Бца состав: Аминокислота BCAA: польза, состав и применение

Содержание

Добавки BCAA, их полезные свойства и правила приема. Добавка BCAA для снятия усталости и для увеличение мышечной массы

Пищевая добавка BCAA представляет собой смесь аминокислот с разветвленной цепью, в состав которой входят валин, изолейцин и лейцин. В большинстве случаев данную разновидность добавок используют спортсмены для увеличения скорости роста мышц и повышения выносливости. Однако данная добавка также может способствовать снижению веса и устранению чувства усталости после интенсивной тренировки.

В этой статье мы рассмотрим, что собой представляют аминокислоты с разветвленной цепью, их полезные свойства и правила приема.

Что собой представляет BCAA

Как было сказано ранее, пищевая добавка BCAA состоит нескольких незаменимых аминокислот, таких как:

лейцин;
валин;
изолейцин.

Все вышеуказанные вещества сгруппированы в рамках одной добавки из-за того, что все они имеют цепь, разветвленную в одну сторону. Как и ряд прочих аминокислот, вышеуказанные вещества представляют собой строительные блоки, необходимые человеческому телу для генерации белка.

Однако стоит отметить, что BCAA является одной из самых необходимых добавок для человека, так как в ней содержатся незаменимые аминокислоты, которые не могут вырабатываться организмом самостоятельно.

Принцип действия аминокислот с разветвленной цепью

Аминокислоты, входящие в состав BCAA, составляют приблизительно 35-40 процентов от общего объема незаменимых кислот, необходимых человеческому организму. При этом они также составляют от 14-ти до 18-ти процентов от общего объема всех аминокислот.

В отличие от других подобных микроэлементов распад BCAA происходит не в печени, а в мышечных тканях. Именно поэтому аминокислоты с разветвленной цепью позволяют генерировать дополнительные объемы энергии в процессе выполнения физических упражнений.

Помимо этого, BCAA выполняет и ряд других функций в человеческом теле, к числу которых относятся:

генерация строительных блоков и белка для увеличения объемов мышечной массы;
регулирование уровня сахара в крови и эффективное его использование для выработки дополнительной энергии;
снижение уровня усталости во время и после выполнения интенсивных физических нагрузок за счет понижения уровня выработки серотонина в мозге.

Согласно заявлению ученых, лейцин оказывает наибольшее влияние на генерацию белков и строительных блоков, а изолейцин и валин имеют большее влияние на выработку дополнительной энергии и нормализацию уровня сахара в крови.

Добавки BCAA позволяют снизить уровень усталости

Регулярное потребление добавок аминокислот с разветвленной цепью позволяет понизить уровень не только физической, но и умственной усталости. Так, в одном из исследований было установлено, что лица, принимающие BCAA во время тренировок, испытывают на 15 процентов меньше усталости, чем люди, не принимающие добавки.

При проведении другого исследования ученым удалось установить, что добавление в рацион BCAA позволяет повысить уровень выносливости спортсменов в среднем на 17 процентов.

Еще в одном эксперименте лица, занимающиеся велосипедным спортом, подвергались не только физической нагрузке, но и тепловому стрессу. При употреблении ими добавок BCAA уровень выносливости велосипедистов повысился на 12 процентов.

Абсолютно все вышеуказанные исследования смогли продемонстрировать, что снижение уровня усталости за счет употребления незаменимых аминокислот с разветвленной цепью позволяет повысить уровень выносливости и работоспособности.

Помимо этого, учеными было установлено, что прием BCAA также позволяет понизить уровень усталости и у лиц, не занимающихся профессионально тем или иным видом спорта.

BCAA снижает уровень боли в мышцах

Прием добавок BCAA, помимо прочего, позволяет снизить болевые ощущения в мышцах после тяжелых физических нагрузок.

Наиболее эффективным способом снижения болевых ощущений является понижение уровня таких ферментов как лактатдегидрогеназа и креатинкиназа, принимающих участие в процессе повреждения мышечных волокон. Данный способ, помимо снижения уровня повреждения мышц, обеспечивает их надежную защиту и ускоряет восстановительный процесс.

В ряде исследований спортсменам предлагали дать оценку болевым ощущениям после выполнения тяжелых физических упражнений. Так, участники, принимавшие BCAA, оценили боль на 33 процента слабее, чем лица, принимавшие плацебо.

