Содержание

Повреждение сухожилия | Центр Эндохирургичеких технологий

Выбор метода реконструкции сухожилий производится с учетом сроков, прошедших с момента травмы, распространенности рубцовых изменений по ходу сухожилий, состояния кожного покрова в месте операции. Сухожильный шов показан при возможности соединения поврежденного сухожилия конец в конец, нормальном состоянии мягких тканей в области операции. Выделяют первичный сухожильный шов, выполняемый в пределах 10-12 суток после травмы при отсутствии признаков инфекции в области раны и резаном ее характере, и отсроченный шов, который накладывают в сроки от 12 дней до 6 недель после травмы при менее благоприятных условиях (рвано-ушибленные раны). Во многих случаях в более поздний период наложение шва невозможно из-за ретракции мышц и возникновения значительного диастаза между концами сухожилия. Все виды сухожильных швов можно разделить на две основные группы – удаляемые и погружные.

Удаляемые швы, предложенные в 1944 году Bunnell S.

, применяются при фиксации сухожилия к кости и в зонах, где ранние движения не столь необходимы. Шовная нить удаляется после того, как сухожилие достаточно прочно срастается с тканями в точке фиксации. Погружные швы остаются в тканях, неся механическую нагрузку. В ряде случаев используются дополнительные швы, обеспечивающие более совершенное сопоставление концов сухожилий. В застарелых случаях, а также при первичном дефекте показана сухожильная пластика (тендопластика). Источником сухожильного аутотрансплантата являются сухожилия, взятие которых не вызывает значительных функциональных и косметических нарушений, например, сухожилие длинной ладонной мышцы, поверхностных сгибателей пальцев кисти, длинных разгибателей пальцев стопы, подошвенной мышцы.

Повреждения сухожилий сгибателей пальцев

Анатомия.

Сгибание 2-5 пальцев осуществляется за счет двух длинных сухожилий – поверхностного, прикрепляющегося к основанию средней фаланги и глубокого, прикрепляющегося к основанию дистальной фаланги.

Сгибание 1 пальца осуществляется за счет сухожилия длинного сгибателя 1 пальца. Сухожилия сгибателей расположены в узких, сложных по форме костно-фиброзных каналах, изменяющих свою форму в зависимости от положения пальца

Изменение формы костно-фиброзных каналов 2-5 пальцев кисти при их сгибании

В местах наибольшего трения между ладонной стенкой каналов и поверхностью сухожилий, последние окружены синовиальной оболочкой, формирующей влагалища. Сухожилия глубоких сгибателей пальцев соединены посредством червеобразный мышц с сухожильным разгибательным аппаратом.

Диагностика.

При повреждении сухожилия глубокого сгибателя пальца при фиксированной средней фаланге сгибание ногтевой невозможно, при сочетанном повреждении обоих сухожилий также невозможно сгибание и средней фаланги.

Диагностика повреждений сухожилий сгибателей (1, 3 – глубокого, 2, 4 – обоих)

Сгибание же основной фаланги возможно за счет сокращения межкостных и червеобразных мышц.

 Лечение.

Выделяют пять зон кисти, в пределах которых особенности анатомии влияют на технику и результаты первичного шва сухожилий.

Зоны кисти

В 1 зоне в костно-фиброзном канале проходит только сухожилие глубокого сгибателя, поэтому его повреждение всегда изолированное. Сухожилие имеет небольшую амплитуду движения, центральный конец часто удерживается mesotenon и может быть легко извлечено без значительного расширения зоны повреждения. Все эти факторы определяют хорошие результатом наложения первичного сухожильного шва. Наиболее часто применяют чрескостный удаляемый шов сухожилия. Возможно использование погружных швов.

На протяжении 2 зоны происходит перекрест сухожилий поверхностного и глубокого сгибателей пальцев, сухожилия плотно прилежат друг к другу, имеют большую амплитуду движений. Результаты шва сухожилия часто неудовлетворительны в следствие рубцовых сращений между скользящими поверхностями. Даная зона получила название критической или «ничейной».

Вследствие узости костно-фиброзных каналов не всегда возможен шов обоих сухожилий, в ряде случаев необходимо иссечение сухожилия поверхностного сгибателя пальца и наложение шва только на сухожилие глубокого сгибателя. В большинстве случаев это позволяет избежать контрактур пальцев и существенно не влияет на функцию сгибания.

В 3 зоне сухожилия сгибателей соседних пальцев разъединены сосудисто-нервными пучками и червеобразными мышцами. Поэтому повреждения сухожилий в этой зоне часто сопровождаются повреждением этих структур. После шва сухожилия необходим шов пальцевых нервов.

В пределах 4 зоны сухожилия сгибателей располагаются в запястном канале вместе со срединным нервом, который расположен поверхностно. Травмы сухожилий в этой зоне достаточно редки и практически всегда сочетаются с повреждением срединного нерва. Операция предусматривает рассечение поперечной связки запястья, шов сухожилий глубоких сгибателей пальцев, сухожилия поверхностных сгибателей иссекают.

На протяжении 5 зоны заканчиваются синовиальные влагалища, сухожилия соседних пальцев проходят вплотную друг к другу и при сжатии кисти в кулак смещаются вместе. Поэтому рубцовое сращение сухожилий между собой практически не влияет на объем сгибания пальцев. Результаты сухожильного шва в этой зоне как правило хорошие.

Послеоперационное ведение.

Производят иммобилизацию пальца с помощью тыльной гипсовой лонгеты сроком на 3 недели. Со второй недели после спадения отека и уменьшения болевого синдрома в ране производят пассивное сгибание пальца. После снятия гипсовой лонгеты начинают активные движения.

Повреждения сухожилий разгибателей пальцев

Анатомия.

В образовании разгибательного аппарата принимают участие сухожилие общего  разгибателя пальца и сухожилия межкостных и червеобразных мышц, соединенные множеством боковых связок, образуя сухожильно-апоневротическое растяжение

Разгибатели пальцев и кисти.

Необходимо помнить, что у указательного пальца и мизинца помимо общего, есть и сухожилие собственного разгибателя. Средние пучки сухожилия разгибателя пальцев прикрепляются к основанию средней фаланги, разгибая ее, а боковые пучки соединяются с сухожилиями мелких мышц кисти, прикрепляются к основанию ногтевой фаланги и выполняют функцию разгибания последней. Разгибательный апоневроз на уровне пястно-фалангового и проксимального межфалонгового суставов образует фиброзно-хрящевой диск на подобие надколенника. Функция мелких мышц кисти зависит от стабилизации основной фаланги разгибателем пальца. При согнутой основной фаланге они действуют как сгибатели, а при разогнутой  совместно с разгибателем пальцев становятся разгибателями дистальной и средней фаланг.

Таким образом о совершенной разгибательно-сгибательной функции пальца можно говорить только при целостности всех анатомических структур. Наличие такой сложной взаимосвязанности элементов до некоторой степени благоприятствует спонтанному заживлению частичных повреждений разгибательного аппарата. Кроме того, наличие боковых связок разгибательной поверхности пальца препятствует сокращению сухожилия при повреждении.

Диагностика.

Характерное положение, которое палец принимает в зависимости от уровня повреждения позволяет быстро поставить диагноз.

Диагностика повреждения сухожилий разгибателей

разгибателей на уровне дистальной фаланги палец принимает положение сгибания в дастальном межфаланговом суставе. Такая деформация  получила название «палец-молоток» (mallet finger). В большинстве случаев свежих повреждений эффективно  консервативное лечение. Для этого палец должен быть фиксирован в переразогнутом в дистальном межфаланговом суставе  положении с помощью специальной шины. Величина гиперэкстензии зависит от уровня мобильности суставов пациента и не должна вызывать дискомфорт. Остальные суставы пальца и кисти необходимо оставить свободными. Срок иммобилизации оставляет 6-8 недель. Однако использование шин требует постоянного контроля за положением пальца, состоянием элементов шины, а также понимания пациентом стоящей перед ним задачи, поэтому в ряде случаев возможна трансартикулярная фиксация ногтевой фаланги спицей на тот же срок. Хирургическое лечение показано при отрыве сухожилия от места прикрепления со значительным костным фрагментом. В этом случае производится чрезкостный шов сухожилия разгибателя с фиксацией костного фрагмента.

При повреждение сухожилий разгибателей на уровне средней фаланги  одновременно происходит повреждение треугольной связки,а боковые пучки сухожилия расходятся в ладонном направлении. Таким образом они не разгибают, а сгибают среднюю фалангу. При этом головка основной фаланги смещается вперед через щель в разгибательном аппарате подобно пуговице, проходящей в петлю. Палец принимает согнутое в проксимальном межфаланговом суставе и переразогнутое в дистальном межфаланговом суставе положение. Такая деформация получила название «бутоньерка». При данном видем травмы необходимо хирургическое лечение – сшивание поврежденных элементов с последующей иммобилизацией на 6-8 недель.

Лечение повреждений на уровне основной фаланги, пястно-фаланговых суставов, пясти и запястья только оперативное – первичный шов сухожилия с последующей иммобилизацией кисти в положении разгибания в лучезапястном и пястно-фаланговых и небольшого сгибания в межфаланговых суставах сроком на 4 недели с последующей разработкой движений.

Повреждение нервов кисти

Иннервацию кисти обеспечивают три основных нерва – срединный, локтевой и лучевой. В большинстве случаев основным чувствительным нервом кисти является срединный, а основным двигательным нервом – локтевой, иннервирующий  мышцы возвышения мизинца, межкостные, 3 и 4 червеобразные мышцы и мышцу, приводящую большой палец.   Важное клиническое значение имеет двигательная ветвь срединного нерва, отходящая от латеральной кожной его ветви сразу после выхода из канала запястья. Эта ветвь иннервирует короткий сгибатель 1 пальца, а также короткую отводящую и противопоставляющую мышцы Многие. мышцы кисти имеют двойную иннервацию , что сохраняет в той или иной мере функцию этих мышц при повреждении одного из нервных стволов. Поверхностная ветвь лучевого нерва является наименее значимой , обеспечивая чувствительность на тыльной поверхности кисти. При повреждении обоих пальцевых нервов вследствие выпадения чувствительности  больной не может пользоваться пальцами, наступает их атрофия.

Диагноз повреждения нервов следует установить до начала операции, так как после анестезии это невозможно.

Наложение шва на нервы кисти требует использования микрохирургической техники и адекватного шовного материала (нить 6\0-8\0). В случае свежих повреждений сначала обрабатываются мягкие и костная ткани, после чего приступают к шву нерва

Эпиневральный шов нерва

Конечность фиксируется в положении, обеспечивающем наименьшее натяжение линии шва в течение 3-4 недель.

Выводы:

Операции по восстановлению функционально важных структур кисти, проводиться в несколько этапов, стационарные этапы чередуются с амбулаторными, на всех этапах нужен опыт и наблюдение специалиста. В виду слабости амбулаторного звена государственных учреждений адекватная помощь возможна только в условиях «Центра Эндохирургических Технологий» где нет неконтролируемого патока пострадавших, здесь можно уделить внимание каждому больному.

Очень важно сразу после травмы попасть к нужному специалисту, в нашем городе этой проблемой занимаются не многие травматологи из-за сложности и низкой рентабельности на базе государственных клиник. Врач должен спланировать все ваше лечение с начала и до конца, предвидеть и предусмотреть все возможные осложнения. Первый этап самый важный что-то исправить в дальнейшем очень сложно иногда не возможно.

Хирургия кисти требует от врача опыта, а от пациента терпения и настроя на победу.

Для записи на консультацию: e-mail: Endotrv@mail. ru, тел.: +7 (391) 297-52-52

Лечение повреждения сухожилий сгибателей пальцев кисти руки в Москве

Травмы, приводящие к повреждению сухожилий кисти, нередки. Они происходят в результате открытого повреждения. Значительно реже встречаются закрытые раны. В любом случае главная задача медицинской помощи сводится к полному восстановлению функции кисти.

Диагностика

Распознать повреждение сухожилия не представляет труда – расстройства двигательной функции, связанные с этим состоянием, обнаруживаются легко. Опытный хирург ставит диагноз, ориентируясь на обстоятельства происшествия и расположение раны.

Для этого не нужно производить никаких специальных движений или находить концы травмированных сухожилий без соответствующей подготовки. Активные попытки согнуть пальцы могут вызвать кровотечение и разрыв связок, осложненный расхождением их концов.

Окончательный диагноз ставят только во время проведения операции.

Что способствует восстановлению?

Пострадавший поступает в стационар ЦКБ РАН, оснащенный специальным оборудованием.

Здесь работают опытные врачи, которые:

  • Решают сложные проблемы кистевой анатомии.
  • Успешно проводят реконструктивные операции;
  • Ведут больного до полного выздоровления.
  • Особенности оперативного лечения

Операция должна быть проведена как можно раньше. Желательно – в первые шесть часов. Для наложения первичного шва есть только сутки с момента травмирования.

