www.gencards.org

Каталожные номера

Alcivar, A.A., Hake, L.E., Millette, C.F., Trasler, J.M., и Hecht, N.B. (1989). Экспрессия митохондриального гена в мужских половых клетках мыши. Дев. биол. 135, 263–271. дои: 10.1016/0012-1606(89)

-4

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Андерсон, С. , Банкир, А.Т., Баррелл, Б.Г., Де Брюйн, М.Х., Коулсон, А.Р., Друин, Дж., и соавт. (1981). Последовательность и организация митохондриального генома человека. Природа 290, 457–465. дои: 10.1038/2

a0

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Барбонетти А., Вассалло М. Р., Фортунато Д., Франкавилла С., Маккарроне М. и Франкавилла Ф. (2010). Энергетический метаболизм и подвижность сперматозоидов человека: влияние активации рецептора CB(1). Эндокринология 151, 5882–5892. doi: 10.1210/en.2010-0484

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Brokaw, CJ (1972). Жгутиковое движение: модель скользящей нити. Наука 178, 455–462. doi: 10.1126/наука.178.4060.455

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Браун-Вудман, П.Д., и Уайт, И.Г. (1974). Аминокислотный состав спермы и выделений мужских половых путей. австр. Дж. Биол. науч. 27, 415–422. дои: 10.1071/BI9740415

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Чарльз Р. Л., Шредер Э., Мэй Г., Фри П., Гаффни П.Р., Уэйт Р. и др. (2007). Сульфенирование белков как окислительно-восстановительный датчик: протеомные исследования с использованием нового биотинилированного аналога димедона. Мол. Клетка. Протеомика 6, 1473–1484. doi: 10.1074/mcp.M700065-MCP200

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Chomyn, A., Mariottini, P., Cleeter, M.W., Ragan, C.I., Matsuno-Yagi, A., Hatefi, Y., et al. (1985). Шесть неопознанных рамок считывания митохондриальной ДНК человека кодируют компоненты НАДН-дегидрогеназы дыхательной цепи. Природа 314, 592–597. дои: 10.1038/314592a0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Котгрив, И.А. и Гердес, Р. Г. (1998). Последние тенденции в биохимии глутатиона и взаимодействии глутатиона с белком: молекулярная связь между окислительным стрессом и пролиферацией клеток? Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 242, 1–9. doi: 10.1006/bbrc. 1997.7812

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Кертис, М. П., Киркман-Браун, Дж. К., Коннолли, Т. Дж., и Гаффни, Э. А. (2012). Моделирование привязанной клетки сперматозоида млекопитающего , подвергающейся гиперактивации. Дж. Теор. биол. 309, 1–10. doi: 10.1016/j.jtbi.2012.05.035

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Де Ламиранд, Э., Леклерк, П., и Ганьон, К. (1997). Капацитация как регуляторное событие, которое подготавливает сперматозоиды к акросомной реакции и оплодотворению. Мол. Гум. Воспр. 3, 175–194. doi: 10.1093/моль час/3.3.175

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Дю Плесси, С. С., Агарвал, А., Моханти, Г., и Ван Дер Линде, М. (2015). Окислительное фосфорилирование против гликолиза: какое топливо используют сперматозоиды? Азиат Дж. Андрол. 17, 230–235. дои: 10.4103/1008-682X.135123

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фосетт, Д. В. (1970). Сравнительный вид ультраструктуры сперматозоидов. биол. Воспр. 2 (Прил. 2), 90–127. doi: 10.1095/biolreprod2.Supplement_2.90

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Гохил, В.М., Шет С.А., Нильссон Р., Войтович А.П., Ли Дж.Х., Пероччи Ф. и соавт. (2010). Сенсибилизированный питательными веществами скрининг препаратов, которые переключают энергетический обмен с митохондриального дыхания на гликолиз. Нац. Биотехнолог. 28, 249–255. doi: 10.1038/nbt.1606

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Харрис, С.Э., Гопичандран, Н., Пиктон, Х.М., Лиз, Х.Дж., и Орси, Н.М. (2005). Концентрация питательных веществ в фолликулярной жидкости мышей и женских половых путях. Териогенология 64, 992–1006. doi: 10.1016/j.theriogenology.2005.01.004

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хо, Х.К., Граниш, К.А., и Суарес, С.С. (2002). Гиперактивированная подвижность сперматозоидов быков запускается в аксонеме Са2+, а не цАМФ. Дев. биол. 250, 208–217. doi: 10.1006/dbio.2002.0797

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хогг, Н. (2002). Биохимия и физиология S-нитрозотиолов. год. Преподобный Фармакол. Токсикол. 42, 585–600. doi: 10.1146/annurev.pharmtox.42.092501.104328

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Hurd, T.R., Requejo, R., Filipovska, A., Brown, S., Prime, T.A., Robinson, A.J., et al. (2008). Комплекс I в митохондриях бычьего сердца, подвергшихся окислительному стрессу, глутатионилирован по Cys-531 и Cys-704 субъединицы 75 кДа: потенциальная роль остатков CYS в уменьшении окислительного повреждения. Дж. Биол. хим. 283, 24801–24815.дои: 10.1074/jbc.M803432200

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хаксли, А.Ф., и Нидергерке, Р. (1954). Структурные изменения мышц при сокращении; интерференционная микроскопия живых мышечных волокон. Природа 173, 971–973. дои: 10.1038/173971a0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лаббе, К., Мерли, А., и Нуннари, Дж. (2014). Детерминанты и функции митохондриального поведения. год.Преподобная ячейка. Дев. биол. 30, 357–391. doi: 10.1146/annurev-cellbio-101011-155756

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Леназ, Г., и Генова, М.Л. (2010). Структура и организация митохондриальных дыхательных комплексов: новое понимание старой темы. Антиоксидант. Окислительно-восстановительный сигнал. 12, 961–1008. doi: 10.1089/ars.2009.2704

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Марден, WG (1961). Источник эндогенной пировиноградной кислоты в семенной жидкости крупного рогатого скота и утилизация. J. Dairy Sci. 44, 1688–1697. doi: 10.3168/jds.S0022-0302(61)89941-4

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Маррокин, Л. Д., Хайнс, Дж., Дайкенс, Дж. А., Джеймисон, Дж. Д., и Уилл, Ю. (2007). Обход эффекта Крэбтри: замена глюкозы в среде на галактозу повышает восприимчивость клеток HepG2 к митохондриальным токсикантам. Токсикол. науч. 97, 539–547. doi: 10.1093/toxsci/kfm052

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мисета, А.и Чутора, П. (2000). Связь между наличием цистеина в белках и сложностью организмов. Мол. биол. Эвол. 17, 1232–1239. doi: 10.1093/oxfordjournals.molbev.a026406

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Никол, Р., Хантер, Р. Х., Гарднер, Д. К., Лиз, Х. Дж., и Кук, Г. М. (1992). Концентрация энергетических субстратов в яйцеводной жидкости и плазме крови свиней в периовуляторный период. J. Репрод.Плодородный. 96, 699–707. doi: 10.1530/jrf.0.0960699