Более того, при проведении повторной тренировки через 24 часа, в которой задействовалась та же группа мышц, участники, употреблявшие аминокислоты с разветвленной цепью, продемонстрировали показатели на 20 процентов выше, чем группа, принимавшая плацебо.

Важно отметить, что эффективность снижения болевых ощущений в мышцах может зависеть от пола и общего объема белков, потребляемых ежедневно спортсменом.

BCAA позволяет увеличить мышечную массу

Большинство начинающих спортсменов приобретают добавки BCAA с целью увеличить собственные объемы мышечной массы. Стоит отметить, что ученые в результате проведения исследований смогли обнаружить, что аминокислоты разветвленной цепи способны активировать определенные ферменты, отвечающие за набор мышечной массы.

Во время проведения других исследований было установлено, что добавки BCAA, в которых содержание лейцина выше, чем валина и изолейцина, имеют намного большую эффективность в увеличении мышечных объемов.

Но, несмотря на это, исследователи не смогли обнаружить подтверждений того, что прием добавок BCAA является более эффективным, чем получение аминокислот с разветвленной цепью из натуральных продуктов питания или из соевого белка.

При этом большинство исследований показывают, что употребление протеина является более эффективным способом увеличения мышечной массы, чем прием добавок с определенными видами аминокислот.

BCAA может снизить уровень сахара в крови

Согласно заявлению исследователей, лейцин и изолейцин позволяют повысить уровень выработки инсулина и повысить уровень потребления сахара для генерации энергии, тем самым снижая его содержание в крови.

Но стоит отметить, что не все исследования подтверждают подобное заявление. Более того, некоторые ученые сообщают о возможности повышения уровня сахара в крови, что зависит от рациона человека. Так, при использовании добавок BCAA в сочетании с продуктами с высоким содержанием жиров способно стать причиной развития резистентности к инсулину, что в свою очередь может повысить уровень сахара в крови. Однако стоит отметить, что данные исследования проводились в лабораторных условиях с участием животных, из-за чего их результаты могут быть неприменимы по отношению к людям.

При этом исследования, направленные на изучение влияния аминокислот с разветвленной цепью на уровень сахара в крови, продемонстрировали неоднозначные результаты.

Во время проведения одного из экспериментов, в котором принимали участие люди с заболеванием печени, участникам выдавали по 12,5 граммов BCAA три раза в стуки. После завершения исследования у 10-ти лиц уровень сахара в крови значительно снизился, в то время как у 17-ти человек он остался прежним.

Поэтому для выдвижения каких-либо утверждений необходимо провести ряд дополнительных исследований.

BCAA способствуют снижению веса

Исследователи сообщают, что аминокислоты с разветвленной цепью способны предотвратить стремительное увеличение массы тела и ускорить процесс потери лишнего жира.

Проведенные исследования демонстрируют, что у лиц, регулярно принимающих до 15-ти граммов BCAA в сутки, риск стремительного набора массы и ожирения на 30 процентов ниже, чем у лиц, принимающих до 12-ти граммов этих аминокислот в день. Однако в рамках этих исследований участники принимали дополнительно добавки протеина в объеме 20-ти граммов в сутки, что могло повлиять на результат.

Тем же, кто пытается избавиться от лишних килограммов, добавки аминокислот с разветвленной цепью позволят снизить количество излишнего жира. В рамках одного из экспериментов лица, принимавшие добавки BCAA в сочетании с соевым протеином, смогли потерять на 1,6 килограмма больше веса за 19 дней, чем участники, принимавшие только протеин. При этом первая группа смогла понизить общий процент жира на 0,6 процента больше, чем вторая группа.

В процессе проведения другого исследования с участием тяжелоатлетов было обнаружено, что добавление в рацион 14-ти граммов BCAA в сутки позволяет на один процент эффективнее снижать объем жира, чем употребление 28-ми граммов сывороточного протеина. При этом группа, принимавшая добавки аминокислот с разветвленной цепью, набрала на 2 килограмма мышц больше, чем группа, употреблявшая протеин.

Несмотря на столь внушительные результаты, все вышеуказанные исследования не предоставляют точной информации о составе добавки и рационе участников, которые также могли повлиять на конечный результат.

BCAA может снизить риск возникновения осложнений при заболеваниях печени

Ученые сообщают, что BCAA способствует снижению риска осложнений, связанных с заболеваниями печени. Наиболее распространенным видом осложнений является печеночная энцефалопатия (HE), которая сопровождается такими симптомами как нарушение работы мозга, потеря сознания и кома.