Операция по восстановлению функции кисти – сложная и длительная процедура, часто требующая использования технологий микрохирургии.

Она производится под жгутом, гарантируя минимальное травмирование тканей. Во время процедуры применяется местное обезболивание, чтобы пациент мог участвовать в процессе.

После операции рука фиксируется при помощи наложения гипса.

Восстановительный период

Результаты лечения только на 50% определяются профессионализмом врачей и возможностями оборудования. Вторые 50% обеспечивает желание и упорство пациента, который обязан точно следовать всем рекомендациям. Только при совместных усилиях возможно успешное выздоровление.

Период реабилитации включает:

  • Разработку пальце вкисти;
  • Лечение медикаментами;
  • физиотерапию;
  • массаж и лечебную гимнастику;
  • разумные нагрузки в качестве трудотерапии.

Все эти мероприятия направлены на минимизацию риска образования сращений между оперированным сухожилием и соседними тканями.

Сегодня для успешного восстановления после операции в ЦКБ РАН используют:

  • волновую терапию;
  • системную энзимотерапию;
  • светолечение.

Возможные осложнения

В случае несостоятельности шва рекомендована повторная операция. Развитие гнойного процесса требует проведения повторного вскрытия канала, обработку и установку дренажа. Нередко в этих случаях назначают антибактериальную терапию. В случае патологических сращений проводят физиотерапевтические процедуры.

Восстановление мышц, сухожилий, связок в Москве, цены на процедуры

Различные повреждения мышц, сухожилий и связок чаще всего являются спутниками профессиональных спортсменов, но, как показывает практика, именно непрофессиональный подход к физическим упражнениям, некачественные спортивные снаряжения, обувь и даже простая неуклюжесть ничем не уступают. Помимо всего прочего с возрастом и при отсутствии необходимой повседневной физической нагрузки, правильного питания, насыщенного необходимыми макро и микроэлементами ткани мышц, связок и сухожилий имеют свойства истощаться, атрофироваться, становиться хрупкими.

К травмам связок, мышц и сухожилий относятся: растяжения, частичный или полный разрыв.

Клинические признаки при растяжении и разрыве связок сходны с признаками, наблюдаемыми при ушибах. Однако при повреждении связок характерны более острая, резкая боль в месте прикрепления связок, а также, более выраженное нарушение двигательной функции конечности, в области сустава наблюдается припухлость в результате излияния крови в мягкие ткани. Может отмечаться кровоизлияние в сустав (гемартроз), что в еще большей степени усиливает нарушение функции сустава. Нередко повреждение связок сопровождается деформацией области сустава. Первая помощь при повреждении связок: наложить фиксирующую бинтовую повязку (для голеностопного сустава — восьмиобразная), холод через повязку (пузырь со льдом, бутылка с холодной водой). На 2-е сутки можно начать тепловые процедуры, массаж и движения и суставе. При полном разрыве связок осуществляется сшивание разорванных концов, иммобилизацию, а затем разработку сустава.

Разрывы сухожилий происходят при очень сильном и быстром сокращении мышц, при падении, подъеме тяжестей (в месте перехода мышц в сухожилие). Чаще всего повреждаются сухожилия кисти и пальцев, ахиллово сухожилие. Разрыв сухожилий сопровождается значительным расхождением их краев в результате сокращения мышц. При разрыве сухожилий выпадает сгибательная или разгибательная функция поврежденного сегмента конечности. Кроме того, отмечается припухлость сухожилия и болезненность.

Разрывы мышц возникают при быстром и сильном их сокращении (внезапное падение, подъем чрезмерной тяжести). Они могут быть полными и неполными. При полном разрыве происходит расхождение сократившихся концов. Разрывы мышц сопровождаются сильными болями в области повреждения, кровоизлиянием и резким ограничением движений. При полном разрыве ощупывание позволяет определить поперечный дефект мышцы в виде щели между разорванными концами.

Первая медицинская помощь при разрыве сухожилий и мышц: холод в первые часы на область травмы, создание покоя поврежденной конечности (иммобилизация подручными средствами), наложение давящей повязки.

Дальнейшие мероприятия проводятся в больнице. При неполных разрывах накладывают на несколько недель гипсовую повязку. Конечность сгибают так, чтобы максимально расслабились мышцы. После срастания сухожилий и мышц назначают массаж, лечебную физкультуру. При полных разрывах необходимо хирургическое лечение.

Операция на сухожилиях в Калининграде — Медцентр «Надежда»

Операции на сухожилиях чаще всего направлены на то, чтобы восстановить разрывы и другие повреждения, полученные в процессе занятий спортом, падений, аварий и т.д. Операции на сухожилиях пальца, ноги, руки — все они стали уже стандартной сферой работы врачей-хирургов.

Особенности операции на сухожилиях пальца и других сухожилиях

Несмотря на то, что восстановление целостности сухожилий — распространенная и простая практика, такие операции имеют множество своих особенностей и нюансов, среди которых:

  • такие повреждения зачастую возникают из-за ран, что становится причиной загрязнения оперируемой зоны различными микробами;
  • разрыв или повреждение сухожилия всегда сопровождается некоторым смещением проксимального конца за ранение, так как мышца сокращается — такая сложность требует множество дополнительных хирургических манипуляций;
  • любая травма, а тем более разрыв сухожилия не обходится без нарушения кровоснабжения конечных фрагментов органа;
  • процесс сращивания фрагментов поврежденного сухожилия редко обходится без врастания соединительной ткани и сосудов в ближайшие ткани.

Также имеются и другие нюансы, часто выявляемые в индивидуальном порядке, которые отягощают процесс операции и реабилитации.

Операция ахиллесова сухожилия

Ахиллесово или Ахилово сухожилие — толстый фрагмент волокнистой ткани, размещенный в задней части голеностопа. Его функция — соединение мощных голенищных мышц с пяточной костью. Ахиллесово сухожилие считается самым толстым, однако и наиболее повреждаемым. Причем чаще всего, в случае, если происходит разрыв сухожилия, оно разрывается полностью, а не частично.

О разрыве сухожилия ахиллесова свидетельствует резкая боль в задней части стопы, громкий щелчок ли треск, временами место разрыва даже можно нащупать рукой через кожу. Операция по восстановлению ахиллового сухожилия должна вернуть органу нормальную длину и уровень натяжения, который сможет обеспечить вам ту подвижность, которая была до травматического инцидента. Также задачей хирурга является соблюдение баланса между ранними движениями и иммобилизацией.

Стоит отметить, что лечение разрыва мышцы голеностопа не всегда должно проходить с хирургическим вмешательством. Существуют еще и консервативный вариант, который заключается шестинедельной иммобилизацией после наложения гипса или брейса. Однако какой бы метод лечения вы не выбрали, регулярные ЛФК и физиотерапия — обязательные условия для вашей дальнейшей подвижной жизни.

О том, есть ли необходимость производить хирургическое вмешательства, необходимо беседовать с травматологом-ортопедом, ознакомленным с вашей историей болезни. Если поврежденное сухожилие может восстановиться самостоятельно, хирургического вмешательства можно будет избежать.

Разрыв ахиллова сухожилия – Др.медицины Эрих Х. Рембек

Разрыв ахиллова сухожилия
Общая информация

Разрыв ахиллова сухожилия в момент трамвы пациент замечает сразу. Часто при этом возникает ощущение щелчка, щелкающего шума или ощущение удара по икре ноги. Если во время трамвы происходит полный разрыв сухожилия, то у пациента возникает ощущение значительного снижения силы трехглавой мышцы голени. Следует однако отметить, что при этом сохраняется остаточная функция подошвенного сгибания стопы, так как мускулатура задней большой берцовой мышцы, а также длинной и короткой малоберцовой мышцы поддерживает функцию ахиллова сухожилия и после травмы может даже частично перенимать его функцию. Этим обьсняется то, что некоторые пациенты замечают правда травму как таковую, однако действительная постановка диагноза затягивается по причине того, что функция ахиллова сухожилия кажется поначалу сохраненной.

Основным методом диагностики полного разрыва ахиллова сухожилия, обусловленного травмой, является клинический. Для этого обычно достаточно простого внешнего осмотра, который как правило дополняется ультразвуковым обследованием, если симптомы недостаточно понятны. Для определения размера травмы, в особенности для определения размера разрыва, может потребоваться дополнительное исследование, такое как МРТ-тест.

Согласно нашему многолетнему опыту, подкрепленному научной литературой на эту тему, наиболее приемлемым способом лечения полного разрыва ахиллова сухожилия является, как правило, хирургическое вмешательство. В исключительных случаях, если речь идет об очень молодых пациентах или, если оперативное лечение невозможно по другим причинам (возраст пациента, хронические заболевания, прием сильнодействиующим медицинских препаратов), осуществляется консервативное лечение. Суть консервативного лечения сводится к тому, что ногу обездвиживают гипсовой лонгетой с вытянутым носком стопы на 6-8 недель. Для того, чтобы сделать иммобилизацию более комфортной могут использоваться специальные ортезы или брейсы. Преимуществом ортезов является то, что они позволяют регулировать угол, под которым обездвижена стопа, что значительно облегчает реабилитацию.
Нехирургическая помощь

Нехирургический метод лечения может быть осуществлен только в том случае, если его начать в первые дни после травмы, пока концы сухожилия еще можно сопоставить. Как уже говорилось выше, нехирургический метод лечение полного разрыва ахиллова сухожилия может быть осуществлен только в том случае, если есть противопоказания к оперативному методу лечения (возраст, хронические заболевания и т.д.).

Нехирургический метод лечения заключается в первую очередь в достижении снижения болевого синдрома, проведении мероприятий по улучшению кровоснабжения, осуществлении физиопроцедур, предупреждении дальнейшей травматизации сухожилия, а также проведении комплекса физиотерапевтических упражнений.
Оперативное лечение и последующее лечение

Для скорейшего и надежного восстановления полной функции ахиллова сухожилия при лечении свежих повреждений мы рекомендуем использование первичного шва сухожилия. При лечении застарелых разрывов сухожилий оперативное лечение в любом случае становится необходимым. При выборе метода вмешательства или сомнительной клинической картине повреждения, с успехом может быть применена МР-томография ахиллова сухожилия. Это исследование позволяет четко оценить уровень разрыва и степень расхождения концов сухожилия. В сочетании с клиническим методом обследования это дает возможность конкретного определения направления оперативного вмешательства.

В случае оперативного лечения, которое должно быть проведено по возможности в течение первых 7 дней после травмы, имеется несколько методов хирургического лечения. При классическом варианте операции выполняют разрез по задней поверхности голени, происходит широкое раскрытие зоны повреждения, осуществляется доступ к сухожилию и разорванные концы сухожилия сшиваются «конец в конец» специальной прочной хирургической нитью. Преимущество заключается в том, что разорванные мышцы и поврежденное сухожильное влагалище могут быть хорошо сшиты и в конце операции хирург может точно оценить качество осуществленного сшивания сухожилий. Существует однако и другой метод операции, при котором осуществляется закрытый чрезкожный шов. При этом кожа не разрезается и сухожилие не вскрывается. Этот метод операции дает более лучший косметический эффект, имеет однако один недостаток, так как поврежденные концы сухожилия не могут быть 100-процентно сшиты «конец в конец». По этой причине закрытый чрежкожный шов применяется только в отдельных случаях. Хирургическое лечение таким методом не применяется при разрывах сухожилий у спортсменов-профессионалов или амбиционированных спортсменов-любителей.

Если у Вас запланировано проведение операции по сшиванию разорванного ахиллова сухожилия, то уже при первом обращении в наш центр для Вас изготавливается гипсовая повязка, которая накладывается сразу после операции. Эту гипсовую лонгету Вы должны будете принести с собой в клинику в день операции.

Гипсовая лонгета накладывается на голень в положении подошвенного сгибания под углом от 45° до 30°, в зависимости от степени повреждения сухожилия. Первые 2 недели эту лонгету необходимо носить постоянно не снимая, за исключением периодов проведения физиотерапевтических процедур. Через две иногда через четыре недели после операции осуществляется изменение положения стопы вплоть до 0°. В зависимости от степени повреждения сухожилия и по решению хирурга, можно перейти от ношения гипсовой лонгеты к ношению сьемного ортеза (сапоги Vacoped), с которым разрешается повышение двигательной активности с частичной нагрузкой.

При полном разрыве ахиллова сухожилия, в зависимости от степени его повреждения, ношение гипсовой лонгеты с частичной нагрузкой на костылях необходимо в течение 8 недель после операции.