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Одет, Ф., Дуан, К., Уиллис, В. Д., Гулдинг, Э.Х., Кунг, А., Эдди, Э.М., и соавт. (2008). Экспрессия гена мышиной лактатдегидрогеназы C (Ldhc) необходима для мужской фертильности. биол. Воспр. 79, 26–34. doi: 10.1095/biolreprod.108.068353

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Окадзаки Т., Акиёси Т., Кан, М., Мори, М., Тешима, Х., и Шимада, М. (2012). Искусственное осеменение семенной плазмой улучшает репродуктивную функцию замороженных-оттаивающих эпидидимальных сперматозоидов хряка. Дж. Андрол. 33, 990–998. doi: 10.2164/jandrol.111.015115

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Оселламе, Л. Д., Блэкер, Т. С., и Дюшен, М. Р. (2012). Клеточные и молекулярные механизмы митохондриальной функции. Лучшая практика. Рез. клин. Эндокринол.Метаб. 26, 711–723. doi: 10.1016/j.beem.2012.05.003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Филлипс, DM (1972). Сравнительный анализ подвижности сперматозоидов млекопитающих. Дж. Сотовый. биол. 53, 561–573. doi: 10.1083/jcb.53.2.561

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Plaza Davila, M., Martin Munoz, P., Tapia, J.A., Ortega Ferrusola, C., Balao Da Silva, C.C., и Pena, FJ (2015). Ингибирование митохондриального комплекса I приводит к снижению подвижности и целостности мембраны, что связано с увеличением перекиси водорода и снижением продукции АТФ, в то время как ингибирование гликолиза оказывает меньшее влияние на подвижность сперматозоидов. PLoS One 10:e0138777. doi: 10.1371/journal.pone.0138777

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Requejo, R., Hurd, T.R., Costa, N.J., and Murphy, M.P. (2010). Остатки цистеина, экспонированные на поверхности белка, являются доминирующим внутримитохондриальным тиолом и могут защищать от окислительного повреждения. FEBS J. 277, 1465–1480. doi: 10.1111/j.1742-4658.2010.07576.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Руис-Песини, Э. , Диес-Санчес, К., Лопес-Перес, М.Дж., и Энрикес, Дж.А. (2007). Роль митохондрий в функционировании сперматозоидов: есть ли место окислительному фосфорилированию или это чисто гликолитический процесс? Курс. Топ Дев. биол. 77, 3–19. doi: 10.1016/S0070-2153(06)77001-6

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Шалги, Р., Смит, Т.Т., и Янагимати, Р. (1992). Количественное сравнение прохождения капацитированных и недееспособных сперматозоидов хомяков через маточно-трубное соединение. биол. Воспр. 46, 419–424. doi: 10.1095/biolreprod46.3.419

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шимада М., Янаи Ю., Окадзаки Т., Нома Н., Кавасима И., Мори Т. и др. (2008). Фрагменты гиалуроновой кислоты, генерируемые гиалуронидазой, секретируемой спермой, стимулируют продукцию цитокинов/хемокинов через пути TLR2 и TLR4 в кумулюсных клетках овулирующих КОК, что может усиливать оплодотворение. Разработка 135, 2001–2011 гг. дои: 10.1242/dev.020461

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Stauss, C.R., Votta, T.J., and Suarez, S.S. (1995). Гиперактивация подвижности сперматозоидов способствует проникновению в прозрачную оболочку хомячка. биол. Воспр. 53, 1280–1285. doi: 10.1095/biolreprod53.6.1280

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Суарес С.С., Кац Д.Ф., Оуэн Д.Х., Эндрю Дж.Б. и Пауэлл Р.Л. (1991). Доказательства функции гиперактивированной подвижности сперматозоидов. биол. Воспр. 44, 375–381. doi: 10.1095/biolreprod44.2.375

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Саммерс, К.Е., и Гиббонс, И.Р. (1971). Вызванное аденозинтрифосфатом скольжение канальцев в обработанных трипсином жгутиках спермы морского ежа. Проц. Натл. акад. науч. США 68, 3092–3096. doi: 10.1073/pnas.68.12.3092

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Треулен Ф. , Урибе П., Боген Р. и Вильегас Дж.В. (2016). Пермеабилизация внешней мембраны митохондрий увеличивает выработку активных форм кислорода и снижает среднюю скорость сперматозоидов, но не связана с фрагментацией ДНК в сперме человека. Мол. Гум. Воспр. 22, 83–92. doi: 10.1093/molhr/gav067

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Умехара Т., Каваи Т., Гото М., Ричардс Дж. С. и Шимада М. (2018). Креатин увеличивает продолжительность капацитации сперматозоидов: новый фактор для улучшения экстракорпорального оплодотворения с небольшим количеством сперматозоидов. Гул. Воспр. 33, 1117–1129. дои: 10.1093/humrep/dey081

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ван Воорхис, Б.Дж., Барнетт, М., Спаркс, А.Е., Сироп, Ч.Х., Розенталь, Г., и Доусон, Дж. (2001). Влияние общего количества подвижных сперматозоидов на эффективность и экономическую эффективность внутриматочной инсеминации и экстракорпорального оплодотворения. Плодородный. Стерильно. 75, 661–668. дои: 10.1016/S0015-0282(00)01783-0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Веккьо, Д., Gasparrini, B., Di Palo, R., Iemma, L., Balestrieri, M.L., Killian, J.G., et al. (2007). Предварительные результаты по составу яйцеводов у буйволов. Итал. Дж. Аним. науч. 6, 731–734. doi: 10.4081/ijas.2007.s2.731

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ван, X. (2001). Возрастающая роль митохондрий в апоптозе. Гены Дев. 15, 2922–2933.

Академия Google

Вулли, Д.М., и Фосетт, Д.В. (1973). Дегенерация и исчезновение центриолей при развитии сперматозоида крысы. Анат. Рек. 177, 289–301. doi: 10.1002/ar.1091770209

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Се, X., Ле, Л., Фань, Ю., Лев, Л., и Чжан, Дж. (2012). Аутофагия индуцируется посредством пути ROS-TP53-DRAM1 в ответ на ингибирование синтеза митохондриального белка. Аутофагия 8, 1071–1084. doi: 10.4161/auto.20250

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Сюн, В., Цзяо, Ю., Хуанг, В., Ма, М., Yu, M., Cui, Q., et al. (2012). Регуляция клеточного цикла посредством экспрессии митохондриальных генов и энергетического метаболизма в клетках HeLa. Акта Биохим. Биофиз. Грех 44, 347–358. doi: 10.1093/abbs/gms006

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Zhu, Z., Fan, X., Lv, Y., Lin, Y., Wu, and Zeng, W. (2017). Глутамин защищает сперматозоиды кролика от окислительного стресса посредством синтеза глутатиона во время криоконсервации. Репрод. Плодородный. Дев. 29, 2183–2194.дои: 10.1071/RD17020

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

TMEM95 — белок мембраны спермы, необходимый для оплодотворения млекопитающих

Сводка о приемке:

В рукописи сообщается о важном открытии: идентификации белка TMEM95, необходимого для слияния спермы и яйцеклетки. Сперматозоиды с дефицитом TMEM95 лишены распознавания сперматозоида и яйцеклетки и не могут слиться с яйцеклеткой. В целом, учитывая генетику мышей и эксперименты по экстракорпоральному оплодотворению, представленные в этой рукописи, а также ранее опубликованные данные о важности TMEM95 для фертильности крупного рогатого скота и генетики человека, TMEM95 может стать важным рецептором поверхности спермы, необходимым для оплодотворения.Поэтому значение этого исследования исключительно велико не только для фундаментальной науки и репродуктивной биологии, но и для трансляционных приложений, таких как диагностика фертильности и исследования в области контрацепции.