Проведенные в недавнем времени исследования продемонстрировали, что добавки BCAA имеют более высокую эффективность при лечении заболеваний печени, в том числе печеночной энцефалопатии, по сравнению с другими добавками.

Но при этом стоит отметить, что аминокислоты с разветвленной цепью не способны повысить уровень выживаемости лиц с данным заболеванием и снизить риск других видов осложнений, вызванных инфекциями.

Во время проведения исследования с участием лиц, перенесших в недавнем времени операцию на печени, ученые обнаружили, что добавки BCAA позволяют не только восстановить работу печени, но также ускорить выздоровление пациентов и снизить риск послеоперационных осложнений.

Исследователи отмечают, что аминокислоты с разветвленной цепью способны нормализовать сон, устранить мышечные спазмы и снизить ощущение усталости у лиц с заболеваниями печени. Также добавки BCAA способны снизить риск преждевременной смерти на 7 процентов.

Натуральные источники аминокислот с разветвленной цепью

Для тех лиц, кто не желает принимать добавки, существует большой список продуктов, содержащих лейцин, изолейцин и валин. Самыми богатыми источниками BCAA считаются:

рыба, мясо и птица – от 3-х до 4,5 граммов в 84-х граммах;
чечевица и фасоль – от 2,5 до 3-х граммов в одной чашке;
молоко – до 2-х граммов в 237-ми миллилитрах;
яйца – 1,3 грамма в одном яйце;
лебеда – один грамм в чашке;
сыр – 1,4 грамма в 28-ми граммах;

орехи – от 0,7 до 1-го грамма на 28 граммов чистого продукта, в зависимости от сорта.

Возможные побочные эффекты

Согласно результатам многочисленных исследований, употребление BCAA в объеме от 15-ти до 35-ти граммов в сутки является абсолютно безопасным для человеческого организма.

Однако, несмотря на это, прием этих добавок противопоказан лицам, страдающим от бокового амиотрофического склероза, и людям с редким врожденным расстройством под названием болезнь «кленового сиропа».

Вывод

Употребление добавок аминокислот с разветвленной цепью позволяет не только улучшить состояние здоровья, но также снизить уровень сахара в крови, понизить объем жира в организме, повысить уровень выносливости и ускорить процесс роста мышц.

Помимо пищевых добавок, BCAA также содержится в натуральных продуктах с высоким содержанием белка, благодаря чему употребление соответствующих добавок является необязательным при соблюдении сбалансированной диеты.

Ссылки на исследования

1. The total branched-chain amino acid requirement in young healthy adult men determined by indicator amino acid oxidation by use of L-[1-13C]phenylalanine.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12730426

2. Nutraceutical effects of branched-chain amino acids on skeletal muscle.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16424141

3. Signaling pathways and molecular mechanisms through which branched-chain amino acids mediate translational control of protein synthesis.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16365087

SiS BCAA Perform 255 гр Летние фрукты

Аминокислотный комплекс SiS BCAA Perform предназначен для повышения работоспособности на тренировках, а также для поддержания синтеза белка в организме.

Аминокислоты играют важную роль в энергетическом обмене, работе мышц и восстановлении клеток и тканей. В основе комплекса SiS BCAA Perform – аминокислоты разветвленной цепи (ВСАА): лейцин, изолейцин, валин. Они являются незаменимыми и не вырабатываются в организме.

ВСАА способствуют поддержанию синтеза белка, предотвращают катаболизм и распад мышечной ткани во время длительных нагрузок, а также способствуют восстановлению.

В состав комплекса SiS BCAA Perform также входят аминокислоты L-аргинин и L-глютамин, а также витамины группы В.

Аргинин способствует расширению сосудов, улучшает гемодинамику и поступление питательных веществ и кислорода в мышцы. Глютамин ускоряет процессы восстановления, укрепляет иммунную систему, а также участвует в выведении продуктов обмена и детоксикации организма. Витамины группы В снижают утомляемость, участвуют в выработке энергии, а также улучшают работу мышц.

Таким образом, комплекс SiS BCAA Perform может применяться как во время тренировки – для поддержания работоспособности, так и после тренировки – для ускорения восстановительных процессов.