В течение первых 12 недель после операции особое внимание следует уделить защите сшитого сухожилия. Нагрузка должна быть строго дозирована, по решению оперировавшего хирурга. Нагрузки при ходьбе и беге в рамках соревнований не должны осуществляться раньше чем через 6 месяцев.



Международный специализированный центр ортопедической хирургии, артроскопия, спортивная травматология и реабилитация

Арабелластр. 17
D-81925 Мюнхен
Германия

Тел.: +49. 89. 92 333 94-0
Факс: +49. 89. 92 333 94-29

Diese E-Mail-Adresse ist gegen Spam-Bots geschützt, Sie müssen Javascript aktivieren, damit Sie sie sehen können.

 
ОТДЕЛ ПО РАБОТЕ С ПАЦИЕНТАМИ ИЗ РОССИИ:

Mail: Diese E-Mail-Adresse ist gegen Spam-Bots geschützt, Sie müssen Javascript aktivieren, damit Sie sie sehen können.


Др.Эрих. Х. Рембек
импрессии из центра спортивной ортопедии ER в Арабеллапарке

>> к фотогалереи


Дорожная клиническая больница

Вращательная манжета плеча представляет собой группу из четырех мышц и нескольких сухожилий, которые формируют покрытие вокруг верхней части (головки) плечевой кости. Ротаторная манжета фиксирует положение плечевой кости в плечевом суставе и дает возможность вращать рукой.

Разрыв вращательной манжеты – это распространенная причина боли и нарушения функций плеча у взрослых. Большинство разрывов приходится на надостную мышцу, но разрыв может произойти и в других частях манжеты.

Разрывы вращательной манжеты чаще всего происходят у людей старше 40 лет. Поначалу боль может быть несильной и только при движениях над головой, например, когда человек за чем-либо тянется или что-либо поднимает. С течением времени боль может стать заметной и во время отдыха или в отсутствии какой-либо деятельности. Может возникать боль в ночное время при лежании на поврежденной стороне.

Последствия.

У пациента значительно нарушается функция плечевого сустава, вплоть до выключения некоторых движений (отсутствие активного отведения). Также беспокоят боли в плечевом суставе.

Лечение.

При неэффективности консервативного лечения показано проведение операции. Тип проводимой операции зависит от размера, формы и локализации разрыва. При частичном разрыве может потребоваться только процедура обрезки или выравнивания, называемая дебридмент. Полный разрыв в самой толстой части сухожилия лечится путем сшивания двух частей сухожилия друг с другом. Если разрыв происходит прямо в месте присоединения сухожилия к плечевой кости, оно присоединяется непосредственно к кости.

Обычно при хирургическом лечении используются следующие подходы:

• Артроскопическое лечение – шов поврежденных сухожилий через проколы кожи, с помощью артроскопа.

• Лечение с минимальным разрезом. Новейшие технологии и инструменты позволяют хирургу провести полное восстановление ротаторной манжеты через небольшой разрез, обычно от 4 до 6 см.

• Открытая операция. Традиционный разрез при открытой операции часто необходим, если разрыв большой или сложный или если необходима дополнительная реконструкция.

сухожилие | Описание и функция

Сухожилие , ткань, которая прикрепляет мышцу к другим частям тела, обычно к костям . Сухожилия — это соединительные ткани , передающие к костям механическую силу сокращения мышц; сухожилие прочно связано с мышечными волокнами на одном конце и с компонентами кости на другом. Сухожилия необычайно прочные и обладают одним из самых высоких показателей прочности на разрыв среди мягких тканей. Их большая сила, необходимая для противостояния нагрузкам, возникающим при сокращении мышц, объясняется иерархической структурой, параллельной ориентацией и тканевым составом волокон сухожилий.

Британская викторина

Тело человека

Возможно, вы знаете, что человеческий мозг состоит из двух половин, но какая часть человеческого тела состоит из крови? Проверьте обе половины своего разума в этой викторине по анатомии человека.

Сухожилие состоит из плотной волокнистой соединительной ткани, состоящей в основном из коллагеновых волокон. Первичные коллагеновые волокна, которые состоят из пучков коллагеновых волокон, являются основными единицами сухожилия. Первичные волокна сгруппированы вместе в пучки первичных волокон (подосновы), группы которых образуют пучки вторичных волокон (пучки). Множественные пучки вторичных волокон образуют пучки третичных волокон, группы которых, в свою очередь, образуют жильный узел. Первичные, вторичные и третичные пучки окружены оболочкой из соединительной ткани, известной как эндотенон, которая способствует скольжению пучков друг относительно друга во время движения сухожилий. Эндотенон смежныйс эпитеноном, тонким слоем соединительной ткани, покрывающим сухожилие. Снаружи эпитенона и прилегает к нему рыхлый эластичный слой соединительной ткани, известный как паратенон, который позволяет сухожилию перемещаться по соседним тканям. Сухожилие прикреплено к кости коллагеновыми волокнами (волокнами Шарпея), которые продолжаются в матриксе кости.

Основными типами клеток сухожилий являются веретеновидные теноциты (фиброциты ) и тенобласты (фибробласты ). Теноциты — это зрелые сухожильные клетки, которые находятся по всей структуре сухожилия и обычно прикреплены к коллагеновым волокнам. Тенобласты — это незрелые клетки сухожилия веретенообразной формы, дающие начало теноцитам. Тенобласты обычно образуют скопления, свободные от коллагеновых волокон. Они обладают высокой пролиферацией и участвуют в синтезе коллагена и других компонентов внеклеточного матрикса.

фибробласты

Фазово-контрастная микроскопия фибробластов эмбриона мыши.

Тонкий

По составу сухожилия аналогичны связкам и апоневрозам .

Получите подписку Britannica Premium и получите доступ к эксклюзивному контенту. Подпишитесь сейчас

Функция, анатомия и распространенные травмы

Обзор

Что такое сухожилие?

Сухожилие представляет собой тяж из прочной гибкой ткани, похожий на веревку. Сухожилия соединяют ваши мышцы с костями. Сухожилия позволяют нам двигать конечностями. Они также помогают предотвратить мышечные травмы, поглощая часть нагрузки на мышцы, когда вы бегаете, прыгаете или выполняете другие движения.

В вашем теле тысячи сухожилий. Вы можете найти сухожилия от головы до пальцев ног.Ахиллово сухожилие, которое соединяет икроножную мышцу с пяточной костью, является самым большим сухожилием в вашем теле.

Сухожилия очень устойчивы к разрыву, но не растягиваются. Это означает, что они могут быть легко повреждены при натяжении (растянуты до точечного частичного разрыва волокон веревки), и для их заживления может потребоваться много времени.

Функция

Что делает сухожилие?

Когда вы сокращаете (сжимаете) мышцу, ваше сухожилие тянет прикрепленную кость, заставляя ее двигаться. Сухожилия, по сути, работают как рычаги для перемещения ваших костей, когда ваши мышцы сокращаются и расширяются.

Сухожилия жестче мышц и обладают большой силой. Например, сухожилия сгибателей стопы могут выдерживать вес, в восемь раз превышающий вес вашего тела.

Анатомия

Где твои сухожилия?

Сухожилия расположены по всему телу. Например, сухожилия соединяют ваши мышцы с костями в области локтя, пятки, колена, плеча и запястья.

Насколько велики сухожилия?

Сухожилия имеют разную форму и размер в зависимости от того, к каким мышцам они прикреплены.Более широкие и короткие сухожилия обычно соединяются с мышцами, которые генерируют большую силу. Более тонкие и длинные сухожилия обычно соединяются с мышцами, выполняющими более тонкие движения.

Какова анатомия сухожилия?

Сухожилия в основном состоят из коллагена, одного из самых распространенных белков в организме. Сухожилия также содержат кровеносные сосуды и нервы.

Коллагеновые волокна

гибкие, прочные и устойчивые к повреждениям. Структура сухожилия похожа на оптоволоконный кабель или веревку с небольшими пучками коллагеновых волокон.Это связывание укрепляет сухожилие и делает его сильнее.

Коллагеновые волокна в группе сухожилий на:

  • Первичные пучки волокон (субфасцикулы), самые маленькие пучки.
  • Вторичные пучки волокон (пучки), состоящие из групп субпучков.
  • Третичные (третьи) пучки волокон, содержащие группы пучков, образующих само сухожилие.

Из каких частей состоит сухожилие?

Сухожилие состоит из:

  • Эндотенон: Соединительная ткань, окружающая первичные, вторичные и третичные пучки волокон.Помогает пучкам скользить друг относительно друга внутри сухожилия.
  • Эпитенон: Тонкий слой соединительной ткани, окружающий все сухожилие.
  • Паратенон: Рыхлый слой соединительной ткани, который позволяет сухожилию двигаться относительно эпитенона и других тканей, с которыми соприкасается сухожилие. Находится вне эпитенона.
  • Волокна Шарпея: Коллагеновые волокна, которые прикрепляют сухожилие к кости.
  • Оболочка (синовиальная оболочка): Некоторые сухожилия кисти и стопы имеют оболочку (синовиальную оболочку). Это защитное внешнее покрытие сухожилия. Вырабатывает смазочную жидкость, называемую синовиальной жидкостью, которая помогает сухожилию плавно скользить там, где оно встречается с мышцей и костью.

Каким образом сухожилия соединяют мышцы с костями?

Сухожилия соединяют ваши мышцы с костями в следующих точках:

  • Мышечно-сухожильное соединение (MTJ): Точка, в которой сухожилие прикрепляется к мышце. Обратите внимание, что это частое место травмы.
  • Остеосухожильное соединение (OTJ): Точка, в которой сухожилие прикрепляется к кости.

Волокна Шарпея, входящие в состав сухожилия, проникают в кость. Сухожилия руки и ноги обычно скользят через соединение, называемое отражающим шкивом, которое помогает удерживать его на месте. Маленькие, заполненные жидкостью подушечки, называемые сухожильными сумками (множественное число от bursa), амортизируют сухожилия в местах их соединения с костью.

Условия и расстройства

Какие состояния и расстройства могут повлиять на сухожилия?

Поскольку сухожилия соединяют каждую мышцу вашего тела, широкий спектр травм и заболеваний может вызвать проблемы с сухожилиями. Проблемы с сухожилиями чаще возникают с возрастом. По мере взросления сухожилия становятся тоньше, в них уменьшается кровоток и накапливаются микроскопические повреждения волокон, которые ослабляют сухожилия.

Наиболее часто заболевания, поражающие сухожилия, включают:

Растяжки: Растяжки возникают при разрыве, скручивании или растяжении сухожилия. Растяжения сухожилий часто случаются в руках и ногах.

Тендинит: Тендинит возникает, когда ваши сухожилия воспаляются, обычно из-за повторяющихся действий, чрезмерной нагрузки или старения.Тендинит (также называемый тендинитом) часто возникает в ахилловом сухожилии, локте, бедре, колене, плече или большом пальце. К наиболее распространенным типам тендинита относятся:

  • Тендинит надколенника: Тендинит надколенника возникает при повреждении сухожилия, соединяющего коленную чашечку (надколенник) с большеберцовой костью. Это состояние обычно возникает в результате чрезмерного использования.
  • Тендинит вращательной манжеты плеча: Тендинит вращательной манжеты плеча возникает при воспалении плечевых мышц. Это состояние может быть связано с повторяющимися действиями или травмой.
  • Теннисный локоть (латеральный эпикондилит): Теннисный локоть возникает в результате микроскопического разрыва сухожилий вокруг внешней стороны локтя. Чрезмерное использование мышц предплечья может вызвать теннисный локоть.

Теносиновит: Теносиновит возникает, когда тендинит сочетается с воспалением сухожильного влагалища. Обычно это происходит в руках и ногах. Два распространенных типа:

  • Теносиновит Де Кервена : Теносиновит Де Кервена вызывает отек сухожилий большого пальца.Это может быть результатом чрезмерного использования, повторяющихся захватов или воспалительных состояний, таких как артрит.
  • Спусковой палец или большой палец спусковой крючок: Спусковой крючок или спусковой крючок возникает, когда палец или большой палец застревает в согнутом положении. Воспаленные и раздраженные сухожилия вызывают это состояние.

Другие заболевания сухожилий включают:

  • Повреждения сухожилия двуглавой мышцы: Повреждения сухожилия двуглавой мышцы возникают из-за микроразрывов сухожилия. Они могут возникать в плече или локте из-за повторяющихся движений или травм.
  • Дисфункция сухожилия задней большеберцовой кости: Сухожилие задней большеберцовой кости поддерживает стопу при ходьбе. Он может порваться или воспалиться из-за травмы или чрезмерного использования. Это сухожилие соединяет икроножную мышцу с костями на внутренней стороне стопы.
  • Разрывы вращательной манжеты плеча: Разрывы вращательной манжеты происходят, когда плечевые сухожилия частично или полностью отсоединяются от верхней части плечевой кости (плечевой кости). Эти слезы могут быть вызваны травмой или чрезмерным использованием.
  • Тендиноз: Тендиноз, хроническое заболевание, возникает, когда коллаген в ваших сухожилиях аккумулирует множество разорванных волокон внутри сухожилия, что ослабляет сухожилие и ухудшает структуру сухожилия. Чрезмерное использование сухожилий вызывает тендиноз. Чаще всего это происходит в локте, пятке, колене, плече или запястье.