Письмо с решением после экспертной оценки:

Благодарим вас за отправку вашей статьи «TMEM95 необходим для слияния мембран сперматозоидов и ооцитов» на рассмотрение в eLife . Ваша статья была проверена тремя рецензентами, в том числе Полиной В. Лишко в качестве редактора-рецензента и рецензентом № 1, а оценку проводила Анна Ахманова в качестве старшего редактора.

Рецензенты обсудили обзоры друг с другом, и редактор-рецензент составил проект этого решения, чтобы помочь вам подготовить исправленное представление.

Хотя цель состоит в том, чтобы предоставить основные требования к пересмотру в виде единого набора инструкций, в данном конкретном случае мы предоставим полный набор обзоров, чтобы вы могли решить все проблемы, поскольку это необходимо для пересмотра, который необходим для нас. опубликовать свою работу.

Резюме:

Рукопись Lamas-Toranzo et al., сообщает о важном открытии: идентификации белка TMEM95, необходимого для слияния сперматозоидов и яйцеклеток. Сперматозоиды с дефицитом TMEM95 лишены способности распознавания/слияния сперматозоидов и яйцеклеток, очень похожей на IZUMO1-разрушенные сперматозоиды, и его потребность в этом процессе задокументирована в этой рукописи. Однако в документе отсутствуют подробные доказательства того, как именно TMEM95 способствует этому процессу. Кроме того, одно из основных заявлений в рукописи (отсутствие взаимодействия между TMEM95 и другими белками, связывающими сперму/яйцеклетку) не подтверждается данными.Эти данные в рукописи опущены. В целом, учитывая мышиную генетику и эксперименты по ЭКО, представленные в этой рукописи, а также ранее опубликованные данные о важности TMEM95 для фертильности крупного рогатого скота и генетики человека, TMEM95 может стать важным рецептором поверхности сперматозоидов, необходимым для оплодотворения. Поэтому значение этого исследования исключительно велико не только для фундаментальной науки и репродуктивной биологии, но и для трансляционных приложений, таких как диагностика фертильности и исследования в области контрацепции.

Основные версии:

Рецензенты высказывают ряд опасений, которые необходимо должным образом решить, прежде чем статья может быть принята. Некоторые из необходимых изменений, вероятно, потребуют дальнейших экспериментов в рамках представленных исследований и методов.

В частности:

1) Должны быть проведены эксперименты, показывающие, что рекомбинантный белок TMEM95 приобретает соответствующую физиологическую активность и сохраняет способность напрямую связываться со свободной от зон поверхностью яйца.

2) Необходимо показать эксперименты по иммунопреципитации лизатов спермы с использованием антител против IZUMO1 и/или против TMEM95.

3) Хотя было показано, что сперматозоиды с нарушением TMEM95 экспрессируют белок IZUMO1, неясно, содержат ли сперматозоиды с разрушением IZUMO1 белок TMEM95.

4) Должна быть проведена дополнительная характеристика экспрессии TMEM95 в семенниках, придатках яичек, добавочных железах и т. д. на уровне белка), а также тканевой специфичности.

5) Авторы должны провести исследования локализации в пермеабилизированных и непермеабилизированных интактных сперматозоидах дикого типа, чтобы определить, в каком именно клеточном компартменте находится TMEM95.

6) Необходимо провести анализ количества сперматозоидов, прикрепившихся к поверхности яйцеклетки.

7) Как было предложено, все эксперименты должны проводиться с положительными контролями, которые подтверждают, что использованная методика. Данные, которые не показаны, не допускаются.

8) Многие части рукописи (аннотация, название, результаты и обсуждение, а также используемая терминология: «яйцо» и «ооцит») необходимо переписать и уточнить по предложению рецензентов. В целом, рукопись выиграла бы от тщательного языкового редактирования, а также от дополнительных данных и экспериментов.

Рецензент №1:

В рукописи Lamas-Toranzo et al. сообщается о важном открытии: идентификации белка, необходимого для слияния спермы и яйцеклетки, TMEM95. Предоставленные данные хорошего качества, а эксперименты по экстракорпоральному оплодотворению очень убедительны. Однако одно из основных утверждений в рукописи (отсутствие взаимодействия между TMEM95 и другими белками, связывающими сперму/яйцеклетку) не подтверждается данными. Эти данные были либо случайно опущены в рукописи, либо не предназначались для показа.В целом, учитывая генетику мышей и эксперименты по ЭКО, представленные в этой рукописи, а также ранее опубликованные данные о важности TMEM95 для фертильности крупного рогатого скота и генетических данных человека, этот рецензент уверен, что TMEM95 является важным рецептором поверхности спермы, необходимым для оплодотворения. Поэтому значение этого исследования исключительно велико не только для фундаментальной науки и репродуктивной биологии, но и для трансляционных приложений, таких как диагностика фертильности и исследования в области контрацепции.Тем не менее, рукопись менее отполирована в отношении стиля письма, представления данных и в целом выиграет от тщательного языкового редактирования.

1) Первый абзац Введения и по всему тексту. Сперматозоиды обычно не оплодотворяют яйцеклетку, они оплодотворяют яйцеклетку или яйцеклетку. Ооцит представляет собой незрелую женскую гамету, все еще находящуюся внутри фолликула (у млекопитающих), после овуляции она становится яйцеклеткой/яйцеклеткой. Следовательно, такая терминология, как «слияние сперматозоида и ооцита», технически неверна и сбивает с толку, и ее следует заменить на слияние сперматозоида и яйцеклетки, в том числе в названии.

2) Введение: последний абзац, описывающий генетику крупного рогатого скота, кажется неуместным. Сначала авторы описывают редактирование генов у мышей и сразу же переходят к генетике быков — трудно понять, почему был сделан такой переход.

3) Рисунок 1D: весь вестерн-блоттинг для TMEM95 должен быть показан для оценки специфичности антитела, используемого в исследовании.