Ключевые характеристики:

6000 мг аминокислот ВСАА в порции
содержит L-аргинин, L-глютамин и витамины группы В
повышает работоспособность и энергетический потенциал
ускоряет восстановление после нагрузок.

Способы применения:

Растворить 3 мерные ложки (15 г) порошка в 500 мл воды и тщательно взболтать.

Применять 1 порцию до, во время либо после тренировок.

Энергетическая ценность:

	на порцию (15 г)
Белки	13 г
Жиры	0.8 г
в т.ч. насыщенные	0.0 г
Углеводы	1.1 г
в т.ч. простые сахара	0 г
ВСАА 2:1:1	6000 мг
L-лейцин	3000 мг
L-изолейцин	1500 мг
L-валин	1500 мг
L-глютамин	5000 мг
L-аргинин	1500 мг
Витамин В6	0.5 мг
Витамин В9	50 мкг
Витамин В12	0.25 мкг

Состав: растворимые аминокислоты 2:1:1 (Лейцин, Изолейцин, Валин) (40%), Л-глютамин (33%), Л-аргинин (10%), натуральный ароматизатор, лимонная кислота, эмульгатор (соевый лецитин, подсолнечный лецитин), натуральный краситель (экстракт свёклы), подсластитель (сукралоза), витамин B6, витамин В9, витамин В12.

Страна изготовитель — Великобритания.

Продукт зарегистрирован в агентстве Informed Sport
Продукт прошёл тестирование и сертификацию в агентстве Informed Sport. По протоколу Агентство тестирует каждую партию продукта компании Science in Sport, проверка проводится в соответствии с требованиями WADA. Наличие сертификата Informed Sports подтверждает отсутствие в продукте запрещённых субстанций, включая стероиды. Сертификаты по каждому продукту предоставляем по требованию.

Все об анализе состава тела (BCA) для снижения содержания жира

Это метод описания того, из чего состоит тело, с определением различий между жиром, белком, минералами и водой в организме, позволяющий составить представление о состоянии вашего здоровья. Он более точно описывает ваш вес и дает лучшее представление об общем состоянии здоровья, чем традиционные методы. Анализ состава тела может точно показать изменения жировой массы, мышечной массы и процентного содержания телесного жира

BCA включает следующие

1.

ИМТ – индекс массы тела

Вес человека в килограммах, разделенный на квадрат роста в метрах. ИМТ — недорогой и простой метод скрининга весовой категории — недостаточный вес, нормальный вес, избыточный вес и ожирение. Взрослые от 20 лет и старше могут интерпретировать свой ИМТ на основе следующих стандартных категорий весового статуса. Они одинаковы для мужчин и женщин всех возрастов и типов тележек.

ИМТ	Статус веса
Below 18.5	Under weight
18.5 to 24.9	Ideal (Normal)
25 to 29.9	Over weight
30 and above	Obesity

2. Калькулятор ИМТ

ИМТ — это простой расчет с использованием веса и роста человека. Формула: ИМТ = вес в кг, деленный на рост в метрах, умноженный на рост в метрах 9.0003

3. Процентное содержание телесного жира (BFP)

Это общая масса жира, деленная на общую массу тела, умноженная на 100. BFP является мерой уровня физической подготовки, поскольку это единственное измерение тела, которое напрямую рассчитывает относительный состав тела человека. без учета роста и веса.

Процентное содержание жира в организме человека варьируется в зависимости от возраста и пола. Это зависит от многих факторов, а также от поведенческих факторов, таких как отсутствие физических упражнений и чрезмерное потребление пищи. Из-за различных факторов некоторым людям труднее уменьшить жировые отложения, хранящиеся в области живота.

Ниже приведен нормальный процент жира в организме для мужчин и женщин.

Male

Age	Percentage
20 – 39 years	8 – 19%
40 – 59 years	11 – 21%
60 – 79 лет	13 – 24%

Женский

Возраст	Percentage
20 – 39 years	21 – 32%
40 – 59 years	23 – 33%
60 – 79 years	24 – 35%

Запишитесь на процедуру сжигания жира

прямо сейчас!

Забронировать

4.

Мышечный жир

Внутримышечным жиром обычно считается любой жир (включая жир между группами мышц и внутри мышцы), находящийся под мышечной фасцией. Внутримышечный жир — это видимая часть мышцы.