Какие тесты могут проверить здоровье ваших сухожилий?

Сначала ваш лечащий врач проведет медицинский осмотр. Ключевыми компонентами являются оценка суставов, соединенных сухожилиями, пальпация сухожилий на предмет боли или дефектов, оценка гибкости сухожилий и проверка силы рук. Вас могут попросить пошевелить суставами рядом с поврежденным или воспаленным сухожилием. Вы можете испытывать боль, когда врач двигает или нажимает на сухожилие.Ваше сухожилие также может быть опухшим или теплым. Ваш врач также проверит ваш диапазон движений вокруг области боли. Иногда области вокруг суставов также могут ощущаться скованными или слабыми.

Ваш поставщик медицинских услуг может также использовать тесты, включая:

Как лечат проблемы с сухожилиями?

Медицинские работники лечат проблемы с сухожилиями по-разному, в зависимости от состояния:

  • Растяжения: Отдых, лед, компрессия и подъем (RICE) с последующими упражнениями могут принести облегчение. Штаммы редко нуждаются в хирургическом вмешательстве.
  • Слезы: Отдых, противовоспалительные препараты облегчают дискомфорт по мере заживления разрыва сухожилия. Вам может понадобиться операция, чтобы восстановить слезу.
  • Тендинит: Тендинит может улучшиться при покое, льде или тепле, противовоспалительных препаратах, шинах и физических упражнениях. Состояние иногда требует хирургического вмешательства с последующей физиотерапией.
  • Тендиноз: Врачи могут порекомендовать покой, лед или тепло, корсеты, физические упражнения и физиотерапию.Вам следует избегать противовоспалительных препаратов или инъекций стероидов, которые могут замедлить восстановление коллагена.
  • Теносиновит: Покой, шины и противовоспалительные препараты могут лечить теносиновит, но некоторым людям требуется хирургическое вмешательство.

уход

Как сохранить сухожилия здоровыми?

Чтобы снизить риск заболеваний сухожилий:

  • Кардио-упражнения на баланс, силовые упражнения и упражнения на гибкость: Различные движения тела могут предотвратить перегрузку сухожилий.
  • Прислушивайтесь к своему телу: Успокойтесь, когда вы устали или находитесь в состоянии стресса, это снизит риск получения травм.
  • Прекратите занятие, если возникнет боль: Если вы испытываете боль во время занятия, прекратите его и повторите попытку позже, чтобы увидеть, не возникает ли боль снова.
  • Растяжка после тренировки: Растяжка мышц, когда они становятся более гибкими после тренировки, но не до боли, может помочь предотвратить повреждение сухожилий.
  • Разминка перед тренировкой: Выполнение легких аэробных упражнений или бег на месте перед более интенсивными упражнениями увеличивает скорость кровотока и расслабляет сухожилия.
  • Носите подходящую спортивную обувь: Убедившись, что ваша обувь подходит по размеру и предназначена для того вида спорта, которым вы занимаетесь, вы сможете поддерживать правильное положение тела.
  • Работа в дни отдыха: Планирование регулярных выходных может снизить вероятность чрезмерной нагрузки на сухожилия.

Часто задаваемые вопросы

Когда мне следует позвонить поставщику медицинских услуг по поводу моих сухожилий?

Немедленно обратитесь к врачу, если вы испытываете:

  • Внезапная боль в суставах или мышцах.
  • Боль, которая усиливается.
  • Неспособность поднять или пошевелить частью тела, как обычно.

Без надлежащего лечения продолжительная чрезмерная нагрузка на сухожилия может привести к тендинозу. Если вы заметили постоянный дискомфорт, поговорите с врачом о том, как защитить ваши сухожилия.

Записка из клиники Кливленда

Сухожилия соединяют мышцы с костями. Они позволяют вашим костям двигаться, когда ваши мышцы напрягаются и расслабляются. Условия, которые влияют на ваши сухожилия, включают деформации, тендинит и разрывы, в том числе разрывы вращательной манжеты плеча и травмы сухожилий бицепса.Вы можете помочь сохранить свои сухожилия здоровыми, следя за своими привычками к упражнениям и не доводя себя до боли. Обязательно обратитесь к врачу, если боль не проходит или возвращается.

Функция, анатомия и распространенные травмы

Обзор

Что такое сухожилие?

Сухожилие представляет собой тяж из прочной гибкой ткани, похожий на веревку. Сухожилия соединяют ваши мышцы с костями. Сухожилия позволяют нам двигать конечностями. Они также помогают предотвратить мышечные травмы, поглощая часть нагрузки на мышцы, когда вы бегаете, прыгаете или выполняете другие движения.

В вашем теле тысячи сухожилий. Вы можете найти сухожилия от головы до пальцев ног. Ахиллово сухожилие, которое соединяет икроножную мышцу с пяточной костью, является самым большим сухожилием в вашем теле.

Сухожилия очень устойчивы к разрыву, но не растягиваются. Это означает, что они могут быть легко повреждены при натяжении (растянуты до точечного частичного разрыва волокон веревки), и для их заживления может потребоваться много времени.

Функция

Что делает сухожилие?

Когда вы сокращаете (сжимаете) мышцу, ваше сухожилие тянет прикрепленную кость, заставляя ее двигаться. Сухожилия, по сути, работают как рычаги для перемещения ваших костей, когда ваши мышцы сокращаются и расширяются.

Сухожилия жестче мышц и обладают большой силой. Например, сухожилия сгибателей стопы могут выдерживать вес, в восемь раз превышающий вес вашего тела.

Анатомия

Где твои сухожилия?

Сухожилия расположены по всему телу. Например, сухожилия соединяют ваши мышцы с костями в области локтя, пятки, колена, плеча и запястья.

Насколько велики сухожилия?

Сухожилия имеют разную форму и размер в зависимости от того, к каким мышцам они прикреплены.Более широкие и короткие сухожилия обычно соединяются с мышцами, которые генерируют большую силу. Более тонкие и длинные сухожилия обычно соединяются с мышцами, выполняющими более тонкие движения.

Какова анатомия сухожилия?

Сухожилия в основном состоят из коллагена, одного из самых распространенных белков в организме. Сухожилия также содержат кровеносные сосуды и нервы.

Коллагеновые волокна

гибкие, прочные и устойчивые к повреждениям. Структура сухожилия похожа на оптоволоконный кабель или веревку с небольшими пучками коллагеновых волокон.Это связывание укрепляет сухожилие и делает его сильнее.

Коллагеновые волокна в группе сухожилий на:

  • Первичные пучки волокон (субфасцикулы), самые маленькие пучки.
  • Вторичные пучки волокон (пучки), состоящие из групп субпучков.
  • Третичные (третьи) пучки волокон, содержащие группы пучков, образующих само сухожилие.

Из каких частей состоит сухожилие?

Сухожилие состоит из:

  • Эндотенон: Соединительная ткань, окружающая первичные, вторичные и третичные пучки волокон.Помогает пучкам скользить друг относительно друга внутри сухожилия.
  • Эпитенон: Тонкий слой соединительной ткани, окружающий все сухожилие.
  • Паратенон: Рыхлый слой соединительной ткани, который позволяет сухожилию двигаться относительно эпитенона и других тканей, с которыми соприкасается сухожилие. Находится вне эпитенона.
  • Волокна Шарпея: Коллагеновые волокна, которые прикрепляют сухожилие к кости.
  • Оболочка (синовиальная оболочка): Некоторые сухожилия кисти и стопы имеют оболочку (синовиальную оболочку).Это защитное внешнее покрытие сухожилия. Вырабатывает смазочную жидкость, называемую синовиальной жидкостью, которая помогает сухожилию плавно скользить там, где оно встречается с мышцей и костью.

Каким образом сухожилия соединяют мышцы с костями?

Сухожилия соединяют ваши мышцы с костями в следующих точках:

  • Мышечно-сухожильное соединение (MTJ): Точка, в которой сухожилие прикрепляется к мышце. Обратите внимание, что это частое место травмы.
  • Остеосухожильное соединение (OTJ): Точка, в которой сухожилие прикрепляется к кости.

Волокна Шарпея, входящие в состав сухожилия, проникают в кость. Сухожилия руки и ноги обычно скользят через соединение, называемое отражающим шкивом, которое помогает удерживать его на месте. Маленькие, заполненные жидкостью подушечки, называемые сухожильными сумками (множественное число от bursa), амортизируют сухожилия в местах их соединения с костью.

Условия и расстройства

Какие состояния и расстройства могут повлиять на сухожилия?

Поскольку сухожилия соединяют каждую мышцу вашего тела, широкий спектр травм и заболеваний может вызвать проблемы с сухожилиями.Проблемы с сухожилиями чаще возникают с возрастом. По мере взросления сухожилия становятся тоньше, в них уменьшается кровоток и накапливаются микроскопические повреждения волокон, которые ослабляют сухожилия.

Наиболее часто заболевания, поражающие сухожилия, включают:

Растяжки: Растяжки возникают при разрыве, скручивании или растяжении сухожилия. Растяжения сухожилий часто случаются в руках и ногах.

Тендинит: Тендинит возникает, когда ваши сухожилия воспаляются, обычно из-за повторяющихся действий, чрезмерной нагрузки или старения. Тендинит (также называемый тендинитом) часто возникает в ахилловом сухожилии, локте, бедре, колене, плече или большом пальце. К наиболее распространенным типам тендинита относятся:

  • Тендинит надколенника: Тендинит надколенника возникает при повреждении сухожилия, соединяющего коленную чашечку (надколенник) с большеберцовой костью. Это состояние обычно возникает в результате чрезмерного использования.
  • Тендинит вращательной манжеты плеча: Тендинит вращательной манжеты плеча возникает при воспалении плечевых мышц. Это состояние может быть связано с повторяющимися действиями или травмой.
  • Теннисный локоть (латеральный эпикондилит): Теннисный локоть возникает в результате микроскопического разрыва сухожилий вокруг внешней стороны локтя. Чрезмерное использование мышц предплечья может вызвать теннисный локоть.

Теносиновит: Теносиновит возникает, когда тендинит сочетается с воспалением сухожильного влагалища. Обычно это происходит в руках и ногах. Два распространенных типа:

  • Теносиновит Де Кервена : Теносиновит Де Кервена вызывает отек сухожилий большого пальца.Это может быть результатом чрезмерного использования, повторяющихся захватов или воспалительных состояний, таких как артрит.
  • Спусковой палец или большой палец спусковой крючок: Спусковой крючок или спусковой крючок возникает, когда палец или большой палец застревает в согнутом положении. Воспаленные и раздраженные сухожилия вызывают это состояние.

Другие заболевания сухожилий включают:

  • Повреждения сухожилия двуглавой мышцы: Повреждения сухожилия двуглавой мышцы возникают из-за микроразрывов сухожилия. Они могут возникать в плече или локте из-за повторяющихся движений или травм.
  • Дисфункция сухожилия задней большеберцовой кости: Сухожилие задней большеберцовой кости поддерживает стопу при ходьбе. Он может порваться или воспалиться из-за травмы или чрезмерного использования. Это сухожилие соединяет икроножную мышцу с костями на внутренней стороне стопы.
  • Разрывы вращательной манжеты плеча: Разрывы вращательной манжеты происходят, когда плечевые сухожилия частично или полностью отсоединяются от верхней части плечевой кости (плечевой кости). Эти слезы могут быть вызваны травмой или чрезмерным использованием.
  • Тендиноз: Тендиноз, хроническое заболевание, возникает, когда коллаген в ваших сухожилиях аккумулирует множество разорванных волокон внутри сухожилия, что ослабляет сухожилие и ухудшает структуру сухожилия.Чрезмерное использование сухожилий вызывает тендиноз. Чаще всего это происходит в локте, пятке, колене, плече или запястье.

Какие тесты могут проверить здоровье ваших сухожилий?

Сначала ваш лечащий врач проведет медицинский осмотр. Ключевыми компонентами являются оценка суставов, соединенных сухожилиями, пальпация сухожилий на предмет боли или дефектов, оценка гибкости сухожилий и проверка силы рук. Вас могут попросить пошевелить суставами рядом с поврежденным или воспаленным сухожилием. Вы можете испытывать боль, когда врач двигает или нажимает на сухожилие.Ваше сухожилие также может быть опухшим или теплым. Ваш врач также проверит ваш диапазон движений вокруг области боли. Иногда области вокруг суставов также могут ощущаться скованными или слабыми.