4) Рисунок 3. Авторы заявляют, что пулл-даун анализ был проведен для изучения того, взаимодействует ли TMEM95 с IZUMO или Juno.Тем не менее, единственные экспериментальные данные, которые действительно показаны, — это либо гетерологичная экспрессия TMEM и его усеченной формы в клетках CHO, либо анализы pull-down, зондированные антителом против TMEM. НЕТ панели, которая показывает вестерн-блоттинг с антителами против IZUMO или против Juno. Более того, экстракция мембранных белков из зрелых сперматозоидов представляет собой сложную задачу, поскольку большинство этих белков ковалентно связаны с нижележащими структурами цитоскелета. Чтобы исключить взаимодействие TMEM95/IZUMO/Juno, авторы должны экспрессировать все три гетерологичных белка в клетках CHO, а затем провести пулл-даун-анализ для изучения их потенциального взаимодействия.

5) Введение первого пункта «перивителлин», должно быть перивителлин.

6) Необходимо провести три эксперимента по вытягиванию вниз.

Рецензент №2:

Благодаря генно-модифицированным животным IZUMO1 и SPACA6 на стороне спермы и JUNO (IZUMO1R) и CD9 на стороне яйцеклетки были идентифицированы как важные факторы для слияния сперматозоида и яйцеклетки. В этом исследовании авторы недавно обнаружили третий фактор спермы, TMEM95, который был первоначально идентифицирован путем полногеномного скрининга субфертильных быков и также необходим для слияния гамет у мышей.Все сперматозоиды, лишенные TMEM95, лишены способности распознавания/слияния сперматозоидов и яйцеклеток, очень похожей на сперматозоиды, разрушенные IZUMO1, и его потребность в процессе тщательно документирована в этой рукописи.

Однако я думаю, что в документе отсутствуют подробные доказательства того, как именно TMEM95 способствует этому процессу. Таким образом, на мой взгляд, эта рукопись в ее нынешнем виде еще не готова к публикации в eLife .

Авторы пришли к выводу, что TMEM95 не участвует в системе IZUMO1-JUNO из-за результатов, полученных с помощью комбинации коиммунопреципитации (His-tag pull down) и анализов ВЭЖХ-МС/МС, однако я обеспокоен тем, что эти эксперименты недостаточно проверены.В частности, я сомневаюсь, что рекомбинантный белок TMEM95 приобретает соответствующую физиологическую активность. Обладает ли этот рекомбинант способностью напрямую связываться с поверхностью ооцита, свободной от zona? Кроме того, что касается IZUMO1, проводили ли вы эксперименты по иммунопреципитации лизата спермы с использованием антител против IZUMO1 и/или против TMEM95? Кроме того, на рисунке 1D показано, что сперматозоиды, разрушенные TMEM95, содержат белок IZUMO1; однако, наоборот, обладают ли IZUMO1-разрушенные сперматозоиды белком TMEM95? Необходимы взаимные эксперименты для выяснения детальной молекулярной взаимосвязи между этими факторами.

Я думаю, что эти проверки должны быть рассмотрены.

Рецензент №3:

Рукопись Lama-Toranzo et al. описывает идентификацию TMEM95, белка спермы, необходимого для слияния гамет мыши. Учитывая, что до сих пор было обнаружено, что только один белок спермы (т.е. IZUMO) имеет решающее значение для этого процесса, эти результаты показывают, что TMEM95 и IZUMO оба необходимы, но недостаточны для слияния гамет, представляя очень интересный вклад в область исследования. оплодотворение млекопитающих.Тем не менее, высокое структурное сходство между TMEM95 и доменом IZUMO 1 вместе с одинаковой локализацией этих двух белков в интактных и акросомно-реагировавших сперматозоидах подтверждает идею о том, что TMEM95, вероятно, участвует в слиянии гамет посредством тех же лиганд-рецепторных механизмов, что и в IZUMO-JUNO. опосредованное слияние гамет. В этом отношении эксперименты, показывающие, что TMEM95 не взаимодействует с JUNO, неубедительны, поскольку в них отсутствуют соответствующие положительные контроли. Более того, учитывая, что единственный успешный подход к идентификации JUNO включал использование пентамерного белка IZUMO из-за очень низкой аффинности между двумя молекулами (Bianchi and Wright et al., 2016), непонятно, почему авторы проанализировали взаимодействие TMEM95-JUNO, используя только обычный анализ ко-иммунопреципитации. Т.о., с механистической точки зрения, результаты участия TMEM95 в слиянии гамет, по-видимому, не дают новой информации. Молекулярные механизмы, лежащие в основе роли TMEM95 в слиянии гамет, должны быть лучше проанализированы и обсуждены.

Есть также несколько других моментов, которые авторы должны принять во внимание, прежде чем рукопись может быть принята к публикации в eLife .

Особые комментарии:

Реферат:

1) Авторы упомянули, что «сперматозоиды с дефицитом TMEM95 не могли слиться с мембраной ооцита или проникнуть в нее». Сперматозоиды связываются с плазматической мембраной яйцеклетки, затем сливаются с ней и, наконец, проникают в ооплазму (или включаются в нее). Неправильно говорить, что сперматозоиды не могут «проникнуть» через мембрану яйцеклетки. Это выражение следует изменить здесь, как и в других разделах рукописи.

2) Неясно, что означает «кинетически» нормальная сперма.Авторы имеют в виду подвижность сперматозоидов и/или гиперактивность? Это должно быть указано более четко.

3) Последнее предложение, кратко указывающее на значимость результатов, должно быть добавлено в конце этого раздела.

Результаты:

4) авторы должны включить в этот раздел дополнительную информацию, касающуюся характеристики белка TMEM95, которая может способствовать лучшей интерпретации полученных результатов. т. е. тканевая экспрессия (яички, придатки, добавочные железы и т. д.) и тканевая специфичность.

5) На основании иммуноцитохимических исследований авторы указывают, что TMEM95 присутствует в акросомной мембране интактных сперматозоидов дикого типа. Им следует знать, что мембрана акросомы — это не то же самое, что акросомная область. Если сперматозоиды не повреждены, присутствие TMEM95 в мембране акросомы будет означать, что это скорее внутренний, чем поверхностный белок. Авторы должны провести исследования локализации в пермеабилизированных и непермеабилизированных интактных сперматозоидах дикого типа, чтобы различать две возможности.

Легенда к рисунку 1E указывает, что «TMEM95 локализуется вокруг акросомальной области интактных акросом сперматозоидов и в головке сперматозоида после акросомной реакции». Термин «головка сперматозоида» очень расплывчатый. Авторы должны указать, где в головке спермия локализуется TMEM95. Согласно рисунку 1F, TMEM95 должен быть расположен в экваториальном сегменте, но изображение на рисунке 1E, кажется, не показывает эту локализацию. В дополнение к этому, рисунок 1E не содержит описания того, что показывают стрелки в каждом случае.

Авторы указывают, что после акросомной реакции TMEM95 транслоцируется в экваториальный сегмент. Белок может переместиться в экваториальный сегмент вследствие либо его воздействия из-за высвобождения факторов декапацитации, либо его миграции из акросомальной области. Основываясь на исследованиях, включенных в эту рукопись, авторы не могут утверждать, что TMEM95 «перемещается» из одного региона в другой.

6) В дополнение к оценке слияния гамет методом Hoechst, авторы должны анализировать количество сперматозоидов, связывающихся с поверхностью яйцеклетки.Этот анализ предоставит информацию о том, участвует ли TMEM95 в первой стадии слияния гамет, т.е. связывании сперматозоида и яйцеклетки

7) Рисунок 3: как упоминалось выше, в анализе коиммунопреципитации отсутствуют соответствующие положительные контроли, которые подтверждают, что используемый метод действительно способен обнаруживать потенциальное взаимодействие между TMEM95 и JUNO (т. е. контроль, показывающий взаимодействие IZUMO/JUNO).

Рисунок 3 / Таблица 2: авторы провели серию экспериментов Pull-Down для выявления потенциальных партнеров TMEM95 либо в яйцеклетке, либо в сперме.Однако объяснение этих опытов и интерпретация полученных результатов описаны очень слабо.

Обсуждение:

Обсуждение потенциальных молекулярных механизмов, лежащих в основе роли TMEM95 в слиянии гамет, довольно запутанно. Авторы сначала предполагают, что TMEM95 может не требовать партнерских ооцитов. Затем они предполагают, что TMEM95 может иметь сродство с еще не описанным рецептором, а затем, основываясь на том факте, что TMEM95 действует независимо от JUNO и IZUMO1 (что на самом деле не дано), они предполагают, что TMEM95 может играть существенную роль, а не с помощью одного белка. -белковые взаимодействия.Авторы должны более четко заключить, подтверждают ли их наблюдения участие TMEM95 в первой стадии слияния гамет (т.е. связывание сперматозоида и яйцеклетки) посредством лиганд-рецепторного механизма, или же этот белок может действовать как фузогенная молекула, способная встраиваться в яичный липидный бислой.

[Примечание редактора: перед принятием были предложены дальнейшие изменения, как описано ниже.]

Благодарим вас за повторную отправку вашей работы под названием «ITMEM95 — белок спермы, необходимый для оплодотворения млекопитающих» для дальнейшего рассмотрения eLife .Ваша переработанная статья была оценена Анной Ахмановой (старшим редактором) и редактором-рецензентом.

Рукопись была значительно улучшена, но остались некоторые проблемы, которые необходимо решить перед принятием, как указано ниже. Мы понимаем, что из-за текущей ситуации с пандемией дополнительные эксперименты могут оказаться невозможными, поэтому мы просим авторов сосредоточиться на текстовых изменениях, предложенных рецензентами. Здесь мы приводим полный обзор, так как он содержит много предложений, которые авторы могут найти полезными.

Рецензент №1:

Авторы обратились к моим замечаниям, и в результате пересмотра рукопись была улучшена.

Рецензент №2:

Меня почти устраивают модификации, предоставленные авторами, однако у меня все же остаются некоторые опасения перед публикацией в eLife .

1) Авторы должны упомянуть SPACA6 как фактор, связанный со слиянием гамет, не только в «Обсуждении», но также в «Аннотации» и «Введении», потому что я думаю, что SPACA6 является важным фактором для этого процесса (Barbaux et al., 2020).

2) На Рисунке 2 — дополнение к рисунку 1C в этой системе нет положительного контроля (например, IZUMO1).

3) Я рекомендую крысиные моноклональные антитела против мышиных IZUMO1 клон 125 (abcam, ab211626 или BioAcademia, 73-045 или anticorps-eligne, ABIN2452040) для обнаружения в вестерн-блоттинге вместо поликлональных антител из-за высокой надежности.

Рецензент №3:

Пересмотренная версия, представленная Lozano et al. включает новые важные исследования, направленные на решение двух основных проблем, поднятых этим (и другими) рецензентами: i.е. 1) взаимодействует ли TMEM95 с IZUMO1 и/или Juno, и 2) механизм, лежащий в основе участия TMEM95 в слиянии гамет.

Что касается первого пункта, авторы решили использовать ту же стратегию, которая использовалась для идентификации Юноны, партнера IZUMO, имеющего теперь соответствующие средства контроля. Более того, исследования проводились в сотрудничестве с исследователями, которые сообщили об идентификации Юноны, которые теперь являются соавторами статьи. В отличие от предыдущих экспериментов по иммунопреципитации и вытягиванию, это новое исследование ясно показывает, что TMEM95 не взаимодействует ни с IZUMO1, ни с Juno, что представляет собой ключевое включение в бумагу.

Чтобы исследовать механизмы, лежащие в основе участия TMEM95 в слиянии гамет, т. е. участвует ли белок в первой стадии связывания спермия с оолеммой или в последующей стадии самого слияния мембран, авторы 1) провели анализ in vitro для оценки способности мутантных сперматозоидов TMEM95 для взаимодействия с плазматической мембраной яйцеклетки, не обнаруживая различий с контролем, 2) проанализировали способность TMEM95 взаимодействовать с поверхностью яйцеклетки без зон, не обнаружив связывания белка с яйцеклеткой, и 3) выполнили исследования трансфекции для анализа способности TMEM95 стимулировать слияние мембран, не обнаруживая обнаружимых событий слияния в анализируемых клетках.В соответствии с этими наблюдениями авторы пришли к выводу, что TMEM95 не участвует в связывании сперматозоида с яйцеклеткой и не является слитым белком, и предположили, что этот белок должен быть вовлечен в событие после связывания сперматозоида с яйцеклеткой до слияния мембран, как сообщалось для IZUMO.

Эти исследования, безусловно, полностью ответили на два основных вопроса рецензента, поддерживающего публикацию рукописи в журнале. Тем не менее, есть некоторые аспекты, которые авторы должны принять во внимание, чтобы улучшить качество рукописи.

— Авторы указали, что точную локализацию белка (внутреннюю или внешнюю) невозможно проанализировать, потому что используемая фиксация сама по себе вызывала пермеабилизацию клеток. Хотя это верно для многих условий фиксации, авторам следует рассмотреть возможность проведения исследований по иммунолокализации живых нефиксированных сперматозоидов в суспензии. Это простой подход, который позволит авторам определить локализацию белка в клетке. Это немаловажный момент, поскольку известно, что локализация молекулы дает важную информацию о механизмах, лежащих в основе ее функциональной роли, и этот вопрос еще не полностью решен для TMEM95.В связи с этим утверждение автора о том, что TMEM95, вероятно, локализуется на акросомальной мембране, поскольку он перемещается в экваториальный сегмент после акросомной реакции и имеет домен TM, неверно, поскольку белки плазматической мембраны с доменами TM или без них также делают это.

— Хотя авторы провели исследования экспрессии и специфичности тканей, запрошенные этим рецензентом, я не смог найти описание полученных результатов в тексте, а только на рисунке.Это следует исправить.

– я бы удалил из результатов первый раздел, озаглавленный «белок TMEM95 in silico folding предполагает роль в слиянии гамет», поскольку он описывает просто анализ in silico, который на самом деле не дает никакой новой информации по сравнению с белком быка и не вводит в заблуждение самостоятельный абзац. Я бы объединил результаты этого абзаца, описывающего только рис. 1А, с результатами следующего абзаца, описывающего остальную часть рис. 1. Возможно, авторам придется изменить заголовок и второго абзаца.

— Авторы указали, что отсутствие взаимодействия TMEM95 с IZUMO вместе с нормальной релокализацией IZUMO1 в сперме TMEM95 KO делает маловероятным, что IZUMO1 KO приведет к абляции TMEM95, и что выполнение этого эксперимента задержит публикацию этих результатов. В связи с этим я думаю, что авторы могли бы рассмотреть возможность отправки своего антитела против TMEM95 доктору Икаве, который мог бы провести это простое исследование локализации в своей лаборатории. Следует отметить, что авторы уже связались с лабораторией доктора Икавы, которая предоставила им антитела против IZUMO.

– На мой взгляд, есть несколько наблюдений, которые недостаточно обсуждены. Авторы могут размышлять о нескольких проблемах, таких как обнаружение того, что TMEM95 и IZUMO необходимы, но недостаточны для слияния гамет, как белок достигает экваториального сегмента, потенциальные способы идентификации партнеров TMEM95, присутствует ли TMEM95 или нет в клетках IZUMO KO. , среди прочего, что, безусловно, обогатит дискуссию.

https://doi.org/10.7554/eLife.53913.sa1

9 доказанных преимуществ спермы, которые поразят вас

Ах, молоко. Молочный совет ежегодно тратит миллиарды долларов на рекламу преимуществ этого холодного белого напитка. Но задумывались ли вы когда-нибудь о пользе мужского молока? Да, вы правильно прочитали, мужское молоко, оно же спермы.

Как бы безумно это ни звучало, сперма имеет множество преимуществ, обусловленных содержащимися в ней минералами и питательными веществами, и эти полезные свойства могут быть переданы непосредственно вам.Верно; мы провели исследование, и теперь мы здесь, чтобы представить вам факты.

Возможно, вы недавно съели детскую подливку или вам нравится регулярно пить это мужское молоко. В любом случае, вы хотите узнать, принесет ли это кремообразное вещество что-то большее, чем слегка кислый желудок и слабое кислое послевкусие. Итак, давайте погрузимся в эту щекотливую тему и посмотрим на преимущества, которые она предлагает.

Вагинальный/анальный прием

Влагалищные и ректальные слизистые оболочки хорошо впитывают влагу, так что любой из них является жизнеспособным путем для впитывания питательных веществ из спермы вашего мужчины.

Антидепрессант

Сперма содержит довольно много компонентов, которые, как было изучено, проявляют антидепрессивные качества. Одним из них является фактор роста нервов . Его основная ответственность в сперме состоит в том, чтобы помочь расслабить самку, чтобы сперматозоиды могли достичь своей репродуктивной цели. Также было показано, что это жизненно важный гормон, отсутствующий в мозгу тех, кто страдает большим депрессивным расстройством. Это означает, что увеличение фактора роста нервов только сделает людей счастливее.Кроме того, было обнаружено, что фактор роста нервов является противовоспалительным, а также антиоксидантом.

Противотревожное

Сперма

содержит улучшающие настроение соединения, такие как окситоцин , прогестерон , эстрон, серотонин, и мелатонин . Окситоцин также известен как «гормон объятий», потому что при его высвобождении люди чувствуют себя более привязанными и связанными. Было показано, что прогестерон обладает успокаивающими свойствами.Эстрон в сочетании с серотонином помогает улучшить настроение, а мелатонин способствует расслаблению.

Повышение настроения

Исследование, проведенное при поддержке института SUNY, показало, что студентки колледжей, которые регулярно получали детское тесто, были более счастливы и менее склонны к суициду, чем те, кто этого не делал. Исследователи приписали это положительному эффекту спермы, улучшающему настроение, однако они не приняли во внимание никаких других факторов, таких как счастливая семейная жизнь, успехи в школе или, я не знаю, получение необработанного D на диете. рег.Звучит как неплохое место в жизни, и немного безответственно утверждать, что счастье этих женщин напрямую зависело от введения им 20 кубиков белого золота без учета каких-либо других факторов. Но что я знаю? Я не ученый. Я всего лишь цыпочка, пишущая пост в блоге о пользе мужского майонеза.

Проглатывание

Количество поисковых запросов в Google по запросу «поедание спермы» просто поразительно: если быть точным, за последний месяц их было чуть меньше 10 000.На самом деле, это, возможно, был маршрут, о котором вы думали, когда впервые нажимали на этот пост в блоге. К счастью для вас, у нас есть то, что вы искали. Проглатывание спермы — это самый быстрый способ получить все преимущества детского сока вашего мужчины, и подумайте, он может даже получить от этого удовольствие.

Долговечность

Мы знаем, что это может быть трудно проглотить, но да, сперма может продлить вам жизнь. Было доказано, что Спермидин (первоначально выделенный из спермы, отсюда и название) при приеме внутрь резко увеличивает продолжительность жизни животных на целых 25 процентов.В том же исследовании было также обнаружено, что он предотвращает заболевания печени, а также рак печени.

Когнитивное функционирование

Фактор роста нервов много делает для организма. Известно, что помимо того, что он является антидепрессантом, противовоспалительным и антиоксидантным средством, он также помогает остановить старение мозга. Фактор роста нервов, которого очень много в сперме, жизненно важен для поддержания нейронов головного мозга. Нейроны обрабатывают и передают информацию; именно они заставляют ваш мозг работать.Выживание этих нейронов необходимо для того, чтобы ваш мозг работал! Кто знал, что передача мозгов может так положительно повлиять на ваш мозг?

Питательные свойства

Вы недавно проходили тест на дефицит витаминов (возможно, на сайте HealthLabs.com) и обнаружили, что вам не хватает нескольких жизненно важных питательных веществ? Возьми ложку и попроси у своего мужчины тарелку орехового масла, потому что сперма полна цинка , калия , магния , кальция и цитрата .Питательные вещества всасываются в ваше тело, как менее дорогой витаминный укол (увидимся позже, Jamba Juice).

Актуальный

Это может вас удивить, но сперма приносит пользу не только внутри вашего тела, но и снаружи . Правильно, с количеством цинка , витамина С и спермидина в сперме вашего парня, вы могли бы открыть свою собственную линию по уходу за кожей (это заявление не было оценено FDA).

Зубья

Ищете альтернативное, полностью натуральное решение для отбеливания зубов? Забудьте об угле; проверьте пухлость вашего мужчины. Хотя это не та белая паста, которую вы привыкли наносить на зубную щетку, в сперме содержится много цинка , который является естественным отбеливателем зубов. Основная задача цинка — способствовать выживанию сперматозоидов. Но это не значит, что он не может также помочь выжить вашим жемчужно-белым.

Волосы

Вы слышали о кератиновом уходе? По сути, вы платите кому-то сотни долларов за добавление белка в ваши волосы, чтобы сделать их сильнее.Знаете ли вы, что есть источник белка, о котором вы, вероятно, не думали? Semen содержит более 200 различных видов белка , который может придать вашим волосам силу и блеск, в которых они так нуждаются.

Сперма

также содержит спермидин , который, как было показано, при использовании на коже головы человека способствует удлинению стержня (LOL), а также пролонгирует рост волос. Несмотря на то, что сперма может быть единственной вещью, от которой вы активно пытались избавиться от своих волос, продолжайте и подумайте об этой процедуре для волос своими руками в следующий раз, когда вы захотите дать своим волосам немного жизни (понятно?).

Кожа

Спермидин вернулся, детка! В дополнение к увеличению продолжительности жизни и укреплению здоровья волос, спермидин является антиоксидантом и отлично подходит для кожи. Считается, что он разглаживает кожу, уменьшает морщины и даже уменьшает прыщи. Фактически, компании продают крем для лица на основе спермидина по цене выше 200 долларов! Если вы не хотите тратить эти деньги, денежный выстрел будет более дешевой и естественной альтернативой. 😉

инъекция

Допустим, вы мужчина и читаете этот пост в блоге, а у вашего партнера нет пениса, или ваш партнер, владеющий пенисом, не хочет дать вам хороший, холодный стакан мужского молока, поэтому единственное доступное источник спермы ваш собственный.Вы также сможете получить некоторые оригинальные награды! Конечно, давай, размажь его по лицу и по волосам, но вызывает ли мысль о том, что ты выпьешь свой собственный кул-эйд или введешь его себе в задницу, отвращение и ужас, которого ты никогда раньше не испытывал? Не бояться! У вас есть способ использовать свой собственный любовный сок, и он включает в себя любовь к себе.

Инъекция или «ретроградная эякуляция» — это процесс высвобождения вашей спермы внутри вашего собственного тела. Когда вы приближаетесь к эякуляции, вместо того, чтобы позволить излиянию и всем его преимуществам приземлиться на неблагодарный носок, вы выпускаете его ретроградно или обратно внутрь своего тела.Это может показаться болезненным или неестественным, но это не так. Даосы практиковали инъекции на протяжении тысячелетий, а также некоторые секты буддизма, индуизма и даже древние египтяне! Так что давай, покажи себе немного любви.

Что нужно помнить

Теперь вы знаете, как можно использовать это детское тесто в свою пользу, но есть несколько вещей, о которых вы должны помнить, прежде чем нырнуть лицом в чан с высокофруктозным порно-сиропом.

Безопасные и конфиденциальные услуги по тестированию на ЗППП

Возможны самые быстрые результаты — доступны через 1-2 дня

Пройдите тестирование сегодня

1. У вас может быть аллергия на сперму.Прежде чем вы начнете размазывать его по своей коже или проглатывать его, как ловушку для жажды, знайте, что существует аллергия, называемая гиперчувствительностью к белкам семенной плазмы человека. Это может привести к аллергической реакции, включая зуд, свистящее дыхание, крапивницу, стеснение в груди и затрудненное дыхание.
2. Хотя сперма содержит массу полезных свойств, помните, что ее не бывает в огромных количествах (~ 1 чайная ложка). Вам нужно будет использовать много спермы, чтобы увидеть большинство результатов. Итак, если вы используете эту детскую смесь только из-за преимуществ, вы можете быть разочарованы.Вместо этого мы умоляем вас наслаждаться ореховым маслом таким, какое оно есть, и рассматривать преимущества как дополнительный стимул.
3. Наконец, и это действительно, действительно, самая важная часть: Убедитесь, что ваш источник спермы свободен от ЗППП! Вы принесете гораздо больше вреда, чем пользы, если зальете зараженным жидким золотом все свое тело. Сообщите своему мужчине, что вы заинтересованы в том, чтобы извлечь пользу из его паховой подливки, но сначала ему нужно пройти обследование.

*Помните, что вы можете заразиться ЗППП при оральном сексе, анальном сексе и попадании половых жидкостей в глаза!*

А если вам интересно узнать больше о конкретных компонентах спермы, ознакомьтесь с нашей статьей «Из чего состоит сперма» или «Преимущества секса».

сперматозоидов как суперфуд? Это здоровая закуска для кальмаров и других тварей.

Некоторые самки потребляют эякулят и сперму мужчин, как если бы они были пищей, используя питательные вещества для питания своего тела, а также своих яиц, согласно новому исследованию.

Исследование, опубликованное в журнале Biology Letters, добавляет еще одно измерение к битве между полами.

«Если самцы потребляют свою сперму, а не используют ее для оплодотворения яйцеклеток, они теряют эту репродуктивную возможность.Следовательно, в интересах самца попытаться обеспечить, чтобы хотя бы часть его спермы попала в яйцеклетку самки», — объяснил Discovery News ведущий автор Бенджамин Вегенер, исследователь из Школы биологических наук Университета Монаша. потребление эякулята хорошо задокументировано среди многих видов. Люди включены в эту группу, но поведение не является стандартной частью нашего репродуктивного процесса

.к.а. витамин С), лимонная кислота, ферменты, белок, цинк и многое другое. Это похоже на список ингредиентов спортивного напитка с протеином.

Фотографии: раскрыты стратегии спаривания животных

Потребление спермы — в отличие от простого глотания эякулята — в животном мире «гораздо менее распространено», согласно Вегенеру. Виды, демонстрирующие это, включают мушек-падальщиков, мух-картинников, странного морского беспозвоночного, известного как Spadella cephaloptera, одного из видов пиявок, морского голожаберного моллюска и южного кальмара-бутылки (Sepiadarium austrinum).

Люди снова могут глотать сперму, но это не стандартное поведение во время размножения.

Похоже, это часто происходит среди кальмаров, являющихся предметом нового исследования. Вегенер и его команда обнаружили такое поведение и отследили, как питательные вещества используются после употребления. Впервые это явление наблюдалось у самки с наружным оплодотворением.

«Это важное различие, так как даже если самка потребляет часть эякулята с этими внутренними удобрениями, по крайней мере часть спермы остается внутри в репродуктивном тракте», — сказал он.«Для внешнего удобрения с кратковременным хранением спермы, если самка вовремя не откладывает яйца, самец теряет шанс оплодотворить яйца».

Чтобы решить эту проблему, сперма кальмаров и сперма многих других животных может содержать манипулятивные соединения, стимулирующие размножение самок. К настоящему времени в других типах сперматозоидов идентифицировано более 80 белков, которые могут делать следующее: снижать восприимчивость самок к дальнейшему спариванию, побуждать их к более ранней откладке яиц, стимулировать овуляцию и выработку яйцеклеток, а также влиять на то, как долго самки хранят сперму и влияют на яйценоскость.

Видео: четыре необычных привычки спаривания животных

Самки, с другой стороны, могут контролировать, будут ли они потреблять сперму или эякулят.

Это вызывает множество вопросов, например, используют ли самки иногда самцов в качестве источника пищи, берут ли самки образцы спермы, чтобы определить ее качество, и едят ли они ее, чтобы другие сперматозоиды могли оплодотворить яйцеклетку.

Том Тредженца, профессор эволюционной экологии Эксетерского университета и директор по исследованиям CLES Cornwall, сообщил Discovery News, что уже некоторое время известно, что насекомые получают питательную ценность, поедая пакеты мужской спермы (кальмары, некоторые насекомые и другие). виды заключают сперму в запаянную мембраной подпружиненную упаковку).Он сказал, что «эта находка точно такого же вида вещей, развившихся совершенно независимо в такой отдаленно связанной группе, действительно увлекательна».

Он согласен с тем, что такое поведение может оказывать давление на самцов, которые должны балансировать между предоставлением достаточного количества спермы для оплодотворения, но, возможно, не настолько сильно, чтобы самки начали полагаться на него как на обычную «соблазнительную еду».

«Как отмечают авторы, — добавил Трегенза, — она может даже съесть пакеты со спермой менее привлекательных самцов и использовать сперму более привлекательных для оплодотворения своих яйцеклеток.»

Copyright 2013 Discovery Communications LLC.

Проблемы с красным мясом и спермой

«У мужчин, которые наедаются стейками, гамбургерами и жирными сливками, сперма такого низкого качества, что у них мало шансов стать отцом», — пишет The Daily Telegraph. Новость основана на исследовании  61 мужчины, которое показало, что диета, содержащая овощи, богатые антиоксидантами, улучшила качество их спермы.

Исследование показало, что мужчины с нормальной спермой потребляли больше углеводов, клетчатки, фолиевой кислоты, витамина С и ликопина, чем мужчины с низким количеством сперматозоидов и аномальной спермой.Те, у кого была нормальная сперма, также имели более низкое потребление белков и общего жира. Исследование не устанавливает прямой связи между красным мясом и качеством спермы, как предполагают газеты.

Исследователи изучили, как мужчины оценивают потребление пищи, и рассчитали количество определенных питательных веществ, которые они потребляли. Хотя они обнаружили, что мужчины с аномальной спермой потребляли больше белка, этот белок мог поступать из нескольких источников пищи.

Исследование было небольшим и имело ограничения из-за дизайна.Это исследование следует рассматривать как предварительное доказательство, и потребуются более масштабные исследования, чтобы выяснить, действительно ли диета влияет на качество спермы.

Откуда взялась эта история?

Это исследование было проведено доктором Хайме Мендиолоа и его коллегами из Института Бернабеу и других медицинских и академических учреждений Испании. Исследование было частично поддержано рядом испанских учреждений, в том числе Фондом Сенеки и Департаментом образования и культуры Мурсии.Он был опубликован в рецензируемом медицинском журнале Fertility and Sterility.

Что это было за научное исследование?

Это было исследование случай-контроль, в котором изучалось влияние диеты на качество спермы.

В ходе исследования 30 мужчин с некачественной спермой (группа случаев) сравнивались с контрольной группой из 31 мужчины со здоровой спермой. Мужчин набирали через клиники по лечению бесплодия в Мурсии и Аликанте в Испании. Мужчины в группе случаев имели сочетание тяжелой и умеренной олигозооспермии (низкое количество сперматозоидов менее 20 миллионов сперматозоидов/мл) и сильно аномальные сперматозоиды (менее 6% нормальных сперматозоидов).Мужчины контрольной группы имели нормальную сперму (20 млн и более сперматозоидов/мл и более 13% нормальных форм).

Мужчины предоставили два образца спермы с интервалом от семи дней до трех недель между двумя сборами. Были проведены различные анализы образцов спермы, включая объем эякулята, концентрацию сперматозоидов и процент подвижных (способных двигаться) сперматозоидов. Сперму также исследовали под микроскопом. Участники прошли медицинский осмотр, во время которого были измерены рост и вес, а также была собрана информация о профессиональном анамнезе.

Для оценки того, как часто мужчины употребляли различные продукты в течение предыдущего года, использовался опросник по частоте приема пищи, при этом ответы варьировались от «никогда или реже одного раза в месяц» до «шесть или более раз в день». Ответы были преобразованы в оценки потребления питательных веществ (белков, углеводов, витаминов, минералов и т. д.) путем умножения количества потребляемой пищи на ее питательный состав, который был получен из таблиц состава пищевых продуктов. Потребление алкоголя также оценивалось с помощью анкеты частоты приема пищи.

Затем исследователи использовали статистические методы для оценки связи между качеством спермы и потреблением питательных веществ, а также сделали поправку на ряд других факторов, которые могли повлиять на взаимосвязь (вмешивающиеся факторы). К ним относятся курение, возраст, предыдущее профессиональное воздействие и общее потребление энергии.

Каковы были результаты исследования?

Авторы обнаружили, что мужчины с нормальной спермой потребляли больше углеводов, клетчатки, фолиевой кислоты, витамина С и ликопина. У них также было меньшее потребление белков и общего жира.

Какие интерпретации сделали исследователи из этих результатов?

Исследователи пришли к выводу, что низкое потребление антиоксидантных питательных веществ, содержащихся во фруктах и ​​овощах, было связано с плохим качеством спермы у испанских мужчин, посещающих клиники по лечению бесплодия.

Что служба знаний NHS делает из этого исследования?

В этом небольшом исследовании методом случай-контроль изучалась связь между потреблением определенных питательных веществ и качеством спермы. Есть несколько важных моментов, которые следует учитывать при интерпретации результатов этого исследования:

• Этот тип исследования случай-контроль не может доказать причинно-следственную связь (другими словами, что диета мужчин была ответственна за качество их спермы).Хотя исследователи скорректировали некоторые очевидные смешанные факторы, на результат могли повлиять неизмеримые факторы.
• Исследования типа «случай-контроль» склонны к ошибкам припоминания, что означает, что участники, возможно, не совсем точно помнили свой предыдущий прием пищи. В этом исследовании мужчин спрашивали, сколько они съели определенных групп продуктов за последний год. Их воспоминания об этом вряд ли были на 100% правильными. Другая информация, например, о профессиональном воздействии, также могла быть воспроизведена неточно.
• Это было небольшое исследование, поэтому оценки связи между качеством спермы и потреблением питательных веществ не очень точны. Исследователи очень осторожны в своих выводах из этого исследования. Они говорят, что результаты показывают, что «плохое качество спермы может быть связано с более низким потреблением углеводов, клетчатки, фолиевой кислоты, витамина С и ликопина и более высоким потреблением белка и общего жира», и что в целом «низкое потребление антиоксидантов». питательные вещества могут оказывать негативное влияние на качество спермы.

Хотя это исследование может предоставить некоторые предварительные данные о связи между определенными питательными веществами и качеством спермы, оно имеет ограничения, и результаты необходимо подтвердить в более крупных проспективных исследованиях.

.