Мышечная масса может сделать вас тяжелее и увеличить ваш ИМТ. Поскольку мышцы плотнее и тяжелее жира, бодибилдеров и других профессиональных спортсменов, таких как футболисты, часто считают страдающими ожирением или избыточным весом только на основании их ИМТ. Наше тело не может превратить жир в мышцы, и обратное тоже верно

5. Хронологический возраст и возраст тела/биологический возраст

ХРОНОЛОГИЧЕСКИЙ ВОЗРАСТ

Ваш хронологический возраст – это количество времени, прошедшее с момента вашего рождения до указанной даты . Это ваш возраст в годах, месяцах, днях и т. д. Это основной способ, которым люди определяют ваш возраст. Это также основной фактор риска хронических заболеваний, смертности и нарушений функций организма.

БИОЛОГИЧЕСКИЙ ВОЗРАСТ/ ВОЗРАСТ ТЕЛА

Основная идея биологического возраста заключается в том, что старение происходит по мере постепенного накопления повреждений различных клеток и тканей в организме. Его также называют физиологическим или функциональным возрастом. Биологический возраст отличается от хронологического, поскольку он учитывает ряд факторов, помимо дня вашего рождения.

Биологический возраст может варьироваться в зависимости от вашего образа жизни, диеты, физических упражнений, сна, отношения, стресса и т. д. В зависимости от вашей генетики и образа жизни ваш биологический возраст будет выше или ниже вашего хронологического возраста.

6. Висцеральный жир

Висцеральный жир — это тип жира в организме, который откладывается в брюшной полости. Он расположен рядом с несколькими жизненно важными органами, включая печень, желудок и кишечник. Он также может накапливаться в артериях. Висцеральный жир иногда называют активным жиром, потому что он может активно увеличивать риск серьезных проблем со здоровьем. Мы можем уменьшить наш висцеральный жир с помощью физических упражнений. Висцеральный жир нельзя удалить из организма с помощью каких-либо неинвазивных или инвазивных процедур. Можно уменьшить висцеральный жир с помощью следующих методов:0003

Упражнения не менее 30 минут каждый день
Привычка пищи со здоровой диетой
Избегайте курения и алкоголя
Уменьшите напитки с сахаром
Здоровый сон

9000 2 . накапливается, когда вы потребляете слишком много калорий и мало занимаетесь физическими упражнениями. Некоторые люди склонны откладывать жир вокруг живота, а не на бедрах из-за своих генов
У женщин с возрастом запасы жира в организме могут меняться, особенно после менопаузы мышечная масса женщин уменьшается, а жир увеличивается. С возрастом у женщин увеличивается количество висцерального жира на животе, даже если они не прибавляют в весе.
Генетика и генетика играют роль в развитии висцерального жира. Употребление алкоголя может привести к увеличению жира на животе.
7. Базальный уровень метаболизма (BMR)
BMR — это количество калорий, необходимое вашему телу для выполнения основных функций жизнеобеспечения. Даже когда вы отдыхаете, сжигая калории, выполняя основные функции для поддержания жизни, такие как дыхание, кровообращение, переработка питательных веществ, производство клеток и т. д. BMR часто используется взаимозаменяемо со скоростью метаболизма в состоянии покоя. BMR — это минимальное количество калорий, необходимое для основных функций в состоянии покоя. Факторы, влияющие на BMR Возраст, пол, площадь поверхности, климат, температура тела, привычки, наркотики, гормоны и беременность. Большинство мужчин имеют BMR около 1600-1800 ккал/день, а большинство женщин имеют BMR около 1550 ккал/день.
Чтобы получить более подробную информацию или записаться на прием, позвоните нам по телефону +91 97467 41883
Запишитесь на процедуру сжигания жира