Ваш поставщик медицинских услуг может также использовать тесты, включая:

Как лечат проблемы с сухожилиями?

Медицинские работники лечат проблемы с сухожилиями по-разному, в зависимости от состояния:

  • Растяжения: Отдых, лед, компрессия и подъем (RICE) с последующими упражнениями могут принести облегчение.Штаммы редко нуждаются в хирургическом вмешательстве.
  • Слезы: Отдых, противовоспалительные препараты облегчают дискомфорт по мере заживления разрыва сухожилия. Вам может понадобиться операция, чтобы восстановить слезу.
  • Тендинит: Тендинит может улучшиться при покое, льде или тепле, противовоспалительных препаратах, шинах и физических упражнениях. Состояние иногда требует хирургического вмешательства с последующей физиотерапией.
  • Тендиноз: Врачи могут порекомендовать покой, лед или тепло, корсеты, физические упражнения и физиотерапию.Вам следует избегать противовоспалительных препаратов или инъекций стероидов, которые могут замедлить восстановление коллагена.
  • Теносиновит: Покой, шины и противовоспалительные препараты могут лечить теносиновит, но некоторым людям требуется хирургическое вмешательство.

уход

Как сохранить сухожилия здоровыми?

Чтобы снизить риск заболеваний сухожилий:

  • Кардио-упражнения на баланс, силовые упражнения и упражнения на гибкость: Различные движения тела могут предотвратить перегрузку сухожилий.
  • Прислушивайтесь к своему телу: Успокойтесь, когда вы устали или находитесь в состоянии стресса, это снизит риск получения травм.
  • Прекратите занятие, если возникнет боль: Если вы испытываете боль во время занятия, прекратите его и повторите попытку позже, чтобы увидеть, не возникает ли боль снова.
  • Растяжка после тренировки: Растяжка мышц, когда они становятся более гибкими после тренировки, но не до боли, может помочь предотвратить повреждение сухожилий.
  • Разминка перед тренировкой: Выполнение легких аэробных упражнений или бег на месте перед более интенсивными упражнениями увеличивает скорость кровотока и расслабляет сухожилия.
  • Носите подходящую спортивную обувь: Убедившись, что ваша обувь подходит по размеру и предназначена для того вида спорта, которым вы занимаетесь, вы сможете поддерживать правильное положение тела.
  • Работа в дни отдыха: Планирование регулярных выходных может снизить вероятность чрезмерной нагрузки на сухожилия.

Часто задаваемые вопросы

Когда мне следует позвонить поставщику медицинских услуг по поводу моих сухожилий?

Немедленно обратитесь к врачу, если вы испытываете:

  • Внезапная боль в суставах или мышцах.
  • Боль, которая усиливается.
  • Неспособность поднять или пошевелить частью тела, как обычно.

Без надлежащего лечения продолжительная чрезмерная нагрузка на сухожилия может привести к тендинозу. Если вы заметили постоянный дискомфорт, поговорите с врачом о том, как защитить ваши сухожилия.

Записка из клиники Кливленда

Сухожилия соединяют мышцы с костями. Они позволяют вашим костям двигаться, когда ваши мышцы напрягаются и расслабляются. Условия, которые влияют на ваши сухожилия, включают деформации, тендинит и разрывы, в том числе разрывы вращательной манжеты плеча и травмы сухожилий бицепса.Вы можете помочь сохранить свои сухожилия здоровыми, следя за своими привычками к упражнениям и не доводя себя до боли. Обязательно обратитесь к врачу, если боль не проходит или возвращается.

Функция, анатомия и распространенные травмы

Обзор

Что такое сухожилие?

Сухожилие представляет собой тяж из прочной гибкой ткани, похожий на веревку. Сухожилия соединяют ваши мышцы с костями. Сухожилия позволяют нам двигать конечностями. Они также помогают предотвратить мышечные травмы, поглощая часть нагрузки на мышцы, когда вы бегаете, прыгаете или выполняете другие движения.

В вашем теле тысячи сухожилий. Вы можете найти сухожилия от головы до пальцев ног. Ахиллово сухожилие, которое соединяет икроножную мышцу с пяточной костью, является самым большим сухожилием в вашем теле.

Сухожилия очень устойчивы к разрыву, но не растягиваются. Это означает, что они могут быть легко повреждены при натяжении (растянуты до точечного частичного разрыва волокон веревки), и для их заживления может потребоваться много времени.

Функция

Что делает сухожилие?

Когда вы сокращаете (сжимаете) мышцу, ваше сухожилие тянет прикрепленную кость, заставляя ее двигаться.Сухожилия, по сути, работают как рычаги для перемещения ваших костей, когда ваши мышцы сокращаются и расширяются.

Сухожилия жестче мышц и обладают большой силой. Например, сухожилия сгибателей стопы могут выдерживать вес, в восемь раз превышающий вес вашего тела.

Анатомия

Где твои сухожилия?

Сухожилия расположены по всему телу. Например, сухожилия соединяют ваши мышцы с костями в области локтя, пятки, колена, плеча и запястья.

Насколько велики сухожилия?

Сухожилия имеют разную форму и размер в зависимости от того, к каким мышцам они прикреплены.Более широкие и короткие сухожилия обычно соединяются с мышцами, которые генерируют большую силу. Более тонкие и длинные сухожилия обычно соединяются с мышцами, выполняющими более тонкие движения.

Какова анатомия сухожилия?

Сухожилия в основном состоят из коллагена, одного из самых распространенных белков в организме. Сухожилия также содержат кровеносные сосуды и нервы.

Коллагеновые волокна

гибкие, прочные и устойчивые к повреждениям. Структура сухожилия похожа на оптоволоконный кабель или веревку с небольшими пучками коллагеновых волокон. Это связывание укрепляет сухожилие и делает его сильнее.

Коллагеновые волокна в группе сухожилий на:

  • Первичные пучки волокон (субфасцикулы), самые маленькие пучки.
  • Вторичные пучки волокон (пучки), состоящие из групп субпучков.
  • Третичные (третьи) пучки волокон, содержащие группы пучков, образующих само сухожилие.

Из каких частей состоит сухожилие?

Сухожилие состоит из:

  • Эндотенон: Соединительная ткань, окружающая первичные, вторичные и третичные пучки волокон.Помогает пучкам скользить друг относительно друга внутри сухожилия.
  • Эпитенон: Тонкий слой соединительной ткани, окружающий все сухожилие.
  • Паратенон: Рыхлый слой соединительной ткани, который позволяет сухожилию двигаться относительно эпитенона и других тканей, с которыми соприкасается сухожилие. Находится вне эпитенона.
  • Волокна Шарпея: Коллагеновые волокна, которые прикрепляют сухожилие к кости.
  • Оболочка (синовиальная оболочка): Некоторые сухожилия кисти и стопы имеют оболочку (синовиальную оболочку).Это защитное внешнее покрытие сухожилия. Вырабатывает смазочную жидкость, называемую синовиальной жидкостью, которая помогает сухожилию плавно скользить там, где оно встречается с мышцей и костью.

Каким образом сухожилия соединяют мышцы с костями?

Сухожилия соединяют ваши мышцы с костями в следующих точках:

  • Мышечно-сухожильное соединение (MTJ): Точка, в которой сухожилие прикрепляется к мышце. Обратите внимание, что это частое место травмы.
  • Остеосухожильное соединение (OTJ): Точка, в которой сухожилие прикрепляется к кости.

Волокна Шарпея, входящие в состав сухожилия, проникают в кость. Сухожилия руки и ноги обычно скользят через соединение, называемое отражающим шкивом, которое помогает удерживать его на месте. Маленькие, заполненные жидкостью подушечки, называемые сухожильными сумками (множественное число от bursa), амортизируют сухожилия в местах их соединения с костью.

Условия и расстройства

Какие состояния и расстройства могут повлиять на сухожилия?

Поскольку сухожилия соединяют каждую мышцу вашего тела, широкий спектр травм и заболеваний может вызвать проблемы с сухожилиями.Проблемы с сухожилиями чаще возникают с возрастом. По мере взросления сухожилия становятся тоньше, в них уменьшается кровоток и накапливаются микроскопические повреждения волокон, которые ослабляют сухожилия.

Наиболее часто заболевания, поражающие сухожилия, включают:

Растяжки: Растяжки возникают при разрыве, скручивании или растяжении сухожилия. Растяжения сухожилий часто случаются в руках и ногах.

Тендинит: Тендинит возникает, когда ваши сухожилия воспаляются, обычно из-за повторяющихся действий, чрезмерной нагрузки или старения.Тендинит (также называемый тендинитом) часто возникает в ахилловом сухожилии, локте, бедре, колене, плече или большом пальце. К наиболее распространенным типам тендинита относятся:

  • Тендинит надколенника: Тендинит надколенника возникает при повреждении сухожилия, соединяющего коленную чашечку (надколенник) с большеберцовой костью. Это состояние обычно возникает в результате чрезмерного использования.
  • Тендинит вращательной манжеты плеча: Тендинит вращательной манжеты плеча возникает при воспалении плечевых мышц. Это состояние может быть связано с повторяющимися действиями или травмой.
  • Теннисный локоть (латеральный эпикондилит): Теннисный локоть возникает в результате микроскопического разрыва сухожилий вокруг внешней стороны локтя. Чрезмерное использование мышц предплечья может вызвать теннисный локоть.

Теносиновит: Теносиновит возникает, когда тендинит сочетается с воспалением сухожильного влагалища. Обычно это происходит в руках и ногах. Два распространенных типа:

  • Теносиновит Де Кервена : Теносиновит Де Кервена вызывает отек сухожилий большого пальца.Это может быть результатом чрезмерного использования, повторяющихся захватов или воспалительных состояний, таких как артрит.
  • Спусковой палец или большой палец спусковой крючок: Спусковой крючок или спусковой крючок возникает, когда палец или большой палец застревает в согнутом положении. Воспаленные и раздраженные сухожилия вызывают это состояние.

Другие заболевания сухожилий включают:

  • Повреждения сухожилия двуглавой мышцы: Повреждения сухожилия двуглавой мышцы возникают из-за микроразрывов сухожилия. Они могут возникать в плече или локте из-за повторяющихся движений или травм.
  • Дисфункция сухожилия задней большеберцовой кости: Сухожилие задней большеберцовой кости поддерживает стопу при ходьбе. Он может порваться или воспалиться из-за травмы или чрезмерного использования. Это сухожилие соединяет икроножную мышцу с костями на внутренней стороне стопы.
  • Разрывы вращательной манжеты плеча: Разрывы вращательной манжеты происходят, когда плечевые сухожилия частично или полностью отсоединяются от верхней части плечевой кости (плечевой кости). Эти слезы могут быть вызваны травмой или чрезмерным использованием.
  • Тендиноз: Тендиноз, хроническое заболевание, возникает, когда коллаген в ваших сухожилиях аккумулирует множество разорванных волокон внутри сухожилия, что ослабляет сухожилие и ухудшает структуру сухожилия.Чрезмерное использование сухожилий вызывает тендиноз. Чаще всего это происходит в локте, пятке, колене, плече или запястье.

Какие тесты могут проверить здоровье ваших сухожилий?

Сначала ваш лечащий врач проведет медицинский осмотр. Ключевыми компонентами являются оценка суставов, соединенных сухожилиями, пальпация сухожилий на предмет боли или дефектов, оценка гибкости сухожилий и проверка силы рук. Вас могут попросить пошевелить суставами рядом с поврежденным или воспаленным сухожилием. Вы можете испытывать боль, когда врач двигает или нажимает на сухожилие.Ваше сухожилие также может быть опухшим или теплым. Ваш врач также проверит ваш диапазон движений вокруг области боли. Иногда области вокруг суставов также могут ощущаться скованными или слабыми.

Ваш поставщик медицинских услуг может также использовать тесты, включая:

Как лечат проблемы с сухожилиями?

Медицинские работники лечат проблемы с сухожилиями по-разному, в зависимости от состояния:

  • Растяжения: Отдых, лед, компрессия и подъем (RICE) с последующими упражнениями могут принести облегчение.Штаммы редко нуждаются в хирургическом вмешательстве.
  • Слезы: Отдых, противовоспалительные препараты облегчают дискомфорт по мере заживления разрыва сухожилия. Вам может понадобиться операция, чтобы восстановить слезу.
  • Тендинит: Тендинит может улучшиться при покое, льде или тепле, противовоспалительных препаратах, шинах и физических упражнениях. Состояние иногда требует хирургического вмешательства с последующей физиотерапией.
  • Тендиноз: Врачи могут порекомендовать покой, лед или тепло, корсеты, физические упражнения и физиотерапию. Вам следует избегать противовоспалительных препаратов или инъекций стероидов, которые могут замедлить восстановление коллагена.
  • Теносиновит: Покой, шины и противовоспалительные препараты могут лечить теносиновит, но некоторым людям требуется хирургическое вмешательство.

уход

Как сохранить сухожилия здоровыми?

Чтобы снизить риск заболеваний сухожилий:

  • Кардио-упражнения на баланс, силовые упражнения и упражнения на гибкость: Различные движения тела могут предотвратить перегрузку сухожилий.
  • Прислушивайтесь к своему телу: Успокойтесь, когда вы устали или находитесь в состоянии стресса, это снизит риск получения травм.
  • Прекратите занятие, если возникнет боль: Если вы испытываете боль во время занятия, прекратите его и повторите попытку позже, чтобы увидеть, не возникает ли боль снова.
  • Растяжка после тренировки: Растяжка мышц, когда они становятся более гибкими после тренировки, но не до боли, может помочь предотвратить повреждение сухожилий.
  • Разминка перед тренировкой: Выполнение легких аэробных упражнений или бег на месте перед более интенсивными упражнениями увеличивает скорость кровотока и расслабляет сухожилия.
  • Носите подходящую спортивную обувь: Убедившись, что ваша обувь подходит по размеру и предназначена для того вида спорта, которым вы занимаетесь, вы сможете поддерживать правильное положение тела.
  • Работа в дни отдыха: Планирование регулярных выходных может снизить вероятность чрезмерной нагрузки на сухожилия.

Часто задаваемые вопросы

Когда мне следует позвонить поставщику медицинских услуг по поводу моих сухожилий?

Немедленно обратитесь к врачу, если вы испытываете:

  • Внезапная боль в суставах или мышцах.
  • Боль, которая усиливается.
  • Неспособность поднять или пошевелить частью тела, как обычно.

Без надлежащего лечения продолжительная чрезмерная нагрузка на сухожилия может привести к тендинозу. Если вы заметили постоянный дискомфорт, поговорите с врачом о том, как защитить ваши сухожилия.

Записка из клиники Кливленда

Сухожилия соединяют мышцы с костями. Они позволяют вашим костям двигаться, когда ваши мышцы напрягаются и расслабляются. Условия, которые влияют на ваши сухожилия, включают деформации, тендинит и разрывы, в том числе разрывы вращательной манжеты плеча и травмы сухожилий бицепса.Вы можете помочь сохранить свои сухожилия здоровыми, следя за своими привычками к упражнениям и не доводя себя до боли. Обязательно обратитесь к врачу, если боль не проходит или возвращается.

СТРУКТУРА И ФУНКЦИЯ СУХОЖИЛЬЯ МЛЕКОПИТАЮЩИХ — ELLIOTT — 1965 — Biological Reviews

1. Сухожилия представляют собой особую форму соединительной ткани, объединяющую мышцы и кости, и поэтому выполняют функции, необходимые для нормальной подвижности.

2.Структурной единицей сухожилия является волокно диаметром до 300 мкм , состоящее из фибрилл коллагена, окруженных анастомозирующими отростками фибробластов. Волокна расположены пучками, но могут переходить из одного в другой, так что последовательные поперечные срезы выглядят немного по-разному. Такое переплетение обеспечивает равномерное распределение мышечного напряжения по всей площади прикрепления, особенно там, где движение сустава изменяет угол между сухожилием и костью.

3.Существуют две гипотезы относительно природы мышечно-сухожильного соединения. Во-первых, напряжение, возникающее в мышечном волокне, может передаваться спиральным перисарколеммальным волокнам соединительной ткани, окружающим его длину, а оттуда — в сухожилие, а во-вторых, что более вероятно, напряжение может передаваться непосредственно от конца миофибриллы к мышечному волокну. межпальцевые волокна сухожилия. Взаимозависимость мышц и сухожилий дополнительно иллюстрируется их продольным ростом, поскольку изменение длины мышечного брюшка по отношению к расстоянию между прикреплениями костей определяет скорость роста и относительную длину сухожилия.

4. Ориентация фиброзной ткани в сухожилии подтверждает гипотезу о механическом влиянии на рост сухожилия, но строгой зависимости между силой мышцы и толщиной сухожилия нет, и разные мышцы различаются по соотношению общей площади поперечного сечения пучка к толщина сухожилия. Похоже, что эта разница развивается после рождения, и, поскольку красная постуральная мышца имеет относительно толстое сухожилие, было высказано предположение, что продолжительность, а также уровень передаваемого напряжения могут влиять на рост коллагена.

5. Толщина сухожилия может увеличиваться пропорционально площади поперечного сечения мышцы в условиях, вызывающих гипертрофию мышцы, но когда мышца денервируется или вырезается у молодых животных, увеличение толщины сухожилия происходит таким образом, что можно предположить, что рост коллагена определяется историей общего передаваемого напряжения.

6. Прочность сухожилия на растяжение, вероятно, в четыре раза выше, чем максимальное напряжение, которое оно должно передать in vivo , и еще больший запас прочности присутствует в пенниформных мышцах, которые передают меньшее максимальное изометрическое тетаническое напряжение на единицу площадь поперечного сечения пучка больше, чем у веретенообразных мышц. Хотя форма волны, наблюдаемая на поверхности сухожилия в состоянии покоя, устраняется менее чем на 10 % от максимального напряжения, которое способна передать его мышца, вполне возможно, что нормальный диапазон передаваемых напряжений in vivo может находиться в пределах та часть кривой напряжения-деформации, где сухожилие еще легко растяжимо.

Структурно-функциональная взаимосвязь сухожилий при здоровье, старении и травмах

Сухожилия соединяют мышечные волокна со скелетом.Таким образом, одной из их основных функций является передача усилия мышечных волокон на кости и выполнение движений тела. Кроме того, сухожилия могут накапливать и высвобождать энергию во время движения, способствуя экономии движений. Наша опорно-двигательная система содержит несколько…

Сухожилия соединяют мышечные волокна со скелетом. Таким образом, одной из их основных функций является передача усилия мышечных волокон на кости и выполнение движений тела. Кроме того, сухожилия могут накапливать и высвобождать энергию во время движения, способствуя экономии движений. Наша опорно-двигательная система состоит из нескольких групп мышц, в которых разные мышцы имеют общее сухожилие. Одними из самых известных являются четырехглавая мышца, имеющая общее сухожилие надколенника, и трехглавая мышца голени, имеющая общее ахиллово сухожилие. Строение и механические свойства этих сухожилий широко изучались, рассматривая их как единое целое. Однако эти общие сухожилия состоят из нескольких подсухожилий с неколлагеновой матрицей между ними.

Сухожилия адаптируются к изменениям механической нагрузки, например, в ответ на физическую нагрузку. Структура и состав сухожилий, включая матрикс, также изменяются с возрастом. Последнее может быть причиной повышенного риска травм у пожилых людей. Кроме того, сухожилия часто повреждаются не только у пожилых людей, но и у молодых людей. Таким образом, улучшение нашего понимания взаимосвязи между структурой и (дис)функцией сухожилия в норме и при болезни, а также после физических упражнений и при старении важно для разработки эффективных стратегий профилактики и лечения травм. Структура, состав и механические свойства сухожилий широко изучались, но часто без учета сложной структуры общих сухожилий.

Таким образом, данная тема исследования представляет интерес для исследований, изучающих:

(i) Структуру и состав подсухожилий и неколлагенового матрикса
(ii) Взаимосвязь между структурой сухожилий и механическими свойствами
(iii) Неравномерное поведение подсухожилий во время выполнения различных двигательных задач
(iv) Адаптация вследствие травмы сухожилия, физической активности и старения

Ключевые слова : Сухожилие, скелетная мышца, ремоделирование, биомеханика, внеклеточный матрикс

Важное примечание : Все вклады в эту тему исследования должны быть в рамках раздела и журнала, в который они представлены, как это определено в их заявлениях о миссии.Frontiers оставляет за собой право направить рукопись, выходящую за рамки рассмотрения, в более подходящий раздел или журнал на любом этапе рецензирования.

Нарушение функции сухожильных стволовых клеток при экспериментальном сахарном диабете сухожилий крыс: влияние на клеточный механизм диабетического поражения сухожилий | Исследование стволовых клеток и терапия

Дизайн исследования

42 крысы SD (самки, 200–250 г, 8 недель) были случайным образом разделены на две группы: контрольная группа (CG, n  = 21), группа DM (DG, n  = 21).Через 1, 2 и 4 недели после индукции по 6 крыс из каждой группы умерщвляли и немедленно выделяли сухожилия надколенника для гистологического анализа. На 2 неделе 3 крысы из обеих групп были умерщвлены для выделения и анализа TDSC. Все эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Медицинской школы Юго-восточного университета (дополнительный файл 1).

Индукция СД

Метод индукции модели СД у крыс с помощью стрептозотоцина (СТЗ; Sigma, Сент-Луис, Миссури) хорошо зарекомендовал себя [12, 18]. Вкратце, крыс индуцировали СД путем внутрибрюшинной инъекции СТЗ-цитратного буферного раствора (65 мг/кг), в то время как крысы CG получали только цитратный буфер. Все крысы голодали в течение 8 часов и подвергались внутрибрюшинному тесту на толерантность к глюкозе (IPGTT) до и на 3-й день после инъекции. Устойчивый фенотип СД рассматривается как постоянно поддерживаемый уровень глюкозы (ГК) в крови, равный или превышающий 250 мг/дл. Уровни ГК у всех крыс измеряли каждые 2 дня с помощью глюкометра (АККУ-ЧЕК® Перформа).

Гистологический анализ сухожилий надколенника

Общая гистология и иммуногистохимия

Через 1, 2 и 4 недели после индукции сухожилия надколенника выделяли сразу после эвтаназии и фиксировали в 4% параформальдегиде в течение 24 часов. Сухожилия обезвоживали градиентным спиртом, заливали в парафин и разрезали продольно на срезы толщиной 4 мкм. После депарафинирования и гидратации препараты окрашивали гематоксилином и эозином (H&E). Иммуногистохимическое (ИГХ) окрашивание проводили, как описано ранее [17, 19]; вкратце, первичные антитела против коллагена типа I (Col I, Abcam, Кембридж, США; ab34710; 1:100), теномодулин (TNMD, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA; sc-98875; 1:100), остеопонтин (OPN, Abcam, Кембридж, США; ab8448; 1:100), остеокальцин (OCN, Abcam, Кембридж, США; ab13421; 1:100), SOX9 (Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния; sc-20095; 1: 30) и коллаген II типа (Col II, Abcam, Кембридж, США; ab34712; 1:100). Козлиные антикроличьи (Abcam, Кембридж, США; ab6721; 1:200) и козьи антимышиные IgG, конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP), вторичные антитела (Abcam, Кембридж, США; ab6789; 1:200) использовали в соответствии с первичные антитела затем хлорируют 3,3′-диаминобензидином (DAKO, Glostrup, Дания). В контроле первичное антитело заменяли блокирующим раствором. Слайды анализировали под световым микроскопом (Leica Cambridge, Кембридж, Великобритания), полуколичественный анализ окрашивания IHC выполняли с помощью программного обеспечения Image-Pro Plus (MediaCybernetics, Bethesda, MD, USA), и оценщики не знали образца. группировка.

Выделение и культивирование TDSCs

Процедуры выделения и культивирования TDSCs были описаны ранее [17]. Вкратце, среднее вещество сухожилия надколенника расщепляли коллагеназой I типа (3  мг/мл, Sigma-Aldrich). Клетки культивировали в полной культуральной среде, которая содержала модифицированную Дульбекко среду Игла (Gibco) с низким содержанием глюкозы, 10% эмбриональную бычью сыворотку, 100 ЕД/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 2 мМ л-глутамина (все от Invitrogen). Corporation, Карлсбад, Калифорния).Во всех экспериментах использовали ранние пассажи (от P3 до P5) как здоровых TDSC (hTDSC), так и диабетических TDSC (dTDSC).

Анализ проточной цитометрии

Для анализа проточной цитометрии использовались как hTDSC, так и dTDSC на P3. 1 × 10 6 клеток каждой группы инкубировали с 1 мг моноклональных антител, конъюгированных с фикоэритрином или флуоресцеин-изотиоцианатом (R&D Systems), при 4 °C в течение 1 часа. Анти-CD34 (sc-7324; Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния), анти-CD31 (ab33858; Abcam, Кембридж, Великобритания), анти-CD44 (BD550974; BD Bioscience), анти-CD45 (BD559135; BD Bioscience) , и анти-CD90 (BD554898; BD Bioscience) были антителами, используемыми в этом исследовании.Конъюгированные с фикоэритрином или конъюгированные с флуоресцеином-изотиоцианатом IgG1 соответствующего изотипа использовали в качестве отрицательного контроля (IC002P или IC002F; R&D Systems). Окрашенные клетки промывали ледяным PBS, содержащим 2% BSA, перед анализом с использованием проточного цитометра LSRFortessa (Becton Dickinson, Сан-Хосе, Калифорния). Для каждого образца было подсчитано около 1 × 10 4 событий. Процент клеток с положительным сигналом рассчитывали с использованием программы WinMDI Version 2.9 (The Scripps Research Institute, La Jolla, CA).