прямо сейчас!
Забронировать
Анализ BCA | Термо Фишер Сайентифик
анализы БЦА
.
№

Rapid Gold BCA Protein Assay BCA Protein Assay Анализ белка BCA — Совместимый с восстановительным агентом Микро -белок BCA. мкл) 125 до 2000 мкг/мл
(9 мкл) 2-40 мкг/мл
(150 мкл) или
от 0,5 до 20 мкг/мл (500 мкл)
424242 инкута. 5 мин при комнатной температуре 30 мин при 37°C 45 мин при 37°C 60 min at 60°C
Total assay time 50 min 100 min 115 min 130 min
Absorbance 480 nm 562 nm 562 nm 562 nm
Compatible reagents Detergents Detergents Detergents/reducing agents (e.g. DTT) Detergents
Несовместимые реагенты Восстановители; энтеросорбенты Восстановители; хелаторы Хелаторы Восстановители; энтеросорбенты
Однородность Меньшая вариация белок:белок, чем у методов с красителем Кумасси Меньшая вариация белок:белок, чем у методов с красителем Кумасси Меньше белок: вариации белка, чем в методах BCA, с красителем Кумасси или по методу Лоури
Доступные размеры 250 мл/Комплект
500 мл/комплект 500 мл/комплект
1 л/комплект 275 мл/комплект 500 МЛ/комплект A53225 23227 23250 23235
BCATER STEER
RAPLED GOLDALE BCATININ. анализ для измерения общего белка по сравнению со стандартом белка за 5 минут при комнатной температуре
BCA Protein Assay – от зеленого до фиолетового (A562 нм), двухкомпонентный, точный, совместимый с моющими средствами реагент для измерения концентрации общего белка по сравнению со стандартом белка за 30 минут при 37°C.
Анализ белка BCA — совместимость с восстановителем — совместимая с восстановителем версия нашего набора реагентов BCA для измерения концентрации белка в образцах, содержащих тиоловые восстановители DTT или BME.
Micro BCA Protein Assay – специальная трехкомпонентная версия нашего набора реагентов BCA для измерения концентрации общего белка в разбавленных белковых растворах (от 0,5 до 20 мкг/мл).
Принципы анализа BCA
Химия белковых анализов на основе BCA
Тест Pierce BCA Protein Assays сочетает в себе хорошо известное восстановление Cu2+ до Cu+ белком в щелочной среде (также известное как биуретовая реакция) с высокочувствительным и селективное колориметрическое обнаружение катиона меди (Cu+) с помощью бицинхониновой кислоты (BCA).
Рис. 1. Первая стадия представляет собой хелатирование меди с белком в щелочной среде с образованием комплекса синего цвета. В этой реакции пептиды, содержащие три или более аминокислотных остатка, образуют окрашенный хелатный комплекс с ионами меди в щелочной среде, содержащей тартрат натрия-калия.
Отдельные аминокислоты и дипептиды не затрагиваются биуретовой реакцией, но трипептиды и более крупные полипептиды или белки будут реагировать с образованием светло-сине-фиолетового комплекса, поглощающего свет при 540 нм. Один ион меди образует окрашенный координационный комплекс с четырьмя-шестью соседними пептидными связями. Интенсивность окрашивания пропорциональна количеству пептидных связей, участвующих в реакции.
Рис. 2. На втором этапе реагент BCA, высокочувствительный и селективный реагент для колориметрического обнаружения, вступает в реакцию с катионом меди (Cu+), образовавшимся на первом этапе, и дает пурпурный цвет.
Комплекс BCA-медь растворим в воде и демонстрирует сильное линейное поглощение при 562 нм при увеличении концентрации белка. Фиолетовый цвет может быть измерен на любой длине волны между 550 и 570 нм с минимальной (менее 10%) потерей сигнала. Сигнал, индуцированный реагентом БКА, примерно в 100 раз более чувствителен (нижний предел обнаружения), чем сигнал с использованием биуретового реагента.
Анализ белка Pierce Rapid Gold BCA использует тот же метод восстановления меди, что и традиционный анализ BCA, с уникальным хелатором меди. На втором этапе реакции развития окраски хелатор Pierce Rapid Gold BCA вступает в реакцию с восстановленным (медным) катионом (Cu+), который образовался на первом этапе, с образованием продукта реакции интенсивного золотистого цвета. Комплекс меди демонстрирует сильное линейное поглощение при 480 нм при увеличении концентрации белка.
Количественное определение белка BCA
Одним из основных преимуществ анализа BCA является то, что он дает линейную кривую отклика . Эта кривая отклика позволяет точно определять концентрации неизвестных белков и обеспечивает более широкий динамический диапазон, чем другие стандартные анализы.
Рисунок 3. Стандартные кривые для количественного анализа белка. (A) Очищенный БСА в 0,9% солевом растворе (0–2 мг/мл) использовали для создания стандартных кривых для анализа белков Pierce Rapid Gold BCA и стандартного анализа BCA. Оба анализа проводились в соответствии с протоколами производителя в формате микропланшета. (B) Тот же самый метод, описанный в (A), был использован для получения стандартных кривых для анализа белков Pierce Rapid Gold BCA и анализа белков Bio-Rad Bradford.
Другим важным преимуществом анализа белков BCA является низкая вариация между белками. Белки разнообразны по своему составу и структуре, и в некоторых анализах различия белков в аминокислотной последовательности, изоэлектрической точке (pI), вторичной структуре и боковых цепях или простетических группах приводят к изменению колориметрического ответа. Эта низкая вариация между белками приводит к более высокой точности определения концентрации белка для неизвестных образцов белка.
Рис. 4. Точность тестов Pierce Rapid Gold BCA Protein Assay и Bradford Protein Assay с известными белковыми смесями. Оба анализа были проведены в соответствии с протоколами соответствующих производителей в формате микропланшета. Известные концентрации были основаны на указанных производителями концентрациях и подтверждены поглощением при 280 нм.
Количественное определение белка с помощью анализа белка Pierce BCA
Анализ белка Pierce BCA дает линейную кривую отклика (R2 > 0,9).5) и может выполняться с использованием двух разных форматов в зависимости от динамического диапазона, необходимого для определения концентрации белка в неизвестном образце. Стандартный анализ белка Pierce BCA определяет концентрацию белка от 20 до 2000 мкг/мл с использованием двухкомпонентной системы: реагент A, карбонатный буфер, содержащий реагент BCA, и реагент B, раствор сульфата меди, которые смешиваются, чтобы сделать яблоко зеленым. –окрашенный рабочий раствор, который становится пурпурным через 30 минут при 37°С в присутствии белка. Поскольку цветная реакция не является реакцией истинной конечной точки, анализ белка Pierce BCA допускает значительную гибкость протокола. Повышая температуру инкубации, можно повысить чувствительность анализа. При использовании расширенного протокола для пробирок (т. е. инкубация при 60°C в течение 30 минут) рабочий диапазон анализа смещается до 5–250 мкг/мл, что облегчает обнаружение более разбавленных образцов.
Рис. 5. Протокол набора для анализа белков BCA.
Протокол набора Rapid Gold BCA Protein Assay Kit
Этот колориметрический анализ обеспечивает высокую чувствительность и линейность, присущие анализу BCA, но занимает намного меньше времени, чем стандартный анализ BCA. Анализ можно завершить за 5 минут при комнатной температуре, что избавляет от необходимости ждать или подвергать образцы воздействию повышенных температур.
Рис. 6. Протокол набора для анализа белка Rapid Gold BCA.
Анализы Лоури
Модифицированный набор для анализа белка Lowry
Диапазон анализа. Диапазон анализа: кювета
(объем пробы) 1–1500 мкг/мл
(200 мкл)
Время инкубации и температура 10 and 30 min at RT
Total assay time 110 min
Absorbance 750 nm
Compatible reagents SDS (up to 1%)
Несовместимые реагенты Восстанавливающие реагенты, хелаторы, детергенты, трис, трицин, глицерин0017
Размер продукта 530 мл/набор
Кат. № 23240
Принципы анализа Лоури
Модифицированный Пирсом анализ белка Лоури основан на колориметрическом методе, представленном Оливером Х. Лоури в 1951 году. единый, более устойчивый.
Химический анализ модифицированного метода Пирса Лоури
Анализ белка Лоури, модифицированный Пирсом, представляет собой усовершенствованный анализ биурета, включающий химическое хелатирование меди. Хотя механизм формирования окраски для анализа белка Лоури, модифицированного Пирсом, аналогичен механизму анализа белка Пирса ВСА, между ними есть несколько существенных различий. Хотя точный механизм образования окраски с использованием анализа белка Лоури, модифицированного Пирсом, до конца не ясен, известно, что реакция протекает в два отдельных этапа. Сначала белок реагирует с щелочным сульфатом меди в присутствии тартрата при 10-минутной инкубации при комнатной температуре. Во время этой инкубации из четырех пептидных связей и одного атома меди образуется тетрадентатный комплекс меди светло-голубого цвета (это «биуретовая реакция»). После инкубации добавляют фенольный реагент Folin. Считается, что усиление окраски происходит, когда тетрадентатный комплекс меди передает электроны комплексу фосфорно-молибденовой и фосфорно-вольфрамовой кислот (фенольный реагент Фолина).