Анализ колониеобразующей способности и анализ клеточной пролиферации

Для анализа колониеобразующей способности (CFA) [20] как hTDSC, так и dTDSC на P3 высевали при оптимальной плотности клеток (1000 ядерных клеток) на 20 см 2 чашках и культивируют в течение 7–9 дней для образования колоний. Количество колоний клеток подсчитывали после окрашивания 0,5% кристаллическим фиолетовым (Sigma, Сент-Луис, Миссури). общее количество колоний обеих групп было зарегистрировано после игнорирования колоний диаметром менее 2 мм и слабо окрашенных.

Для анализа клеточной пролиферации клетки P3 обеих групп высевали на 96-луночный планшет (4000 клеток/лунку). После инкубации в течение 24, 48, 72 и 96 часов клетки обрабатывали раствором метилтиазолилтетразолия (МТТ) (0,5 мг/мл) в течение 4 часов, затем растворяли в диметилсульфоксиде и встряхивали в течение 10 минут. Поглощение измеряли при 570 нм с помощью считывающего устройства для микропланшетов.

Потенциал остеохондрогенной дифференцировки hTDSC и dTDSC

Анализ остеогенной дифференцировки

Методы индукции мультидифференцировки TDSC описаны в предыдущих исследованиях [17, 20].Для анализа дифференцировки остеогенеза два вида TDSC высевали при 4 × 10 3 клеток/см 2 в 6-луночный планшет и культивировали в полной культуральной среде до тех пор, пока клетки не достигали 80-90% слияния, а затем инкубировали в обеих средах. базальную среду и среду для индукции остеогенеза (OIM), которая представляла собой полную культуральную среду с добавлением 20 мМ β-глицеринфосфата, 50 мМ аскорбиновой кислоты и 1 нМ дексаметазона (все от Sigma-Aldrich) в течение 7 дней. Было проведено окрашивание щелочной фосфатазой (ALP) и экспрессия мРНК ALP, костного морфогенетического белка 2 (BMP2), OPN и OCN с помощью количественного анализа полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени (qRT-PCR). Окрашивание ализариновым красным (ARS) проводили после основной среды и инкубации OIM в течение 14 дней для оценки образования кальциевых узелков.

Анализ хондрогенной дифференцировки

Систему культивирования осадка использовали для анализа хондрогенной дифференцировки. Клетки 8 × 10 5 (P3) использовали для формирования осадка в конической полипропиленовой пробирке объемом 15 мл путем центрифугирования при 450 g в течение 10 мин и культивировали как в основной среде, так и в среде для индукции хондрогенеза (CIM), которая содержала низкое — глюкоза Среда Игла, модифицированная Дульбекко (Gibco, Invitrogen Corporation) с добавлением 500 нг/мл BMP-2 (R&D Systems, Inc.), 10 нг/мл трансформирующего фактора роста-β3 (R&D), 50 мг/мл аскорбат-2-фосфата, 10 −7  М дексаметазона, 40 мг/мл пролина, 100 мг/мл пирувата (все от Sigma-Aldrich ) и разведенный 1:100 ИТС + премикс (6,25 мг/мл инсулина, 6,25 мг/мл селенистой кислоты, 6,25 мг/мл трансферрина, 5,35 мг/мл линолевой кислоты, 1,25 мг/мл бычьего сывороточного альбумина) (Becton Dickinson, Franklin Лейкс, Нью-Джерси) при 37 °C, 5% CO 2 . На 28-й день осадки либо фиксировали для гистологического анализа (H&E и Safranin O (SO)) и окрашивания IHC (SOX9 и Col II), либо экстрагировали тотальную РНК для экспрессии мРНК, как описано ниже.

Экспрессия мРНК теногенных маркеров

Как hTDSC, так и dTDSC на P3 высевали при 1 × 10 4 клеток/см 2 в 6-луночном планшете в полной культуральной среде при 37 °C, 5% CO 2 . На 7-й день клетки собирали и экспрессию мРНК теногенных маркеров, включая Col I, scleraxis (Scx) и TNMD, исследовали с помощью qRT-PCR, как описано ниже.

qRT-PCR assay

qRT-PCR проводили, как описано ранее [21]. Вкратце, клетки собирали и гомогенизировали для выделения РНК с помощью мини-набора RNeasy (Qiagen GmbH, Hilden, Germany).Затем мРНК обратно транскрибировали в кДНК с помощью набора кДНК First-Strand (Promega, Madison, WI). Условия для ПЦР оптимизировали на обычном приборе для ПЦР (GeneAmp 9700; Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния) для праймеров, специфичных для GAPDH, BMP2, OPN, OCN, Col II и SOX9, как показано в таблице 1, при различных температурах отжига. (Таблица 1). Условия циклирования были следующими: денатурация при 95 °С в течение 10 мин, 45 циклов при 95 °С в течение 20 с, оптимальная температура отжига в течение 30 с, 72 °С в течение 30 с и, наконец, при 60–95 °С с подогревом. скорость 0.1 °C/с. Результаты анализировали с использованием системы ABI StepOne Plus (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния). Экспрессию целевого гена нормализовали по гену GAPDH. Относительную экспрессию генов рассчитывали по формуле 2 -ΔΔCT .

Таблица 1. Последовательности праймеров и условия для qRT-PCR
Статистический анализ

Данные представлены в виде гистограммы и представлены как среднее ± стандартное отклонение. Испытание Манна-Уитни U проводили с использованием SPSS (SPSS, Inc., Чикаго, Иллинойс; версия 16.0). p  < 0,050 считали статистически значимым.

Трансплантация теноцитов, полученных из иПС-клеток, способствует восстановлению моторной функции после разрыва ахиллова сухожилия

Дифференциация теноцитов из иПСК

Линия иПС-клеток человека 1231A3 35 была создана в Центре исследований и применения иПС-клеток Киотского университета. iPS-клетки содержали в условиях отсутствия фидера и ксенона. Вкратце, клетки культивировали на iMartix-511 (Nippi, Токио, Япония) (0.Чашки, покрытые 5  мкг/см 2 ), со средой AK03 (Аджиномото, Токио, Япония) и пассированы путем диссоциации на отдельные клетки с использованием аккутазы (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США). За три дня до индукции теноцитов иПСК высевали на покрытые iMartix-511 чашки (1,1 × 10 3 клеток/см 2 ) и культивировали в среде AK03. Через три дня иПСК дифференцировали в PSM в среде AK03 с добавлением 10 мкМ SB431542 (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), 10 мкМ CHIR99021 (Вако, Осака, Япония), 2 мкМ DMh2 (Tocris, Бристоль, Великобритания). ) и 20 нг/мл FGF2 (Wako) в течение четырех дней 13,14 .Для дифференцировки сомитов четырехдневные пресомитные мезодермальные клетки повторно высевали на чашки, покрытые iMartix-511 (1,8 × 10 4 клеток/см 2 ) и культивировали в среде AK03 с добавлением 10 мкМ SB431542 и 5 мкМ CHIR99021 в течение четырех дней. 13,14 . На 8-й день сомиты культивировали в среде AK03, содержащей 100 нМ SAG (Calbiochem, Ла-Хойя, Калифорния, США) и 0,6 мкМ LDN193189 (Stemgent, Кембридж, Массачусетс, США) для дифференцировки склеротомов 13,14,36 . Клетки одиннадцатидневного склеротома отделяли от чашки с помощью Accutase и высевали на чашки, покрытые iMatrix-511 (1.8 × 10 4 клеток/см 2 ), а затем дифференцировались в сторону синдетома в среде AK03 с добавлением 10 нг/мл FGF8 (Peprotech, Rocky Hill, NJ, США) и 10 нг/мл TGFβ3 (R&D Systems, Миннеаполис). , Миннесота, США) в течение первых двух дней и в среде AK03 с добавлением 10 нг/мл TGFβ3 и 10 нг/мл BMP7 (R&D Systems) в течение следующих шести дней.

Первичные теноциты и МСК человека

Первичные теноциты человека и МСК человека из СККМ были приобретены у Angio-Proteomie (Бостон, Массачусетс, США) и PromoCell (Гейдельберг, Германия) и культивированы в среде для роста клеток сухожилий (Angio Proteomie) и мезенхимальной Среда для роста стволовых клеток (PromoCell) соответственно.

Анализ RT-qPCR

Тотальную РНК выделяли с использованием набора RNeasy (Qiagen, Hilden, Germany), а геномную ДНК удаляли с помощью набора DNase-one (Qiagen). RT проводили с использованием 1  мкг тотальной РНК и обратной транскриптазы Superscript III (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США) в соответствии с инструкциями производителя. КПЦР проводили с использованием Thunderbird SYBR qPCR Mix (Toyobo, Осака, Япония) в системе ПЦР в реальном времени QuantStudio12K Flex (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния, США) или системе ПЦР в реальном времени StepOne (Applied Biosystems).Последовательности праймеров перечислены в дополнительной таблице S1.

Иммуноцитохимия, иммуногистохимия, гистологический анализ и окрашивание EdU

Для иммуноцитохимии культивированные клетки фиксировали 2% параформальдегидом при 4 °C в течение 10 мин, дважды промывали PBS и инкубировали с 0,2% Tween-20 (Sigma) в PBS при 4 ° C в течение 15 минут для обработки проникновением. Затем клетки обрабатывали Blocking One (Nacalai Tesque, Киото, Япония) при 4°С в течение 1 ч и инкубировали с первичными антителами при 4°С в течение ночи. Далее клетки несколько раз промывали 0,2% раствором Tween-20/PBS и инкубировали со вторичными антителами при комнатной температуре в течение 1 часа. Для контрастного окрашивания ядер использовали DAPI (1:5000; Sigma). Первичные и вторичные антитела перечислены в дополнительной таблице S2. Иммуногистохимию и гистологический анализ тканей животных проводили в Центре анатомических, патологоанатомических и судебно-медицинских исследований Высшей школы медицины Киотского университета. Окрашенные образцы наблюдали и анализировали под флуоресцентным микроскопом (BZ-X700; Keyence, Осака, Япония).Плотность и расположение регенерированных сухожильных волокон анализировали с помощью программного обеспечения Image J. Окрашивание EdU проводили с помощью набора для окрашивания EdU (ab219801, Abcam, Кембридж, Массачусетс, США) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, иПСК-теноциты фиксировали, а затем пермеабилизировали перед окрашиванием. Добавляли реакционную смесь, содержащую флуоресцентно меченный EdU, и клетки инкубировали в течение 30 мин.

Секвенирование одноклеточной РНК

Диссоциированные иПС-клетки человека или дифференцированные клетки ресуспендировали с 1 мл 0.04% БСА в PBS. Каждую суспензию отдельных клеток, содержащую приблизительно 2,0 × 10 3 клеток со смесью ферментов, гелевыми шариками и маслами, загружали на хромовые чипы 10× Genomics для получения гелевых шариков в эмульсии. Затем проводили амплификацию в реальном времени и кДНК в соответствии с инструкциями производителя наборов реагентов для одноклеточных 3′ v3 (10x Genomics, Плезантон, Калифорния, США). Библиотеки кДНК секвенировали на платформе HiSeq 2500 (Illumina, Сан-Диего, Калифорния, США). Прочтения последовательности, полученные из каждого образца, были подтверждены каждым штрих-кодом и сопоставлены с эталоном генома человека GRCh48 с использованием программного обеспечения CellRanger v3.1.0. Необработанные данные матриц подсчета, показывающие экспрессию генов в клетках, полученные для каждого условия культивирования, рассчитанные CellRanger, были объединены с использованием пакетов Seurat v3. 1.1 R на R v3.6.1. Были отфильтрованы уникальные молекулярные индексы, указывающие на <250 генов, <10 000 прочтений или >25% митохондриальных транскриптов. Впоследствии объединенные данные подсчета были нормализованы и подвергнуты анализу основных компонентов (PC). Двадцать ПК использовались для UMAP для визуализации взаимосвязи между клетками и кластерного анализа.Показатели клеточного цикла каждой клетки были присвоены со ссылкой на список генов, связанных с клеточным циклом, в предыдущем отчете 54 . Интеллектуальный анализ данных для генов, специфичных для типа клеток, и дифференциально экспрессируемых генов среди двух групп проводился в соответствии с виньетками Сёра (https://satijalab.org/seurat/vignettes.html).

Трансплантация иПСК-теноцитов и инъекция IGF1 и TGFβ3 после разрыва ахиллова сухожилия

Восьминедельных самцов крыс F344/Nslc приобретали в Shimizu Laboratory Supplies (Киото, Япония) и акклиматизировали в течение нескольких дней.Крысы были случайным образом разделены на восемь групп лечения: группа иПСК-теноцитов, группа склеротомов, полученных из иПСК, группа СККМ, необработанная группа (надрезанные, но не трансплантированные), неповрежденная группа (не надрезанные и не трансплантированные), группа инъекции IGF1, группа инъекции TGFβ3 и группа инъекций PBS. Крысам массой 130–170 г анестезировали 3% изофлураном (Pfizer Japan, Токио, Япония) в наркозной камере, а затем внутрибрюшинно вводили 0,375 мг/кг гидрохлорида медетомидина (Nippon Zenyaku Kogyo, Фукусима, Япония), 2 мг/кг. кг мидазолама (Sandoz, Токио, Япония) и 2.5 мг/кг тартрата буторфанола (Meiji Seika Pharma, Токио, Япония) смешанный анестетик. Для повреждения левого ахиллова сухожилия хирургическим лезвием был сделан полный поперечный разрез на расстоянии 5  мм от пяточной кости над ахилловым сухожилием, и кожа была ушита нейлоновой мононитью 5-0. Сразу после операции 50 мкл DMEM/F12 (Gibco, Grand Island, NY, USA), разбавленного Matrigel (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) (v/v = 1:1), содержащего 3 × 10 6 иПСК-теноцитов, склеротомов или СККМ вводили в поврежденный участок с помощью шприца 0.шприц 5 мл. В контрольном эксперименте тем же способом вводили 50 мкл DMEM/F12, разбавленного матригелем (об/об = 1:1) без клеток. На рис. 6f и дополнительном рис. 4e-h 10 мкг IGF1, разбавленных в 50 мкл PBS/матригеля (1:1), или 10 нг TGFβ3 в 50 мкл PBS/матригеля (1:1) или 50 мкл PBS/матригеля ( 1:1) вводили тем же способом в 0-й день: вскоре после операции, в 1-й, 2-й, 8-й и 12-й дни. Вскоре после операции крыс помещали в несущий ортез для подвешивания за хвост на 1 недели, а регенерацию сухожилий оценивали с помощью кинематического тестирования, биомеханического тестирования и гистологического тестирования через 1, 2, 3 и 4 недели после операции.

Расчет AFI

Бумажная лента была помещена в нижней части прогулочной аллеи, которая была с двух сторон огорожена пластиковыми пластинами, с затемненной рамкой в ​​конце, как сообщалось 55 . С помощью кисточки мазали подошву крысы чернилами, а затем помещали животное у входа в аллею. Крыса оставила следы, когда прошла прямо через переулок в затемненный ящик. Для каждой крысы случайным образом отбирали три пары разборчивых следов и измеряли три параметра: длина следа (PL): длина от конца пятки до кончика третьего пальца; разброс пальцев (TS): расстояние от первого до пятого пальца; средний разброс пальцев (IT): расстояние от второго до четвертого пальца.AFI рассчитывали по следующей формуле (1) 40 :

$${{{{{\rm{AFI}}}}}}}=74[({{{{{\rm{NPL}}} }}}-{{{{{\rm{EPL}}}}}})/{{{{{\rm{EPL}}}}}}]+161[({{{{{\rm{ETS }}}}}}-{{{{{\rm{NTS}}}}}}})/{{{{{\rm{NTS}}}}}}}]+48[({{{{{\ rm{EIT}}}}}}-{{{{{\rm{NIT}}}}}}})/{{{{{\rm{NIT}}}}}}}]-5$$

(1)

, где E — экспериментальная сторона (левая нога), а N — нормальная сторона (неповрежденная правая нога). Значение 0 указывает на нормальную функцию, а отрицательное значение указывает на нарушение.

Кинематическое тестирование

Как описано ранее 55 , крыс анестезировали 3% изофлураном в наркозной камере, и к трем ориентирам на выбритой коже, включая коленный сустав, пяточную кость и пятая плюсневая. Затем крыс помещали на беговую дорожку (12  м/мин) с трехмерным (3D) устройством захвата движения (KinemaTracer; Kissei Comtec, Нагано, Япония) и регистрировали не менее 10 последовательных шагов для каждой крысы с использованием камера.С помощью встроенного программного обеспечения (Kissei Comtec) были построены 3D-кинематические модели на основе трассирующих маркеров для измерения двух параметров: высоты пятки при контакте со стопой: расстояния по вертикали от пятой плюсневой кости до пяточной кости и угла голеностопного сустава при контакте со стопой: угол, образованный линией, соединяющей коленный сустав с пяточной костью, и линией, соединяющей пяточную кость с пятой плюсневой костью. Положительный угол указывает на дорсальное сгибание, а отрицательный угол указывает на подошвенное сгибание.

Биомеханическое тестирование

Регенерированные ахилловы сухожилия, которые прикрепляют икроножную мышцу к пяточной кости, собирали через 2 и 4 недели.Сегменты мышц замораживали в жидком азоте. Мышечно-сухожильные и костные блоки закрепляли в зажимном устройстве и устанавливали на машину для механических испытаний (Autograph AG-X; Shimadzu, Киото, Япония). Блоки тянули с обеих сторон с постоянной скоростью (200 мм/мин) до разрушения, и измеряли предельную разрушающую нагрузку (Н). Все регенерированные сухожилия, использованные в тесте, порвались в средней части тела.

Визуализация in vivo

иПСК-теноциты инкубировали с 320 мкг/мл XenoLight 1,1′-диоктадецилтетраметилиндотрикарбоцианин йодида (DiR; PerkinElmer, Хопкинтон, Массачусетс, США) в течение 30 минут для оценки приживления донорских клеток.Для визуализации флуоресценции DiR in vivo крыс анестезировали в камере с 3,0% изофлураном после бритья, чтобы избежать рассеяния света, а затем помещали в систему визуализации IVIS SpectrumCT In Vivo (PerkinElmer). Биораспределение DiR-меченых иПСК-теноцитов отслеживали через 24 ч, 2 недели и 4 недели после трансплантации, а полученные данные анализировали с помощью программного обеспечения Living Image 4.5 (PerkinElmer).

Ультрафильтрация супернатанта иПСК-теноцитов

Супернатанты культур иПСК-теноцитов собирали и подвергали ультрафильтрации с использованием центрифужных фильтров (Merck Millipore, Burlington, MA, USA) для концентрирования супернатантных белков с номинальным пределом молекулярной массы мембраны 10 кДа.Собирали концентрированные белки и протоки. Концентрацию белка оценивали с помощью анализа BCA с использованием реагентов для анализа белка Pierce BCA (Thermo Fisher Scientific).

Подготовка проб для МС-анализа

Супернатанты культур иПСК-теноцитов и СККМ были заменены PBS за три дня до подготовки проб. К собранному PBS добавляли равный объем лизирующего буфера (24 мМ SDC, 24 мМ SLS, 200 мМ Tris-HCl (pH 9,0), 2% ингибитора фосфатазы и 2% ингибитора протеазы). После обработки образцов при 95 °C в течение 5 мин образцы подвергали восстановлению, алкилированию, расщеплению Lys-C/трипсином (соотношение ферментов: 1/100) и обессоливанию 56 . Полученные пептиды метили изобарическими метками для относительного и абсолютного количественного определения (iTRAQ, Sciex, Framingham, MA, USA). Вкратце, 120 мкг образцов обессоленного пептида сушили и растворяли в 10 мкл 500 мМ бикарбоната триэтиламмония. Приблизительно 20 мкл реагентов iTRAQ (набор Multiplex, Sciex) добавляли к 23 мкл этанола и смешивали с образцом пептида.После инкубации при комнатной температуре в течение 1,5 ч добавляли 16 мкл 10% ТФУ и 400 мкл загрузочного буфера (0,5% трифторуксусной кислоты и 4% (об./об.) ацетонитрила), чтобы погасить реакцию, и смесь образцов обессоливали с помощью Наконечник столика 57 . Затем образцы (8  мкг) подвергали анализу наноЖХ-МС/МС.

Анализ NanoLC-MS/MS

NanoLC-MS/MS выполняли с использованием системы TripleTOF 5600 (AB, Sciex), оснащенной автодозатором HTC-PAL (CTC Analytics). Пептиды разделяли на монолитной колонке (4 мкм, 100 мкм, i.d., GL Science, Токио, Япония) с использованием системы Dionex UltiMate 3000 RSLCnano. Подвижные фазы представляли собой 0,5 % уксусной кислоты с 5 % (об./об.) ДМСО (раствор A) и 0,5 % уксусной кислоты в 80 % (об./об.) ацетонитриле с 5 % (об./об.) ДМСО (раствор B) 58 . Для элюирования: 5–15 % раствор B на 205 мин, 15–35 % раствор B на 549 ​​мин, 35–40 % раствор B на 103 мин, 40–100 % раствор B на 5 мин, 100 % раствор B на 118 мин и 5% раствор B в течение 100 мин (всего 1080 мин) со скоростью потока 400 нл/мин. Спиральная монолитная капиллярная колонка была соединена с самовытягивающимся эмиттером (100 мкм i.д., наконечник 3–5 мкм), сформированный с помощью SutterP-2000, и проводящий дистальный конец покрытия, нанесенный с помощью устройства для ионного покрытия модели IB-2 (Eiko Engineering, Ибараки, Япония), с которого подавалось напряжение распыления. Приложенное напряжение распыления составляло 2300 В, а температура нагревателя интерфейса составляла 150 °С. Диапазон сканирования МС составлял 300–1500 м/z каждые 0,25 с, а диапазон сканирования МС/МС составлял 80–1500 м/z каждые 0,1 с. Максимальное количество контролируемых ионов-кандидатов за цикл составляло 10, а время цикла составляло 1,3 с. Разрешение сканирования Q1 было UNIT.Чтобы свести к минимуму повторное сканирование, ранее сканированные ионы исключались на 30 с. Анализы выполняли в двух экземплярах, а между образцами вставляли холостые прогоны.

Анализ данных протеома для идентификации белка

Файлы необработанных данных были проанализированы с использованием ProteinPilot v5.0 (Sciex) с приемлемыми модификациями N-концевого iTRAQ, iTRAQ лизина, карбамидометилирования цистеина, окисления метионина, фосфорилирования серина, треонина , или тирозин, дезамидирование аспарагина или глутамина, N-концевая пироглутаминовая кислота глутамина или глутаминовой кислоты и N-концевое ацетилирование белка.Списки пиков, созданные из файла ProteinPilot.group, анализировали с использованием Mascot v2. 5 (Matrix Science, Лондон, Великобритания) с карбамидометилированием цистеина в качестве фиксированной модификации и N-концевым iTRAQ, iTRAQ лизина и окислением метионина в качестве переменных модификаций. Был проведен поиск в базе данных по отдельным записям UniProt/Swiss-Prot версии 2016_06 (8 июня 2016 г.) для человека с допуском по массе прекурсора 20 ppm, допуском по массе фрагментного иона 0,1 Da и строгой специфичностью к трипсину и Lys-C. , что допускало до двух пропущенных расколов.Для идентификации пептидов пептиды отклонялись, если любое из следующих условий не выполнялось: (а) если одно и то же сканирование было назначено разным пептидам между ProteinPilot и Mascot, (б) достоверность пептида была <0,05, (в) состояние заряда было> 5, а (d) длина пептида составляла <6 аминокислот. Для идентификации белка использовали не менее двух уверенно ( P  < 0,05) идентифицированных пептидов на белок. Были разрешены отдельные пептиды с более высокой достоверностью ( P  < 0,01). Наконец, пептиды были сгруппированы в белковые группы на основе ранее установленных правил 59 . Частота ложных открытий оценивалась путем поиска в базе данных последовательностей приманок (<1%). Для количественного определения пептидов и белков площадь iTRAQ была нормализована к общей площади всего протеома для каждого образца, и мы использовали подход RiMS для повышения точности 60 .

Анализ клеточной пролиферации

Первичные теноциты человека (5,0 × 10 3 , 7,5 × 10 3 и 10.0 × 10 3 ) высевали в 96-луночный планшет, содержащий DMEM/F12 (Gibco), и через 24 часа добавляли 10 нг/мл TGFβ3 или 50 нг/мл IGF1. Пролиферацию клеток оценивали через 72 часа с использованием набора Cell Counting Kit-8 (Dojindo Molecular Technologies, Kumamoto, Japan) в соответствии с инструкциями производителя.

Статистика и воспроизводимость

Статистический анализ проводили с использованием GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, La Jolla, CA, USA).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *