ΠΠ΅Π»ΠΎΠΊ, Π³Π°ΡΡΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΡΠΎ Π² ΠΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΠ±ΠΈΡΡΠΊΠ΅ Π½Π° ΠΌΠ΅ΡΡΠΎ ΠΡΠ°ΡΠ½ΡΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠΏΠ΅ΠΊΡ β ΠΎΡΠ·ΡΠ²Ρ, Π°Π΄ΡΠ΅Ρ, ΡΠ΅Π»Π΅ΡΠΎΠ½, ΡΠΎΡΠΎ β Π€Π»Π°ΠΌΠΏ
ΠΡΠ±Π»Ρ Π΄Π²Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠΏΡΡΠΊΠ° #NumberTwo
ΠΡΠΎΠ½ΡΡ Π°Π² ΠΎΡΠ·ΡΠ²Ρ Π² ΠΈΠ½ΡΡΠ°Π³ΡΠ°ΠΌ ΡΡΠΎ Π½ΡΠ½ΡΠ΅ Π΅Π΄ΡΡ ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Π±Π»ΡΠ΄Π° ΠΆΠ°Π»ΡΡΡ, Π·Π°Ρ ΠΎΡΠ΅Π»ΠΎΡΡ ΠΈ ΠΌΠ½Π΅. ΠΡΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π°ΡΡ Π² Π³Π°ΡΡΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΡΠΎ Π΄Π°ΡΡ Π΅ΠΌΡ Π΅ΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΡΠ°Π½Π΅Ρ.
ΠΠ° ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ°Ρ ΠΊΠ°ΠΊ Π±ΡΠ»ΠΎ — Π·Π°Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π· ΡΠ°ΠΉΡΠ°, Π° ΠΌΠ΅Π½Ρ Π² Ρ Π°ΠΉΠ»Π°ΠΉΡΡ. Π’Π΅, Ρ ΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π½Π΅Ρ ΠΈΠ½ΡΡΠ°Π³ΡΠ°ΠΌ — ΠΊΡΠ΅ΠΏΠΈΡΠ΅ΡΡ, Π½Π°ΡΡΠ°Π»ΠΎ Π½Π΅ Π²Π°ΡΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈ Π²Ρ ΠΎΡΡΠ°Π½Π΅ΡΠ΅ΡΡ Π·Π° Π±ΠΎΡΡΠΎΠΌ ΡΠΈΠ²ΠΈΠ»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ. Π― Π·Π°…
ΠΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΡ ΡΠ΅Π»ΠΈΠΊΠΎΠΌ
ΠΡΠ±Π»Ρ Π΄Π²Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠΏΡΡΠΊΠ° #NumberTwo
ΠΡΠΎΠ½ΡΡ Π°Π² ΠΎΡΠ·ΡΠ²Ρ Π² ΠΈΠ½ΡΡΠ°Π³ΡΠ°ΠΌ ΡΡΠΎ Π½ΡΠ½ΡΠ΅ Π΅Π΄ΡΡ ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Π±Π»ΡΠ΄Π° ΠΆΠ°Π»ΡΡΡ, Π·Π°Ρ ΠΎΡΠ΅Π»ΠΎΡΡ ΠΈ ΠΌΠ½Π΅. ΠΡΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π°ΡΡ Π² Π³Π°ΡΡΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΡΠΎ Π΄Π°ΡΡ Π΅ΠΌΡ Π΅ΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΡΠ°Π½Π΅Ρ.
ΠΠ° ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ°Ρ ΠΊΠ°ΠΊ Π±ΡΠ»ΠΎ — Π·Π°Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π· ΡΠ°ΠΉΡΠ°, Π° ΠΌΠ΅Π½Ρ Π² Ρ Π°ΠΉΠ»Π°ΠΉΡΡ. Π’Π΅, Ρ ΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π½Π΅Ρ ΠΈΠ½ΡΡΠ°Π³ΡΠ°ΠΌ — ΠΊΡΠ΅ΠΏΠΈΡΠ΅ΡΡ, Π½Π°ΡΡΠ°Π»ΠΎ Π½Π΅ Π²Π°ΡΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈ Π²Ρ ΠΎΡΡΠ°Π½Π΅ΡΠ΅ΡΡ Π·Π° Π±ΠΎΡΡΠΎΠΌ ΡΠΈΠ²ΠΈΠ»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ. Π― Π·Π° ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈ Π½Π΅ ΠΈΡΠΏΡΡΡΠ²Π°Ρ Π»ΡΠ±ΠΎΠ²ΠΈ Π»ΡΠ±ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΉ ΠΊ ΠΈΠ½ΡΡΠ°Π³ΡΠ°ΠΌ. Π ΡΠ΅ΠΏΠ΅ΡΡ ΠΠΎΠ²ΠΈΠ΄ Π΄ΠΈΠΊΡΡΠ΅Ρ ΡΠ²ΠΎΠΈ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π°, Ρ ΠΎΡΠ΅ΡΡ ΠΊΡΡΡΠΈΡΡΡΡ Π² ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΏΠΈΡΠ΅ — Π³ΠΎΡΠΎΠ²Ρ ΠΏΠ»ΡΡΠΎΠΌ Π½Π°Π²ΡΠ½ΠΎΡ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΠΉ Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΊΡ Π½Π° ΠΊΡΡ Π½ΠΈ Π² ΡΠΎΠΌ ΡΠΈΡΠ»Π΅ ΠΊΠΎΠ²ΠΈΠ΄-Π΄ΠΈΡΡΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΎΠ².
Π‘ ΠΏΡΠΎΡΠ»ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²ΠΎΠ΅Π³ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΎΡΠ·ΡΠ²Π° Π² ΡΡΠΎΡ ΡΠ°Π· Ρ Π·Π°ΠΊΡΡΠ»Π° Π³Π»Π°Π·Π° Π½Π° ΠΏΡΠΎΡΡΡΠ΅Π»Π΅Π½Π½ΡΠΉ Π»Π΅ΡΠ½ΠΈΠΊ (Π±Π»Π°Π³ΠΎ, Π½Π΅ ΡΠ΅Π·ΠΎΠ½), ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π΄Π°ΠΆΠ΅ ΠΊΡΠΎ-ΡΠΎ Π½Π°Ρ Π²Π°Π»ΠΈΠ²Π°Π΅Ρ! ΠΠΎ ΠΊΡΡΡΠΎΠΊ Π² ΡΡΠ°Π»Π΅ΡΠ΅ Π²ΡΡ ΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΈΠ»Π° Π½Π° Π²ΡΠ½ΠΎΡΠ»ΠΈΠ²ΠΎΡΡΡ.
ΠΠΎΡΠ°Π·ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ, Π½ΠΎ Π²ΡΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ ΠΊΡΡΡΠΎΠΊ ΡΠ°ΠΊ ΠΈ Π½ΠΎΡΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΈ Π±Π΅ΡΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ½ΠΎ Π²ΡΠ²Π°Π»ΠΈΡΡΡΡ — ΠΏΡΠΈΠΌΡΡ Π½Π΅ ΠΏΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΡΡ, Π·Π°ΡΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ·ΠΈΡΠΈΡ ΠΈΠ· Π»Π°Π²Π°Π½Π΄Ρ ΠΏΡΠ΅ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎ ΡΠ΅Π±Π΅ ΠΊΡΠ°ΡΡΠ΅ΡΡΡ. ΠΠ΄Π΅ΡΡ ΠΏΡΠΎ Π²ΡΡΠΎΠΊΡΡ Π°Π²ΡΠΎΡΡΠΊΡΡ Π΅Π΄Ρ, ΡΠΊΠ°ΠΆΠ΅ΡΠ΅ Π²Ρ, ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΡΡΡΠΊΠΈ, ΠΏΠ»ΡΠ½Ρ ΠΈ ΡΠ°Π·ΠΌΠ°ΠΆΡπ
ΠΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ΅ ΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΎΡΠ½ΡΠ½Π΅ ΠΎΡΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠ°Π½ΠΎ ΡΠ΅ΡΠΊΠΎ Π½Π° ΠΏΡΠΈΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Π±ΡΠΌΠ°Π³Π΅. «Π‘ΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅» ΠΈ «Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ½ΠΊΠΈ» ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈ ΠΏΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅ Π½Π° Π±ΡΠΌΠ°Π³Π΅ Π½Π΅ ΡΠ΅ΡΠΊΠΎ ΠΏΡΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠ°Π½Ρ.
ΠΠΎΠ΄Π°ΡΡ Π²ΠΎΠ΄Ρ, ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΊΡΡΠ°ΡΠΈ Π² ΡΠ°ΠΊΠΎΠΌ ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΡΡΠΎ-ΡΠΎ ΡΠ΄Π°ΠΊΠΎΠ΅ ΡΠ°ΡΠΏΡΠΎΠ±ΠΎΠ²Π°ΡΡ ΠΈ Π½Π΅ Π·Π°Π±ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ Π²ΠΊΡΡΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠΎΡΠΎΡΠΊΠΈ.
π΄ΠΠ΄Π½ΠΎ ΠΈΠ· Π½Π°ΡΡΠΌΠ΅Π²ΡΠΈΡ Π±Π»ΡΠ΄ — ΠΊΡΠ΅ΠΌ-Π±ΡΡΠ»Π΅ ΠΈΠ· ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ ΡΡΠΏΠ»Π΅Π½ΠΊΠ° Ρ Π°Π±ΡΠΈΠΊΠΎΡΠΎΠ²ΡΠΌ Π΄ΠΆΠ΅ΠΌΠΎΠΌ. Π‘ΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΠ»Π΅Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ ΡΠ»Π°Π΄ΠΊΠΎΠ³ΠΎ, Π½Π΅ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠΎΡΠ½ΠΎ ΠΈ Π½Π΅ΠΏΡΠΈΠ²ΡΡΠ½ΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ·Π½Π°ΡΠ½ΠΎ. ΠΠ°ΡΡΠ΅Ρ ΠΎΡΠ½ΡΠ½Π΅ Π½Π΅ Π½Π°ΠΌΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π½Π° ΠΊΡΠ°ΡΡΠΊΡ Ρ Π»Π΅Π±Π°, Π° Π½Π°Π±ΠΈΡΠ°Π΅ΡΡΡ Π² Π»ΠΎΠΆΠ΅ΡΠΊΡ ΠΈ Π·Π°ΠΊΡΡΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ ΡΠΎΡΡΠΎΠΌ ΡΠΎ ΡΠ»Π°Π΄ΠΊΠΈΠΌ Π΄ΠΆΠ΅ΠΌΠΎΠΌ ΠΈ ΡΠ³ΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ.
ΠΡΠ±ΠΎΠΏΡΡΡΡΠ²ΠΎ ΡΠ΄ΠΎΠ²Π»Π΅ΡΠ²ΠΎΡΠΈΠ»Π°, Π΄ΡΡ Π·Π°Ρ Π²Π°ΡΠΈΠ»ΠΎ, Π½ΠΎ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΡ.π΄ΠΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎ ΠΈΠ½ΡΡΠΈΠ³ΡΡΡΠ΅Π΅ Π±Π»ΡΠ΄ΠΎ — ΠΎΠ»Π΅Π½ΠΈΠ½Π°, ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠΎΠΏΡΠ΅Π½Π½Π°Ρ Π½Π° ΡΠ΅ΠΏΠ΅. ΠΡΡΠ΅ΠΊΡΠ½ΠΎΠ΅ Π±Π»ΡΠ΄ΠΎ. ΠΡΡΠΎ Π²ΡΠ½Π΅ΡΠ»ΠΈ Π½Π° ΠΊΠ°ΠΌΠ½Π΅ ΠΈ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΡΠΎ Π³ΠΎΡΠΎΠ²ΡΠΌ Ρ Π·Π°ΠΏΠ°Ρ ΠΎΠΌ ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΡΠΊΠ°… (Π΄Π°ΠΌ Π²Π°ΠΌ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π²ΠΎΡΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²Π΅ΡΡΠΈ ΡΡΠΎΡ Π½Π΅ΠΈΠ·Π±ΡΠ²Π½ΡΠΉ Π°ΡΠΎΠΌΠ°Ρ)! ΠΡΡΠΎ ΠΎΠ»Π΅Π½Ρ Π±ΡΠ»ΠΎ ΡΠΎ ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌ ΠΏΡΠΈΠ²ΠΊΡΡΠΎΠΌ — ΡΠΎ Π»ΠΈ ΠΎΡ ΡΡΠ°ΡΠΎΡΡΠΈ, ΡΠΎ Π»ΠΈ Π΅ΡΡ ΠΎΡ ΡΠ΅Π³ΠΎ (Π·Π½Π°Π΅ΡΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ Ρ Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π±Π°ΡΠ°Π½ΠΈΠ½Ρ Π±ΡΠ²Π°Π΅Ρ). ΠΡΠΈΠ±Π½ΠΎΠΉ ΡΠΎΡΡ, Π΅ΡΡ ΠΏΠΎΡ ΠΎΠΆΠ΅ Π»ΡΠΊΠΎΠ²ΡΠΉ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΈΡΡΡ. Π ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΡΠΈΠ³ΠΎΡΠΎΠ²Π»Π΅Π½ ΠΈ ΠΎΡΠΎΡΠΌΠ»Π΅Π½ ΠΊΠ°ΡΡΠΎΡΠ΅Π»Ρ Π² Π²ΠΈΠ΄Π΅ Π³ΡΠ°ΡΠ΅Π½Π°! Π‘Π»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΠΎΡΠΈΠ½Π΅Π½Π½ΠΎΠ΅ Π±Π»ΡΠ΄ΠΎ Π²ΡΡ ΠΆΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡΡ ΠΎΡΠΊΡΡΠ°ΡΡ.
π΄Π ΠΊΠ»Π°ΡΡΠΈΠΊΠ° Π΄Π΅ΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΆΠ°Π½ΡΠ° Π² ΠΈΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΡΠ΅ΠΌ-Π±ΡΡΠ»Π΅ Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠΆΠΆΠ΅Π½ΠΎΠΉ ΡΠ°Ρ Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΊΠΎΠΉ — ΡΠ»Π°Π΄ΠΊΠΎ ΠΈ Π²ΠΊΡΡΠ½ΠΎ!
πΉΠΠΎΡΠ²ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Π»ΠΈΠΌΠΎΠ½Π°Π΄ΠΈΠΊΠΈ! ΠΠΎΡ ΡΡΠΎ Ρ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°Ρπ Π― ΠΏΠΈΠ»Π° Π±Π°Π·ΠΈΠ»ΠΈΠΊΠΎΠ²ΡΠΉ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΡΠΈΡΠΎΠΏΠ°, ΡΡΠΎΡ Π»ΠΈΠΌΠΎΠ½Π°Π΄ ΡΠΌΠ΅ΡΡΠ½Π΅Π΅ Π±ΡΠ»ΠΎ Π±Ρ ΡΠΊΡΠ°ΡΠΈΡΡ Π»ΠΈΡΡΠΈΠΊΠΎΠΌ Π±Π°Π·ΠΈΠ»ΠΈΠΊΠ°, Ρ ΠΎΡΡ ΠΏΠΎΡΠ΅ΠΌΡ Π±Ρ ΠΈ Π½Π΅Ρ ΡΠ°ΠΊ.
ΠΠΎΠ½ΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΈΡΡ ΠΌΡΠ·ΡΠΊΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ΅ΠΊΠΈ, Ρ ΠΏΠΎΠΏΡΠΈΡΠ»ΡΡΠΈΠ²Π°Π»Π°ΡΡ ΠΈ Π² ΡΠΎ ΠΆΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΏΠΎΠΊΠ°ΠΉΡΠΎΠ²Π°Π»Π°.
ΠΠ°Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΏΠΈΡΠ° — ΡΡΠΎ ΠΏΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ Π΅Π³ΠΎ ΡΠ΅ΡΠ΄ΡΠ΅ — ΠΊΡΡ Π½Ρ, Π½ΠΎ Π½Π΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ, ΡΡΠΎ ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΠΎΡΠ³Π°Π½Ρ-ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π½ΡΠ΅ Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°. ΠΡΡΡΠΎΠΊ-ΠΊΠΎΠ»Ρ ΠΎΠ·, Π²Π΅ΡΠ°Π½Π΄Π° Π² ΡΠ΅ΡΠ΅ΡΠΎ… ΡΠ°Π·Π³ΠΈΠ»ΡΠ΄ΡΠΉΡΡΠ²ΠΎ.
ΠΡΠΈΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅ Π΄Π»Ρ Π³Π°ΡΡΡΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΡΡΠ΅Ρ , ΠΈΡΠΏΡΡΠ°ΡΡ Π½Π΅ΡΡΠΈΠ²ΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ²Π΅ΠΆΠΈΠ΅ Π²ΠΊΡΡΡ, Π° Π½Π° Π²ΡΡ ΠΎΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅ΡΡΡ Π·Π°ΠΊΡΡΡΡ Π³Π»Π°Π·Π°π
ΠΡΠΈΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅ Π±ΡΠ΄ΠΆΠ΅Ρ ΡΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡΡ, ΡΠ±Π΅ΡΠ΅ΡΡ Π΅Π³ΠΎ ΠΎΡ ΡΠ΅ΡΡΠΎΡΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΠΊΠΈ ΠΈ Π²ΠΊΡΡΠΈΡΡ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΉ ΠΊΡΡ Π½ΠΈ, Π° Π·Π°ΠΎΠ΄Π½ΠΎ ΠΏΠΎΠΏΡΠΎΠ±ΠΎΠ²Π°ΡΡ Π½Π°Π΅ΡΡΡΡΡ, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΡΡΡπ
ΠΠ»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ (Π°Π»ΡΡΠ°-Π€Π)
ΠΠΌΠ±ΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅Ρ Π½Π° ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠ΅ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΎΠ½ΠΊΠΎΠΌΠ°ΡΠΊΠ΅ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ Π²Π·ΡΠΎΡΠ»ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°.
Π‘ΠΈΠ½ΠΎΠ½ΠΈΠΌΡ ΡΡΡΡΠΊΠΈΠ΅
ΠΠ€Π.
Π‘ΠΈΠ½ΠΎΠ½ΠΈΠΌΡΒ Π°Π½Π³Π»ΠΈΠΉΡΠΊΠΈΠ΅
Alfa-Fetoprotein, AFP, Maternal Serum Alpha-Fetoprotein (MS-AFP), AFP Tumor Marker.
ΠΠ΅ΡΠΎΠ΄ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ
Π’Π²Π΅ΡΠ΄ΠΎΡΠ°Π·Π½ΡΠΉ Ρ Π΅ΠΌΠΈΠ»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· («ΡΡΠ½Π΄Π²ΠΈΡ»-ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄).
ΠΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ:Β 0,5 — 50000Β ΠΠ/ΠΌΠ».
ΠΠ΄ΠΈΠ½ΠΈΡΡ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ
ΠΠ/ΠΌΠ» (ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄ΡΠ½Π°ΡΠΎΠ΄Π½Π°Ρ Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΠ° Π½Π° ΠΌΠΈΠ»Π»ΠΈΠ»ΠΈΡΡ).
ΠΠ°ΠΊΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈΠ°Π» ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ?
ΠΠ΅Π½ΠΎΠ·Π½ΡΡ ΠΊΡΠΎΠ²Ρ.
ΠΠ°ΠΊ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΡΠΎΠ²ΠΈΡΡΡΡ ΠΊ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ?
- ΠΠ΅ ΠΊΡΡΠΈΡΡ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 30 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ Π΄ΠΎ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ.
ΠΠ±ΡΠ°Ρ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ ΠΎΠ± ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ
ΠΠ»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ β Π³Π»ΠΈΠΊΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π²ΡΡΠ°Π±Π°ΡΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π² ΡΠΌΠ±ΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ΅, ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ ΠΈ ΡΠΏΠΈΡΠ΅Π»ΠΈΠΈ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΈΠΊΠ° ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°. ΠΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½Π°Ρ ΠΌΠ°ΡΡΠ° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° β ΠΎΠΊΠΎΠ»ΠΎ 70Β 000 Π΄Π°Π»ΡΡΠΎΠ½, ΠΏΠ΅ΡΠΈΠΎΠ΄ Π΅Π³ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΠΏΠ°Π΄Π° ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ 5-7 Π΄Π½Π΅ΠΉ. Π ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° ΠΎΠ½ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠ΅Ρ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΈ Π°Π»ΡΠ±ΡΠΌΠΈΠ½Π° Π²Π·ΡΠΎΡΠ»ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°: ΠΎΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π²Π΅ΡΠ΅ΡΡΠ², Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡΡ Π΄Π»Ρ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°, ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π΅Ρ ΡΡΡΡΠΎΠ³Π΅Π½Ρ, ΠΎΠ³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠΈΠ²Π°Ρ ΠΈΡ Π²Π»ΠΈΡΠ½ΠΈΠ΅ Π½Π° ΡΠ°Π·Π²ΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉΡΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ, ΠΈ Π·Π°ΡΠΈΡΠ°Π΅Ρ ΠΎΡ Π½Π΅Π³Π°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½Π½ΠΎΠΉ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈ.
ΠΠ»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ ΡΡΠ°ΡΡΠΈΠ΅ Π² ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΠΈ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°, ΠΈ Π΅Π³ΠΎ ΡΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ΅Π½ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΠΎΠ²Π°ΡΡ Π³Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΌΡ Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡΡ (Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° Ρ ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΠ° ΠΎΠΏΠ»ΠΎΠ΄ΠΎΡΠ²ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ). ΠΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ ΠΈ Π°ΠΌΠ½ΠΈΠΎΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΡΡΠΈ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° ΠΎΡΠΌΠ΅ΡΠ°Π΅ΡΡΡ Π½Π° 13-ΠΉ Π½Π΅Π΄Π΅Π»Π΅, Π° Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈ ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½Π½ΠΎ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Ρ 10-ΠΉ Π½Π΅Π΄Π΅Π»ΠΈ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠ³Π°Π΅Ρ ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΡΠΌΠ° Π½Π° 30-32-ΠΉ Π½Π΅Π΄Π΅Π»ΡΡ . Π§Π΅ΡΠ΅Π· 8-12 ΠΌΠ΅ΡΡΡΠ΅Π² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠΎΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅ ΠΠ€Π Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ ΡΠ΅Π±Π΅Π½ΠΊΠ° ΡΠ½ΠΈΠΆΠ°Π΅ΡΡΡ Π΄ΠΎ ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π°, ΠΊΠ°ΠΊ Ρ Π²Π·ΡΠΎΡΠ»ΡΡ .
ΠΠ»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ ΠΏΡΠΎΠ½ΠΈΠΊΠ°Π΅Ρ Π² ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· ΠΏΠ»Π°ΡΠ΅Π½ΡΡ. ΠΠ³ΠΎ ΡΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΎΡ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΡ ΠΆΠ΅Π»ΡΠ΄ΠΎΡΠ½ΠΎ-ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ°ΠΊΡΠ°, ΠΏΠΎΡΠ΅ΠΊ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° ΠΈ ΠΏΠ»Π°ΡΠ΅Π½ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π°ΡΡΠ΅ΡΠ°. Π ΡΠ²ΡΠ·ΠΈ Ρ ΡΡΠΈΠΌ ΠΠ€Π ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΊΠ°ΠΊ Π½Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΌΠ°ΡΠΊΠ΅Ρ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° ΠΈ Π°ΠΊΡΡΠ΅ΡΡΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ. Π‘ΠΎΠ²ΠΌΠ΅ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ΅ΡΡΡ Π½Π° ΠΠ€Π,Β Ρ ΠΎΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ Π³ΠΎΠ½Π°Π΄ΠΎΡΡΠΎΠΏΠΈΠ½Β ΠΈΒ ΡΡΡΡΠΈΠΎΠ»Β (ΡΠ°ΠΊ Π½Π°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΠΌΡΠΉ ΡΡΠΎΠΉΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΡΡ) Π½Π° 15-20-ΠΉ Π½Π΅Π΄Π΅Π»ΡΡ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡΡΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° Π½Π° Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡΡ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΈ Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΠΌΠ½ΡΠ΅ Π°Π½ΠΎΠΌΠ°Π»ΠΈΠΈ, Π½ΠΎ Π½Π΅ ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ Π°Π±ΡΠΎΠ»ΡΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»ΡΠΌΠΈ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π½ΠΎΡΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°. ΠΡΠΈ ΡΡΠΎΠΌ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΎΡΠ½ΠΎ Π·Π½Π°ΡΡ Π³Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΉ Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ ΠΠ€Π Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ°Π΅ΡΡΡ Π½Π° ΡΠ°Π·Π½ΡΡ Π½Π΅Π΄Π΅Π»ΡΡ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ.
Π ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ Π²Π·ΡΠΎΡΠ»ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° Π°Π»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π² ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π°Ρ . Π£ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π΅Π³ΠΎ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ Π²ΡΠ·Π²Π°Π½ΠΎ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ, Π° Π·Π½Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ β Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΡΡ β ΡΡΠΎ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½ΠΎ Ρ ΡΠ΅ΠΌ, ΡΡΠΎ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠ°ΠΊΠΎΠ²ΡΠ΅ Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ°ΡΡ ΡΠ²ΠΎΠΉΡΡΠ²Π° ΡΠΌΠ±ΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ ΠΈ, ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ, ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΡ ΠΊ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠ½Ρ Π΄Π»Ρ ΡΠ°Π½Π½ΠΈΡ ΡΡΠ°ΠΏΠΎΠ² ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°.
ΠΡΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ Π³Π΅ΠΏΠ°ΡΠΎΡΠ΅Π»Π»ΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ½ΠΎΠΌΠ΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΠ€Π Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½Ρ Π±ΠΎΠ»ΡΠ½ΡΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΡΡ Π½Π° 1-3 ΠΌΠ΅ΡΡΡΠ° ΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ ΠΊΠ»ΠΈΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΠΏΡΠΎΡΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠΉ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΡ. Π₯ΠΎΡΡ ΡΠ°Π·ΠΌΠ΅ΡΡ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ, ΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΡΠΎΡΡΠ°, ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ° ΠΈ ΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½Ρ Π·Π»ΠΎΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ Π½Π΅ ΠΏΡΠΎΠΏΠΎΡΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½Ρ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Ρ Π°Π»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½Π° Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ. ΠΡΠΈ ΠΏΡΠΎΠ³ΡΠ΅ΡΡΠΈΡΡΡΡΠ΅ΠΉ Π³Π΅ΡΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π½Π΅ΡΠ΅ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΌΠ΅ (ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΡΡ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·) ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ ΠΠ€Π ΠΈ Ρ ΠΎΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π³ΠΎΠ½Π°Π΄ΠΎΡΡΠΎΠΏΠΈΠ½Π° ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π²Π°ΠΆΠ½ΡΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΡΠ°Π½ΡΠΎΠ² Π²ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π±ΠΎΠ»ΡΠ½ΡΡ .
ΠΠ»Ρ ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅?
- ΠΠ»Ρ ΠΏΡΠ΅Π½Π°ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠΈ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΉ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°: Π½Π°ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π·Π°ΠΊΠ»Π°Π΄ΠΊΠΈ Π½Π΅ΡΠ²Π½ΠΎΠΉ ΡΡΡΠ±ΠΊΠΈ, Π°Π½ΡΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π»ΠΈΠΈ (ΡΡΠΆΠ΅Π»ΡΠΉ ΠΏΠΎΡΠΎΠΊ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ, ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΌ Ρ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΡΡΡ Π³ΠΎΠ»ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠΎΠ·Π³Π°), Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΠΌΠ½ΡΡ Π°Π½ΠΎΠΌΠ°Π»ΠΈΠΉ.
- ΠΠ»Ρ Π²ΡΡΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ Π³Π΅ΠΏΠ°ΡΠΎΡΠ΅Π»Π»ΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ½ΠΎΠΌΡ (ΡΠ°ΠΊΠ° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ).
- ΠΠ»Ρ Π²ΡΡΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅ΡΠ°ΡΠΎΠ±Π»Π°ΡΡΠΎΠΌΡ ΡΠΈΡΠΊΠ° (Π³Π΅ΡΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π½Π΅ΡΠ΅ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΌΡ).
- ΠΠ»Ρ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠΈ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»Π΅ΠΉ.
- ΠΠ»Ρ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡΠ°Π·ΠΎΠ² ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»Π΅ΠΉ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΉ Π² ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ.
- ΠΠ»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ ΠΎΠ½ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ ΠΈ Π΄Π»Ρ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ Π·Π° ΠΈΡ ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ.
ΠΠΎΠ³Π΄Π° Π½Π°Π·Π½Π°ΡΠ°Π΅ΡΡΡ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅?
- ΠΡΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ ΠΏΠ°ΡΠΈΠ΅Π½ΡΠ° Ρ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΈΠΌ ΡΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ (ΠΏΡΠΈ ΡΠΈΡΡΠΎΠ·Π΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ, Ρ ΡΠΎΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΌ Π³Π΅ΠΏΠ°ΡΠΈΡΠ΅, Π΄Π΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ Π°Π»ΡΡΠ°-Π°Π½ΡΠΈΡΡΠΈΠΏΡΠΈΠ½Π°).
- ΠΡΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ·ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π½Π° ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡΠ°Π·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»Π΅ΠΉ Π² ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ.
- ΠΡΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ ΠΏΠ°ΡΠΈΠ΅Π½ΡΠ° Ρ Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΡΡ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·.
- ΠΠΎ, Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ ΡΠ°ΠΊΠΎΠ²ΡΡ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ.
- ΠΠΎ Π²ΡΠΎΡΠΎΠΌ ΡΡΠΈΠΌΠ΅ΡΡΡΠ΅ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ (ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ 15-ΠΉ ΠΈ 21-ΠΉ Π½Π΅Π΄Π΅Π»ΡΠΌΠΈ Π³Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈΠΈ).
- ΠΡΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΡ , Ρ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Π°ΠΌΠ½ΠΈΠΎΡΠ΅Π½ΡΠ΅Π· ΠΈ Π±ΠΈΠΎΠΏΡΠΈΡ Ρ ΠΎΡΠΈΠΎΠ½Π° Π² ΡΠ°Π½Π½ΠΈΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠΈΠΎΠ΄ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ.
Π§ΡΠΎ ΠΎΠ·Π½Π°ΡΠ°ΡΡ ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ?
Π Π΅ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ
ΠΠΎΠ» |
ΠΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡ |
Π€Π°Π·Π° ΡΠΈΠΊΠ»Π°/Π½Π΅Π΄Π΅Π»Ρ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ |
Π Π΅ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ, ΠΠ/ΠΌΠ» |
ΠΡΠΆΡΠΊΠΎΠΉ |
— |
0 — 13600 |
|
1-12 ΠΌΠ΅Ρ. |
— |
0 — 23,5 |
|
> 1 Π³ΠΎΠ΄Π° |
— |
0 — 5,8 |
|
ΠΠ΅Π½ΡΠΊΠΈΠΉ |
— |
0 — 15740 |
|
1-12 ΠΌΠ΅Ρ. |
— |
0 — 64,3 |
|
> 1 Π³ΠΎΠ΄Π° |
ΠΠ΅ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ |
0 — 5,8 |
|
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (Π΄ΠΎ 12 Π½Π΅Π΄.) |
0 — 15 |
||
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (12-15 Π½Π΅Π΄.) |
15 — 60 |
||
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (15-19 Π½Π΅Π΄.) |
15 — 95 |
||
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (19-24 Π½Π΅Π΄. ) |
27 — 125 |
||
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (24-28 Π½Π΅Π΄.) |
52 — 140 |
||
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (28-30 Π½Π΅Π΄.) |
67 -150 |
||
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ (30-32 Π½Π΅Π΄.) |
100 — 250 |
ΠΡΠΈΡΠΈΠ½Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ Π°Π»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½Π°
ΠΠ½ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΡ:
- Π³Π΅ΠΏΠ°ΡΠΎΡΠ΅Π»Π»ΡΠ»ΡΡΠ½Π°Ρ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ½ΠΎΠΌΠ° (ΡΠ°ΠΊ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ) (Π² 70-95 % ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅Π²),
- Π³Π΅ΡΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Π°Ρ Π½Π΅ΡΠ΅ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΌΠ° (ΡΠ°ΠΊ ΡΠΈΡΠ΅ΠΊ),
- ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡΠ°Π·Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ (Π² 9 %),
- ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΉ (ΡΠ°ΠΊ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎΠ³ΠΎ, ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΈΠΊΠ°, ΠΆΠ΅Π»ΡΠ΄ΠΊΠ°, ΠΏΠΎΡΠΊΠΈ, ΠΌΠΎΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ, ΠΏΠΎΠ΄ΠΆΠ΅Π»ΡΠ΄ΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Ρ),
- ΡΠΌΠ±ΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ (ΡΠ΅ΡΠ°ΡΠΎΠΌΡ).
ΠΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΡ:
- ΠΎΡΡΡΡΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Ρ ΡΠΎΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ Π³Π΅ΠΏΠ°ΡΠΈΡ (ΡΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΈ Π½Π΅ΠΏΡΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΆΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ),
- ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠΉ Π±ΠΈΠ»ΠΈΠ°ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠΈΡΡΠΎΠ·,
- Π°Π»ΠΊΠΎΠ³ΠΎΠ»ΡΠ½Π°Ρ Π±ΠΎΠ»Π΅Π·Π½Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ,
- ΡΡΠ°Π²ΠΌΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ (ΠΈΠ»ΠΈ Ρ ΠΈΡΡΡΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΠΈ),
- Π²ΡΠΎΠΆΠ΄ΡΠ½Π½Π°Ρ ΡΠΈΡΠΎΠ·ΠΈΠ½Π΅ΠΌΠΈΡ,
- Π°ΡΠ°ΠΊΡΠΈΡ-ΡΠ΅Π»Π΅Π°Π½Π³ΠΈΡΠΊΡΠ°Π·ΠΈΡ,
- ΡΠΈΠ½Π΄ΡΠΎΠΌ ΠΠΈΡΠΊΠΎΡΡΠ° β ΠΠ»Π΄ΡΠΈΡΠ°.
ΠΠΊΡΡΠ΅ΡΡΠΊΠ°Ρ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ:
- Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡΡ Π½Π΅ΡΠ²Π½ΠΎΠΉ ΡΡΡΠ±ΠΊΠΈ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π° (ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ½ΠΎΡΠ½ΠΈΠΊΠ°, Π°Π½ΡΡΠ΅ΡΠ°Π»ΠΈΡ) (80-90 %),
- Π½Π°ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΌΠΎΡΠ΅Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ (Π²ΡΠΎΠΆΠ΄ΡΠ½Π½ΡΠΉ Π½Π΅ΡΡΠΎΠ·, ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΊΠΈΡΡΠΎΠ· ΠΏΠΎΡΠ΅ΠΊ, ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΡΠΊΠΈ, ΠΎΠ±ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΡ),
- Π°ΡΡΠ΅Π·ΠΈΡ ΠΏΠΈΡΠ΅Π²ΠΎΠ΄Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΈΠΊΠ°,
- ΠΏΡΠΏΠΎΡΠ½Π°Ρ Π³ΡΡΠΆΠ°,
- Π³Π°ΡΡΡΠΎΡΠΈΠ·ΠΈΡ (Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½Π΅ΠΉ Π±ΡΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ),
- ΡΠ΅ΡΠ°Π»ΡΠ½Π°Ρ ΡΠ΅ΡΠ°ΡΠΎΠΌΠ°,
- ΠΊΠΈΡΡΠΎΠ·Π½Π°Ρ Π³ΠΈΠ³ΡΠΎΠΌΠ°,
- Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π»ΠΈΡ,
- Π΄ΠΈΡΡΡΠ΅ΡΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°,
- ΡΠ³ΡΠΎΠΆΠ°ΡΡΠΈΠΉ Π°Π±ΠΎΡΡ,
- ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ ΠΏΠ»Π°ΡΠ΅Π½ΡΡ,
- ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π½Π°Ρ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ,
- Π½Π΅Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ ΠΎΡΡΠ΅ΠΎΠ³Π΅Π½Π΅Π·.
ΠΡΠΈΡΠΈΠ½Ρ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ Π°Π»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½Π°:
- ΡΠΈΠ½Π΄ΡΠΎΠΌ ΠΠ°ΡΠ½Π° (ΡΡΠΈΡΠΎΠΌΠΈΡ ΠΏΠΎ 21-ΠΉ Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΠΌΠ΅),
- ΡΠΈΠ½Π΄ΡΠΎΠΌ ΠΠ΄Π²Π°ΡΠ΄ΡΠ° (ΡΡΠΈΡΠΎΠΌΠΈΡ ΠΏΠΎ 18-ΠΉ Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΠΌΠ΅),
- ΡΠΈΠ½Π΄ΡΠΎΠΌ ΠΠ°ΡΠ°Ρ (ΡΡΠΈΡΠΎΠΌΠΈΡ ΠΏΠΎ 13-ΠΉ Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΠΌΠ΅),
- Π²Π½ΡΡΡΠΈΡΡΡΠΎΠ±Π½Π°Ρ Π³ΠΈΠ±Π΅Π»Ρ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°,
- ΠΏΡΠ·ΡΡΠ½ΡΠΉ Π·Π°Π½ΠΎΡ,
- ΠΎΠΆΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ.
Π‘Π½ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ ΠΠ€Π ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ ΡΡΠΈΡΠ°Π΅ΡΡΡ Π±Π»Π°Π³ΠΎΠΏΡΠΈΡΡΠ½ΡΠΌ ΠΏΡΠΈΠ·Π½Π°ΠΊΠΎΠΌ ΠΈ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΡ ΠΎΠ± ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ.
Π§ΡΠΎ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π²Π»ΠΈΡΡΡ Π½Π° ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°Ρ?
- ΠΡΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΠ°ΡΠΈΠ΅Π½ΡΠΎΠΌ ΠΏΡΠ΅ΠΏΠ°ΡΠ°ΡΠΎΠ² ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π» ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡ ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°.
- Π£ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²ΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ Π½Π΅Π³ΡΠΎΠΈΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈΠ½ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΠ€Π Π½Π° 10-15 % Π²ΡΡΠ΅ ΡΡΠ΅Π΄Π½Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ, Ρ ΠΌΠΎΠ½Π³ΠΎΠ»ΠΎΠΈΠ΄ΠΎΠ² β Π½ΠΈΠΆΠ΅.
- ΠΠ½ΡΡΠ»ΠΈΠ½-Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΡΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π±Π΅Ρ ΠΏΡΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΊ ΡΠ½ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΠ€Π Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ.
ΠΠ°ΠΆΠ½ΡΠ΅ Π·Π°ΠΌΠ΅ΡΠ°Π½ΠΈΡ
- ΠΠ»Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ΅ΡΡΠ° Π² Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠ΅ Π°ΠΊΡΡΠ΅ΡΡΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΡΠΎΡΠ½ΠΎ Π·Π½Π°ΡΡ Π³Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΉ Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°. Π£ΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ Π°Π»ΡΡΠ°-ΡΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½Π° ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΡΠ»ΡΠΆΠΈΡΡ ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΈΠ΅ΠΌ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠΈ Π½Π°ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°. ΠΡΠΈ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΠΎΡΠΊΠ»ΠΎΠ½Π΅Π½ΠΈΠΉ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ ΠΠΠ€ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΡ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΡ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ»ΡΡΡΠ°Π·Π²ΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠΈ ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ Π»Π°Π±ΠΎΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ².
- ΠΡΠΈ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ ΠΠ€Π Ρ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈ ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΠΏΠ°ΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ Π½Π° Π£ΠΠ ΠΈ Π°ΠΌΠ½ΠΈΠΎΡΠ΅Π½ΡΠ΅Π·Π΅ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ Π² Π²ΠΈΠ΄Ρ Π±ΠΎΠ»ΡΡΡΡ Π²Π΅ΡΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ Π½Π°ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΠΏΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΎΠ΄Ρ, Π½ΠΈΠ·ΠΊΠ°Ρ ΠΌΠ°ΡΡΠ° ΡΠ΅Π»Π° ΡΠ΅Π±Π΅Π½ΠΊΠ° ΠΏΡΠΈ ΡΠΎΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠΈ, Π³ΠΈΠ±Π΅Π»Ρ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Π°).
- ΠΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΠ€Π Π΄Π»Ρ ΡΠΊΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π³Π° ΠΎΠ½ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ Π² ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΉ ΠΏΠΎΠΏΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ.
- ΠΠ°ΡΠΈΠ΅Π½ΡΡ, ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡΠΈΠ΅ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΈΠ΅ Π΄ΠΎΠ·Ρ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½Π° (> 5 ΠΌΠ³/Π΄Π΅Π½Ρ), Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΡΠ΄Π°Π²Π°ΡΡ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· Π½Π΅ ΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ 8 ΡΠ°ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠ΅ΠΏΠ°ΡΠ°ΡΠ°.
Π’Π²Π΅ΡΠ΄ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠΊ. 9 ΠΎΡΠΈΠ±ΠΎΠΊ ΠΏΡΠΈ Π²Π°ΡΠΊΠ΅ ΡΠΈΡ | ΠΠ°ΡΡΠ΅Ρ-ΠΊΠ»Π°ΡΡΡ | ΠΡΡ Π½Ρ
Π‘Π²Π°ΡΠΈΡΡ ΡΠΉΡΠΎ Π΄Π»Ρ ΡΠ°Π»Π°ΡΠ° β ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠΎΡΡΠΎΠ΅ Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅, ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΠΈΠ· Π½Π°Ρ ΡΠΎΠ²Π΅ΡΡΠ°Π» Π΅Π³ΠΎ ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠ°Π·. Π’Π΅ΠΌ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΠΏΡΠΈ Π²Π°ΡΠΊΠ΅ ΡΠΈΡ ΠΌΡ ΡΠΎΠΆΠ΅ Π΄ΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π΅ΠΌ ΠΎΡΠΈΠ±ΠΊΠΈ. Π ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°Ρ ΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Ρ ΡΠΆΠ΅, ΡΠ΅ΠΌ ΠΌΠΎΠ³ Π±Ρ Π±ΡΡΡ. Π Π°ΡΡΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΠΌ, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠ΄Π΅Π»Π°ΡΡ Π²Π°ΡΠΊΡ ΡΠΈΡ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΠΉ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 1. ΠΡΡΡ ΡΠΉΡΠ°
Π’ΠΎΡΠ½Π΅Π΅, ΠΌΡΡΡ ΡΠΉΡΠ° ΡΡΠ°Π·Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΠΏΠΎΠΊΡΠΏΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π·Π°ΡΠ°Π½Π΅Π΅, Π·Π° ΠΏΠ°ΡΡ ΡΠ°ΡΠΎΠ² Π΄ΠΎ Π²Π°ΡΠΊΠΈ. ΠΠ΅Π»ΠΎ Π² ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ Π½Π° ΡΠΉΡΠ°Ρ Π΅ΡΡΡ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Π½Π°Ρ Π·Π°ΡΠΈΡΠ½Π°Ρ ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΊΠ°, Π° Π² ΡΠΊΠΎΡΠ»ΡΠΏΠ΅ Π΅ΡΡΡ ΠΏΠΎΡΡ. Π ΡΡΠ° ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΊΠ° Π½Π΅ Π΄Π°Π΅Ρ Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΠΌ ΠΏΡΠΎΠ½ΠΈΠΊΠ°ΡΡ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· ΡΡΠΈ ΠΏΠΎΡΡ Π²Π½ΡΡΡΡ, Π² ΡΠΉΡΠΎ. ΠΡΠ»ΠΈ ΡΠΉΡΠΎ ΠΏΠΎΠΌΡΡΡ, ΡΠΎ ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΊΠ° ΡΠΌΠΎΠ΅ΡΡΡ, ΠΏΠΎΡΡΠΎΠΌΡ Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠΈ ΠΎΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΡΠΈΡ, ΠΈΠ· Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΈΠΊΠ°, Ρ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΎΠ² ΠΈ ΡΠΏΠ°ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΊ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΠΏΠΎΠΏΠ°ΡΡΡ Π½Π° ΡΠΉΡΠΎ. ΠΡΡΠ°ΡΠΈ, ΠΌΡ ΠΌΠΎΠΆΠ΅ΠΌ Π½Π΅ ΡΠΌΡΡΡ ΡΡΠ°Π·Ρ Π²ΡΠ΅ Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π±ΡΠ»ΠΈ Π½Π° ΡΠΉΡΠ°Ρ , Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Ρ ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΊΠΎΠΉ. Π ΠΎΠ½ΠΈ ΠΏΠΎΠΏΠ°Π΄ΡΡ Π²Π½ΡΡΡΡ.
Π’Π°ΠΊ ΡΡΠΎ ΠΌΡΡΡ ΡΠΉΡΠΎ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ Π½Π΅ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΠΏΡΠΈΠ³ΠΎΡΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠ°ΠΊ Π²Ρ ΠΊΠ»Π°Π΄Π΅ΡΠ΅ Π΅Π³ΠΎ Π² ΠΊΠ°ΡΡΡΡΠ»Ρ ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°Π·Π±ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΠ΅ Π½Π° ΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΠ΄Ρ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 2. ΠΠΎΡΡΡΠ°Ρ Π²ΠΎΠ΄Π°
Π―ΠΉΡΠ° Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°ΡΡ Π² Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΡΡ Π²ΠΎΠ΄Ρ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ½ΠΈ Π½Π΅ ΡΡΠ΅ΡΠ½ΡΠ»ΠΈ. ΠΠ΅Π»ΠΎ Π² ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ΅ ΡΠΉΡΠΎ ΠΈΡΠΏΡΡΡΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ½ΡΠΉ ΡΡΡΠ΅ΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠΎΠΏΠ°Π΄Π°Π½ΠΈΠΈ Π² ΠΊΠΈΠΏΡΡΠΎΠΊ, Π° Π² Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π²ΠΎΠ΄Π΅ ΡΠΉΡΠΎ ΡΠΎΠ³ΡΠ΅Π²Π°Π΅ΡΡΡ ΠΏΠΎΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½Π½ΠΎ, Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Ρ Π²ΠΎΠ΄ΠΎΠΉ, ΠΈ Π²Π΅ΡΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΡΠ΅ΡΠΈΠ½Ρ ΡΠΌΠ΅Π½ΡΡΠ°Π΅ΡΡΡ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 3. ΠΠ°Π»ΠΈΡΡ ΠΌΠ°Π»ΠΎ Π²ΠΎΠ΄Ρ
ΠΡΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡΡ ΡΠΉΡΠ° Π½Π΅ ΠΏΠΎΠΊΡΡΡΠ° Π²ΠΎΠ΄ΠΎΠΉ, ΡΠΎ ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΡΡΡ Π½Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ. ΠΠΎΠ³Π΄Π° Π±ΡΠ΄Π΅ΡΠ΅ ΡΠΈΡΡΠΈΡΡ, ΡΠ²ΠΈΠ΄ΠΈΡΠ΅, ΡΡΠΎ Π±ΠΎΡΠΎΠΊ ΡΠΉΡΠ° ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΈΠΉ. ΠΡΠΆΠ½ΠΎ, ΡΡΠΎΠ±Ρ Π²ΠΎΠ΄Π° ΠΏΠΎΠΊΡΡΠ²Π°Π»Π° ΡΠΉΡΠ° Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠ΅ΠΌ Π½Π° ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΏΠ°Π»Π΅Ρ, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ½Π° Π±ΡΠ΄Π΅Ρ Π±ΡΡΡΡΠΎ Π²ΡΠΊΠΈΠΏΠ°ΡΡ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 4. Π―ΠΉΡΠ° ΠΈΠ· Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΈΠΊΠ°
ΠΡΠ»ΠΈ Π²Ρ Π±Π΅ΡΠ΅ΡΠ΅ Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ ΡΠΉΡΠ°, ΡΠΎ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π½Π΅ ΡΡΠΏΠ΅ΡΡ ΡΠΎΠ³ΡΠ΅ΡΡΡΡ Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Ρ Π²ΠΎΠ΄ΠΎΠΉ Π² ΠΊΠ°ΡΡΡΡΠ»ΡΠΊΠ΅ ΠΈ Π² ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅ ΡΡΠ΅ΡΠ½ΡΡΡ. ΠΠΎΡΡΠΎΠΌΡ Π»ΡΡΡΠ΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΡ ΡΠΉΡΠ° ΠΈΠ· Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΈΠΊΠ° Π·Π° ΠΏΠΎΠ»ΡΠ°ΡΠ°-ΡΠ°Ρ Π΄ΠΎ Π²Π°ΡΠΊΠΈ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 5. Π‘ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π±ΡΡΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅
ΠΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΉΡΠ° Π·Π°ΠΊΠΈΠΏΠ΅Π»ΠΈ, Π»ΡΡΡΠ΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠ±Π°Π²ΠΈΡΡ ΠΎΠ³ΠΎΠ½Ρ Π΄ΠΎ ΡΡΠ΅Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ, ΡΡΠΎΠ±Ρ Π²ΠΎΠ΄Π° Π½Π΅ Π±ΡΡΠ»ΠΈΠ»Π° ΡΠ»ΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ, Π° ΡΠΉΡΠ° Π½Π΅ Π±ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Π΄ΡΡΠ³ ΠΎ Π΄ΡΡΠ³Π° ΠΈ ΡΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΠΊΠ°ΡΡΡΡΠ»ΠΈ, Π²Π΅Π΄Ρ ΠΎΠ½ΠΈ Π²ΡΠ΅ Π΅ΡΠ΅ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΡΡΠ΅ΡΠ½ΡΡΡ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 6. ΠΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠΈΡΡ
ΠΠΎΠ³Π΄Π° ΠΌΡ ΡΠ°Π·ΡΠ΅Π·Π°Π΅ΠΌ ΡΠΉΡΠΎ, ΡΠ²Π°ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ Π²ΠΊΡΡΡΡΡ, ΡΠΎ ΡΠ°ΡΡΠΎ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΡΡ, ΡΡΠΎ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠΊΡΡΠ»ΡΡ Π»Π΅Π³ΠΊΠΈΠΌ ΡΠ΅ΡΠΎ-ΡΠΈΠ½ΠΈΠΌ Π½Π°Π»Π΅ΡΠΎΠΌ. ΠΡΠΎ ΠΏΡΠΈΠ·Π½Π°ΠΊ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΡΡΠΎ ΡΠΉΡΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠΈΠ»ΠΈ. Π’Π°ΠΊΠΎΠΉ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠΊ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Ρ Π½Π΅ ΡΠ»ΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ, Π½ΠΎ Π²ΡΠ΅ ΠΆΠ΅ Π½Π΅ΠΏΡΠΈΡΡΠ½ΡΠΉ Π·Π°ΠΏΠ°Ρ ΡΠ΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΎΡΠΎΠ΄Π°, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π½Π°ΡΠΈΠ½Π°Π΅Ρ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΡΡΡΡ ΠΏΡΠΈ Π΄ΠΎΠ»Π³ΠΎΠΉ Π²Π°ΡΠΊΠ΅. Π ΡΠΎΠΌΡ ΠΆΠ΅ ΡΠ°ΠΊΠΎΠ΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΡΠΉΡΠΎ ΡΠ΅ΡΡΠ΅Ρ ΡΠ²ΠΎΠΈ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΡΠ΅ ΡΠ²ΠΎΠΉΡΡΠ²Π°. ΠΠΎΡΡΠΎΠΌΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π·Π°ΠΊΠΈΠΏΠ°Π½ΠΈΡ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ Π²Π°ΡΠΈΡΡ ΡΠΉΡΠΎ Π½Π΅ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅ 8-10 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ: ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΡΡΡ ΠΊΡΡΡΡΠΌ, Π½ΠΎ Π½Π΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 7. ΠΠ°Π±ΡΡΡ
ΠΡΠΎ ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎ, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π²ΠΎΠ΄Π° Π² ΠΊΠ°ΡΡΡΡΠ»ΡΠΊΠ΅ Ρ ΡΠΉΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΡΠΎΡΡΠΎ Π²ΡΠΊΠΈΠΏΠ°Π΅Ρ, ΠΎΠ½ΠΈ Π½Π°ΡΠΈΠ½Π°ΡΡ Π³ΠΎΡΠ΅ΡΡ, Π½Π΅ΠΏΡΠΈΡΡΠ½ΠΎ ΠΏΠ°Ρ Π½ΡΡΡ, ΡΠΊΠΎΡΠ΅Π΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ, ΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠ΄Π΅ΡΡΡ Π²ΡΠΊΠΈΠ½ΡΡΡ. ΠΡΠ΅ ΡΠΊΠΎΡΠ»ΡΠΏΡ ΡΠΈΡ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΡΠ°Π·ΠΎΡΠ²Π°ΡΡ, ΠΈ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΈΡΠΏΠ°ΡΠΊΠ°ΡΡ ΠΊΡΡ Π½Ρ. Π’Π°ΠΊ ΡΡΠΎ Π»ΡΡΡΠ΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΏΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΡΠ°ΠΉΠΌΠ΅Ρ, Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, Π½Π° ΡΠ΅Π»Π΅ΡΠΎΠ½Π΅, ΡΡΠΎΠ±Ρ Π½Π΅ ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΡΠΈΡΡ ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½Ρ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ½ΡΡΡ ΡΠΉΡΠ° Ρ ΠΏΠ»ΠΈΡΡ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 8. ΠΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ Π² Π²ΠΎΠ΄Π΅
Π§Π°ΡΡΠΎ ΠΌΡ ΠΏΡΠΎΡΡΠΎ Π²ΡΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅ΠΌ ΠΎΠ³ΠΎΠ½Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΠΊΠ°ΠΊ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π²Π°ΡΠΊΠΈ ΠΈΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΠΎ, ΠΈ Π·Π°Π½ΠΈΠΌΠ°Π΅ΠΌΡΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌΠΈ Π΄Π΅Π»Π°ΠΌΠΈ. Π ΡΠΉΡΠ° ΠΎΡΡΡΠ²Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΌΠΈ. ΠΡΠΎ Π½Π΅ ΡΠ»ΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ. ΠΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΡ , ΡΠΉΡΠ° Π² Π³ΠΎΡΡΡΠ΅ΠΉ Π²ΠΎΠ΄Π΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ (ΡΠΌ. ΠΏΡΠ½ΠΊΡ β 6 ), Π° Π²ΠΎ-Π²ΡΠΎΡΡΡ , ΠΎΠ½ΠΈ Π±ΡΠ΄ΡΡ ΠΏΠ»ΠΎΡ ΠΎ ΡΠΈΡΡΠΈΡΡΡΡ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΊΠ° β 9. Π§ΠΈΡΡΠΈΡΡ Π³ΠΎΡΡΡΠΈΠΌΠΈ
ΠΡΠ»ΠΈ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΌΠ°Π»ΠΎ, Ρ ΠΎΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΡΠΎ ΡΠ²Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΉΡΠ° Π±ΡΡΡΡΠΎ ΠΎΡΠΈΡΡΠΈΡΡ ΠΈ Π½Π°ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ. ΠΡΠΎ ΠΏΠ»ΠΎΡ Π°Ρ ΠΈΠ΄Π΅Ρ. ΠΠΎΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΠΉΡΠ° ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΠ»ΠΎΡ ΠΎ ΡΠΈΡΡΡΡΡΡ. ΠΠ»Π΅Π½ΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ ΡΠΊΠΎΡΠ»ΡΠΏΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΈΠΏΠ»ΠΈ ΠΊ Π½Π΅ΠΉ ΠΈ ΠΎΡΡΡΠ²Π°ΡΡΡΡ ΠΎΡ ΡΠΉΡΠ° Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Ρ ΠΊΡΡΠΎΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΊΠΎΡΠ»ΡΠΏΠ° Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ ΠΎΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ»Π°, ΡΠΉΡΠΎ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΡΡΡΠ΄ΠΈΡΡ Π² Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ Π²ΠΎΠ΄Π΅.
Π‘Π°Π»Π°Ρ Ρ ΠΊΡΠ°Π±ΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ ΠΏΠ°Π»ΠΎΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ Π² ΡΠΉΡΠ΅
Π€ΠΎΡΠΎ: Shutterstock.com- 6 ΡΠΈΡ
- 1 ΡΠΏΠ°ΠΊΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΊΡΠ°Π±ΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΠ°Π»ΠΎΡΠ΅ΠΊ
- 1 ΠΎΠ³ΡΡΠ΅Ρ
- ΠΠ°ΠΉΠΎΠ½Π΅Π·
- ΠΠ΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π²Π΅ΡΠΎΡΠ΅ΠΊ ΡΠΊΡΠΎΠΏΠ°
Π¨Π°Π³ 1. Π―ΠΉΡΠ° ΠΎΡΠ²Π°ΡΠΈΡΡ Π²ΠΊΡΡΡΡΡ, ΠΎΡΡΡΠ΄ΠΈΡΡ, ΠΎΡΠΈΡΡΠΈΡΡ.
Π¨Π°Π³ 2. Π―ΠΉΡΠ° ΡΠ°Π·ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ ΠΏΠΎΠΏΠΎΠ»Π°ΠΌ, ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΠΈΡΡ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΊΠΈ ΠΎΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², Π΄Π΅Π»Π°ΡΡ ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ Π°ΠΊΠΊΡΡΠ°ΡΠ½ΠΎ, ΡΠ°ΠΊ, ΡΡΠΎΠ±Ρ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅Π΄ΠΈΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ.
Π¨Π°Π³ 3. ΠΡΠ°Π±ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΏΠ°Π»ΠΎΡΠΊΠΈ ΠΈ ΠΎΠ³ΡΡΠ΅Ρ Π½Π°ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΌΠ΅Π»ΠΊΠΎ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡ, ΡΠ°ΡΠΊΡΠΎΡΠΈΡΡ ΡΡΠ΄Π° ΠΆΠ΅ 5 ΠΆΠ΅Π»ΡΠΊΠΎΠ².
Π¨Π°Π³ 4. ΠΡΠ΅Π½Ρ ΠΌΠ΅Π»ΠΊΠΎ Π½Π°ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ ΡΠΊΡΠΎΠΏ, Π²ΡΠ΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡ, Π·Π°ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΠΌΠ°ΠΉΠΎΠ½Π΅Π·ΠΎΠΌ.
Π¨Π°Π³ 5. ΠΠΎΡΠΎΠ»ΠΈΡΡ ΠΈ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΡΠΈΡΡ, Π΅ΡΠ»ΠΈ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ.
Π¨Π°Π³ 6. Π Π°Π·Π»ΠΎΠΆΠΈΡΡ ΡΠ°Π»Π°Ρ ΠΏΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½ΠΊΠ°ΠΌ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°.
Π¨Π°Π³ 7. Π―ΠΉΡΠ° Π²ΡΠ»ΠΎΠΆΠΈΡΡ Π½Π° Π±Π»ΡΠ΄ΠΎ, ΡΠ°ΡΠΊΡΠΎΡΠΈΡΡ ΡΠ²Π΅ΡΡ Ρ ΠΎΡΡΠ°Π²ΡΠΈΠ΅ΡΡ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΊΠΈ, ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΡΡΠΏΠ°ΡΡ Π·Π΅Π»Π΅Π½ΡΡ.
ΠΠ΅Π³Π΅ΡΠ°ΡΠΈΠ°Π½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ°ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΉΡΠ°
Π€ΠΎΡΠΎ: Shutterstock.com- 6 ΡΠΈΡ
- ΒΌ Π±ΠΎΠ»Π³Π°ΡΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΡΠ°
- 2-3 Π²Π΅ΡΠΎΡΠΊΠΈ ΠΊΠΈΠ½Π·Ρ
- 4-5 ΠΊΡΡΠΆΠΎΡΠΊΠΎΠ² ΡΡΠΊΠΈΠ½ΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ°Π±Π°ΡΠΊΠ°
- 1 Π·ΡΠ±. ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΊΠ°
- ΠΠ°ΡΠ»ΠΎ ΡΠ°ΡΠΈΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ΅
- ΠΠΎΡΡΠΈΡΠ°
- Π‘ΠΎΠ»Ρ
- ΠΠ°ΠΏΡΠΈΠΊΠ°
Π¨Π°Π³ 1. Π―ΠΉΡΠ° ΠΎΡΠ²Π°ΡΠΈΡΡ, ΠΎΡ Π»Π°Π΄ΠΈΡΡ, ΠΎΡΠΈΡΡΠΈΡΡ. Π Π°Π·ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ ΠΏΠΎΠΏΠΎΠ»Π°ΠΌ.
Π¨Π°Π³ 2. Π¦ΡΠΊΠΈΠ½ΠΈ ΠΎΠ±ΠΆΠ°ΡΠΈΡΡ Π² ΠΌΠ°ΡΠ»Π΅, ΡΠ½ΡΡΡ Π½Π° Π±ΡΠΌΠ°ΠΆΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ΅Π½ΡΠ΅, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ±ΡΠ°ΡΡ Π»ΠΈΡΠ½Π΅Π΅ ΠΌΠ°ΡΠ»ΠΎ, ΠΏΠΎΡΠΎΠΌ ΠΏΠΎΡΡΠΏΠ°ΡΡ Π½Π°ΡΡΠ±Π»Π΅Π½Π½ΡΠΌ ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΊΠΎΠΌ ΠΈ Π·Π΅Π»Π΅Π½ΡΡ. ΠΠΎΡΠΎΠ»ΠΈΡΡ.Β
Π¨Π°Π³ 3. ΠΠ°ΡΠ΅Π½ΡΠΉ ΡΡΠΊΠΈΠ½ΠΈ Π½Π°ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ Π½Π΅Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π»ΠΎΠΌΡΠΈΠΊΠ°ΠΌΠΈ.
Π¨Π°Π³ 4. ΠΠ΅Π»ΠΊΠΎ Π½Π°ΡΠ΅Π·Π°ΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ ΠΈ ΠΎΠ±ΠΆΠ°ΡΠΈΡΡ Π² ΠΌΠ°ΡΠ»Π΅ ΠΈΠ·-ΠΏΠΎΠ΄ ΡΡΠΊΠΈΠ½ΠΈ.
Π¨Π°Π³ 5. ΠΠ΅Π»ΡΠΊΠΈ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΡΠ΅ΡΡ Ρ 1 Ρ. Π». ΡΠ°ΡΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ°ΡΠ»Π° ΠΈ Π³ΠΎΡΡΠΈΡΠ΅ΠΉ Π½Π° ΠΊΠΎΠ½ΡΠΈΠΊΠ΅ Π½ΠΎΠΆΠ° (ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²Π·ΡΡΡ ΠΌΠ°ΠΉΠΎΠ½Π΅Π·).Β
Π¨Π°Π³ 6. ΠΠΎΠ±Π°Π²ΠΈΡΡ Π² ΠΆΠ΅Π»ΡΠΊΠΈ ΠΎΠ±ΠΆΠ°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈ.Β
Π¨Π°Π³ 7. ΠΠ°ΡΠΈΠ½ΠΈΡΡ ΡΠΌΠ΅ΡΡΡ ΡΠΉΡΠ°. ΠΠΎΡΡΠΏΠ°ΡΡ ΠΏΠ°ΠΏΡΠΈΠΊΠΎΠΉ.
Π³ΠΎΡΠΎΠ΄ Π² ΠΠ΅Π»ΠΈΠΊΠΎΠ±ΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈ Β«ΡΠ΅ΡΡΠΎΡΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»Π°Β» Π±Π΅Π»ΠΊΠ° (ΡΠΎΡΠΎ)
ΠΠΎ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΆΡΡΠ½Π°Π»ΠΈΡΡΠΎΠ², Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Π½Π°ΠΏΠ°Π΄Π°Π»Π° Π½Π° Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΉ, ΠΏΠ΅Π½ΡΠΈΠΎΠ½Π΅ΡΠΎΠ² ΠΈ Π΄ΠΎΠΌΠ°ΡΠ½ΠΈΡ ΠΏΠΈΡΠΎΠΌΡΠ΅Π². ΠΠΉ Π΄Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ·Π²ΠΈΡΠ΅ ΠΠΎΠ»ΠΎΡΠΊΠ° Π² ΡΠ΅ΡΡΡ Π·Π»ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΡΠΎΠ½Π°ΠΆΠ° ΠΈΠ· ΡΠΈΠ»ΡΠΌΠ° «ΠΡΠ΅ΠΌΠ»ΠΈΠ½Ρ».
Π Π½Π΅Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΎΠΌ Π³ΠΎΡΠΎΠ΄ΠΊΠ΅ Π² Π£ΡΠ»ΡΡΠ΅ ΡΠ»ΡΡΠΈΠ»ΠΎΡΡ Π§Π. ΠΠ΅Π»ΠΊΠ° Π½Π°ΡΠ°Π»Π° Π°ΡΠ°ΠΊΠΎΠ²Π°ΡΡ Π»ΡΠ΄Π΅ΠΉ. ΠΠ° Π΄Π²ΠΎΠ΅ ΡΡΡΠΎΠΊ Π΅ΠΉ ΡΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡ ΠΏΠΎΠΊΡΡΠ°ΡΡ 18 ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ, Π° ΠΏΠΎΡΠΎΠΌ Π³ΡΡΠ·ΡΠ½Π° ΠΏΠΎΠΉΠΌΠ°Π»ΠΈ, ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π΅Ρ Mailonline.
Π§ΠΈΡΠ°ΠΉΡΠ΅ Π»ΡΡΡΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈΠ°Π»Ρ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»Π° Π½Π° ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΠ΅ «Π€ΠΎΠΊΡΡ. ΠΠΈΡ» Π²Β Facebook
ΠΡΠΌΠ΅ΡΠ°Π΅ΡΡΡ, ΡΡΠΎ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡΠ½ΠΎΠ΅ Π½Π°ΠΏΠ°Π΄Π°Π»ΠΎ Π½Π° Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΉ, ΠΏΠ΅Π½ΡΠΈΠΎΠ½Π΅ΡΠΎΠ², Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π΄ΠΎΠΌΠ°ΡΠ½ΠΈΡ ΠΏΠΈΡΠΎΠΌΡΠ΅Π² Π² Π³ΠΎΡΠΎΠ΄ΠΊΠ΅ ΠΠ°ΠΊΠ»ΠΈ Π½Π° ΡΠ΅Π²Π΅ΡΠΎ-Π²ΠΎΡΡΠΎΠΊΠ΅ Π£ΡΠ»ΡΡΠ°. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, Π±Π΅Π»ΠΊΡ ΠΏΡΠΎΠ·Π²Π°Π»ΠΈ ΠΏΠΎ ΠΏΡΠΎΠ·Π²ΠΈΡΡ ΠΠΎΠ»ΠΎΡΠΊΠ° Π² ΡΠ΅ΡΡΡ Π·Π»ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΡΠΎΠ½Π°ΠΆΠ° ΠΈΠ· ΡΠΈΠ»ΡΠΌΠ° «ΠΡΠ΅ΠΌΠ»ΠΈΠ½Ρ».
Π ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΎΠ², Π³ΡΡΠ·ΡΠ½Π° ΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π°Π»ΠΈ Π² ΠΠΎΡΠΎΠ»Π΅Π²ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΠ²ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΆΠ΅ΡΡΠΎΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Ρ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡΠ½ΡΠΌΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π±Π»Π°Π³ΠΎΡΠ²ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ, ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΉ Π² ΠΠ½Π³Π»ΠΈΠΈ ΠΈ Π£ΡΠ»ΡΡΠ΅. ΠΠ½ΡΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎ, ΡΡΠΎ ΠΆΠ΅Π½ΡΠΈΠ½Π°, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ»Π° Π·Π²Π΅ΡΡ, ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π±ΡΠ»Π° ΠΏΠΎΠΊΡΡΠ°Π½Π°. ΠΠ°ΠΊ ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π»Π°ΡΡ ΠΏΠΎΠ·ΠΆΠ΅, Π±Π΅Π»ΠΊΡ ΡΡΡΠΏΠΈΠ»ΠΈ, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ Π΅Π΅ Π½Π΅Π»ΡΠ·Ρ Π±ΡΠ»ΠΎ Π²Π΅ΡΠ½ΡΡΡ Π² ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ Π΄ΠΈΠΊΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Ρ ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½Ρ.
ΠΠ΅Π»ΠΊΠ° ΠΏΠΎ ΠΊΠ»ΠΈΡΠΊΠ΅ «ΠΠΎΠ»ΠΎΡΠΊΠ°» ΠΏΠΎΠΊΡΡΠ°Π»Π° 18 ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ [+β]ΠΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ, Π² 2019 Π³ΠΎΠ΄Ρ Π² Π£ΡΠ»ΡΡΠ΅ Π±ΡΠ» ΠΏΡΠΈΠ½ΡΡ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π·Π°ΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠ» Π²ΡΠΏΡΡΠΊΠ°ΡΡ ΡΠ΅ΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ Π² Π΄ΠΈΠΊΡΡ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Ρ.
Π Π°Π½Π΅Π΅ ΡΡΠ°Π»ΠΎ ΠΈΠ·Π²Π΅ΡΡΠ½ΠΎ, ΡΡΠΎ Π² ΠΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈ ΠΏΠ»Π°Π½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΎΡΡ Π½Π°ΠΊΠΎΡΠΌΠΈΡΡ ΡΠ΅ΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΎΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ°ΡΠ΅ΠΏΡΠΈΠ²ΠΎΠΌ, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈΡ ΡΠ°Π·Π²Π΅Π»ΠΎΡΡ ΡΠ»ΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ.
ΠΠ°ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΠΌ, ΡΡΠΎ Π΄Π°Π½Π½ΡΠΉ Π²ΠΈΠ΄ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ Π±ΡΠ» ΠΏΡΠΈΠ²Π΅Π·Π΅Π½ Π² ΠΠ΅Π»ΠΈΠΊΠΎΠ±ΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΡ ΠΈΠ· Π‘Π΅Π²Π΅ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΠΌΠ΅ΡΠΈΠΊΠΈ. Π‘Π΅ΠΉΡΠ°Ρ Π² ΠΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠΈ ΠΎΠ±ΠΈΡΠ°ΡΡ ΠΎΠΊΠΎΠ»ΠΎ 2,5 ΠΌΠΈΠ»Π»ΠΈΠΎΠ½Π° ΡΠ΅ΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ.
Π Π°Π½Π΅Π΅ ΠΌΡ ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π»ΠΈ, ΡΡΠΎ Π½Π° ΠΎΡΡΡΠΎΠ²Π΅ Π ΠΎΠΆΠ΄Π΅ΡΡΠ²Π° ΠΊΡΠ°Π±Ρ ΡΠΎΠ²Π΅ΡΡΠΈΠ»ΠΈ Π΅ΠΆΠ΅Π³ΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΠΌΠΈΠ³ΡΠ°ΡΠΈΡ, Π° ΠΌΠ΅ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΠΆΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ ΠΏΠΎΡΡΠΈΠ»ΠΈ Π² ΡΠΎΡΡΠ΅ΡΠΈ ΡΠΎΡΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΊΡΠ°Π±ΠΎΠ² Π½Π° Π΄Π²Π΅ΡΡΡ Π΄ΠΎΠΌΠΎΠ², Π² ΠΊΠ»Π°ΡΡΠ°Ρ , ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½Π°Ρ ΠΈ Π½Π° ΠΊΡΡ Π½ΡΡ .
ΠΠ°Π½Π°Π΄ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΡΠΎΠ»ΠΈΠΊΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π±ΠΎΠ»Π΅ΡΡ ΡΠΈΡΠΈΠ»ΠΈΡΠΎΠΌ Π²ΡΠΌΠΈΡΠ°ΡΡ ΠΎΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π΄ΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΡ.
Π€ΠΎΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ — ΠΎΠ±Π·ΠΎΡ | ScienceDirect Topics
ΠΠ΅Π»Π΅Π½ΡΠΉ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΈΠ· ΠΌΠ΅Π΄ΡΠ·Ρ ΠΈ Π΅Π³ΠΎ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅
ΠΠ΅Π»Π΅Π½ΡΠΉ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ (GFP) Π±ΡΠ» Π²ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΠ΅ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ Π² 1960-Ρ ΠΈ 1970-Ρ Π³ΠΎΠ΄Π°Ρ Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Ρ Π»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΌ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠΌ aequorin ΠΈΠ· Aequorea victoria (Shimomura et al., 1962). Π€Π»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ GFP Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ°Π΅Ρ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΡΠΊΠΊΠΎΡΠΈΠ½ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ Ρ ΠΈΠΎΠ½Π°ΠΌΠΈ Ca 2+ , ΡΡΠΎ Π²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠΈΠ½Π΅Π΅ ΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΈ ΡΠ°ΡΡΡ ΡΡΠΎΠΉ Π»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π°Π΅ΡΡΡ GFP, ΡΠ°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ ΠΏΡΠ΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠΈΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ Π² Π·Π΅Π»Π΅Π½ΡΠΉ. ΠΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΠΈ GFP ΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈΡΡ Π² ΡΠ΅Π½ΡΡΠ΅ Π²Π½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΡ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΡΠ³Π»Π°Ρ ΠΡΠ°ΡΠ΅Ρ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π» ΠΈ ΡΠ΅ΠΊΠ²Π΅Π½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π» Π³Π΅Π½ GFP Π΄ΠΈΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠΏΠ° Π² 1992 Π³ΠΎΠ΄Ρ. GFP — ΡΡΠΎ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, ΡΠΎΡΡΠΎΡΡΠΈΠΉ ΠΈΠ· 238 Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ½ΡΡ ΠΎΡΡΠ°ΡΠΊΠΎΠ², ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠ²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΡΠΊΠΎ-Π·Π΅Π»Π΅Π½ΡΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ Π² ΡΠΈΠ½Π΅ΠΌ ΠΈ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠ΅. ΠΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΡΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΡΡ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΡΡ Π·Π΅Π»Π΅Π½ΡΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ, Π½ΠΎ Π² ΡΡΠΎΠΌ ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ ΠΎΡ ΠΌΠ΅Π΄ΡΠ·Ρ Aequorea victoria . ΠΡΠΎ ΡΡΠ΅Π·Π²ΡΡΠ°ΠΉΠ½ΠΎ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΈ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠΎΠ½ ΡΠ°ΡΡΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ ΡΠ΅ΠΏΠΎΡΡΠ΅ΡΠ° Π΄Π»Ρ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ Π³Π΅Π½ΠΎΠ² ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π½Π° Π·Π΅Π»Π΅Π½ΠΎΠΉ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ Π²ΠΎ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ Π±Π°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠΈ, Π΄ΡΠΎΠΆΠΆΠΈ ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠ΅ Π³ΡΠΈΠ±Ρ, ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΡΠ±, ΡΠ°ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ, ΠΌΡΡ ΠΈ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ , ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π±ΡΠ΄ΡΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ. Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ Π±ΠΈΠΎΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠΎΠ² (Soboleski et al., 2005).
Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠΈΡΡ ΠΏΠΎΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅, ΡΠ°Π·Π½ΡΠ΅ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΠΈ ΡΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠ°Π·Π½ΡΠ΅ ΠΌΡΡΠ°Π½ΡΡ GFP. ΠΠ΄Π½ΠΎΡΠΎΡΠ΅ΡΠ½Π°Ρ ΠΌΡΡΠ°ΡΠΈΡ ΡΠ»ΡΡΡΠΈΠ»Π° ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊΠΈ GFP, ΡΡΠΎ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅Π»ΠΎ ΠΊ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ, ΡΠΎΡΠΎΡΡΠ°Π±ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΡΠ΄Π²ΠΈΠ³Ρ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΈΠΊΠ° ΡΠΊΡΡΠΈΠ½ΠΊΡΠΈΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΠΌ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊΠ°ΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΡΡ Π½Π°Π±ΠΎΡΠΎΠ² ΡΠΈΠ»ΡΡΡΠΎΠ² FITC, ΡΠ΅ΠΌ ΡΠ°ΠΌΡΠΌ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠΈΠ²Π°Ρ ΠΏΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΠΎΡΡΡ GFP. ΠΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΠΌΡΡΠ°Π½ΡΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΎΠΊΡΠ°ΡΠΊΠΈ, Π² ΡΠ°ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΡΠΈΠ½ΠΈΠΉ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ (EBFP), Π³ΠΎΠ»ΡΠ±ΠΎΠΉ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ (ECFP), ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° (YFP) ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ BFP.ΠΠ΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΡΠ΅ΠΏΠΎΡΡΠ΅ΡΡ FRET, ΡΡΠ²ΡΡΠ²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΡΠΌ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΌ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Π°ΠΌ, ΡΠ°ΠΊΠΈΠΌ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΊΠ°Π»ΡΡΠΈΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³Π»ΡΡΠ°ΠΌΠ°Ρ, ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΡ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠΈΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΡΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², Π΄ΠΈΠΌΠ΅ΡΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ ΡΠ΅ΡΠ΅ΠΏΡΠΎΡΠΎΠ² ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ°ΠΌ, ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°ΡΡ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ Π² ΡΠ΅Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠΌ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ (Π§ΡΠ΄Π°ΠΊΠΎΠ² ΠΈ Π΄Ρ., 2010). GFP ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΡΠΈΠΏΠΈΡΠ½ΡΡ Ξ²-ΡΠΈΠ»ΠΈΠ½Π΄ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΡ, ΡΠΎΡΡΠΎΡΡΡΡ ΠΈΠ· ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ξ²-Π»ΠΈΡΡΠ° Ρ Ξ±-ΡΠΏΠΈΡΠ°Π»ΡΡ, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠ΅ΠΉ ΠΊΠΎΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΡΠΉ Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΡ 4- (ΠΏ-Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΠΊΡΠΈΠ±Π΅Π½Π·ΠΈΠ»ΠΈΠ΄Π΅Π½) ΠΈΠΌΠΈΠ΄Π°Π·ΠΎΠ»ΠΈΠ΄ΠΈΠ½-5-ΠΎΠ½ (HBI), ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΠΏΡΠΎΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· ΡΠ΅Π½ΡΡ.Π ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ½ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠ°ΡΠΊΠ°ΡΠ° GFP HBI Π½Π΅ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΌ; ΡΡΠΎ ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ Π² ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΌ Π² Π½Π΅ΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΎΡΠΌΠ΅ Π² GFP Π΄ΠΈΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠΏΠ°, ΡΡΠΎ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠ³Π°Π΅ΡΡΡ ΠΏΠΎΡΡΡΡΠ°Π½ΡΠ»ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ, Π½Π°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΡΠΎΠ·ΡΠ΅Π²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΡΠ΅ΡΠΊΠ° Π²ΠΎΠ΄ΠΎΡΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Π΅ΠΉ ΠΈ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½ΠΎΠ² Ρ ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ ΡΠ΅ΠΏΡΠΌΠΈ Π²Π»ΠΈΡΡΡ Π½Π° ΡΠ²Π΅Ρ, ΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΠΈ ΡΠΎΡΠΎΡΡΠ°Π±ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΡΡΡ GFP ΠΈ Π΅Π³ΠΎ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΡΠΈΡΠ»Π΅Π½Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½ΡΡ . ΠΠ°ΡΠΈΡΠ° ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ Ρ ΡΠΎΠΌΠΎΡΠΎΡΠ° ΠΎΡ ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π²ΠΎΠ΄ΠΎΠΉ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠ³Π°Π΅ΡΡΡ Π·Π° ΡΡΠ΅Ρ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΏΠ°ΠΊΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΡΠΈΠ»ΠΈΠ½Π΄ΡΠ°, ΠΈΡΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»Ρ (Fei and Hughes, 2001).
GFP ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡΡΡ Π² ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Π΅ Π² Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ Π΄ΠΈΡΡΠΈΠΏΠ»ΠΈΠ½Π°Ρ . ΠΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ½Ρ ΠΏΠΎ ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΉ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Π΅ ΠΏΡΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Π² ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ°Ρ , Π½ΠΎ Π΅ΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ, ΡΠ°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ GFP, Π½Π΅ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ½Ρ ΠΏΡΠΈ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π² ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ . GFP ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΡΠΏΠ΅ΡΠΌΠ°ΡΠΎΠ·ΠΎΠΈΠ΄ΠΎΠ² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ² Ρ ΡΠ΅Π»ΡΡ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊ Π² ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Drosophila melanogaster , Π³Π΄Π΅ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡ GFP ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ ΠΌΠ°ΡΠΊΠ΅ΡΠ° ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΡΡ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊ.GFP ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠ°Ρ , ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡΠΈΡ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ°ΡΡ ΠΌΠΎΡΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ. Π Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π³Π΅Π½Ρ GFP ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π±ΡΡΡ Π²ΡΡΡΠΎΠ΅Π½Ρ Π² Π³Π΅Π½ΠΎΠΌ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ² Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡΠΈ ΠΠΠ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΠ΅Ρ ΡΠ΅Π»Π΅Π²ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΠΈΡΡΡΡΡΡ ΡΠ΅ΠΌΠΈ ΠΆΠ΅ ΡΠ΅Π³ΡΠ»ΡΡΠΎΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΡΠΌΠΈ. ΠΠΎΠΌΠ±ΠΈΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΡ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ Π²Π°ΡΠΈΠ°Π½ΡΠΎΠ² GFP — ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΡΠΉ ΡΡΡΠΊ Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΡΡ Π΅ΠΌ ΠΌΠΎΠ·Π³Π°, Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠΎΠ² ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ°Π»Π° Π½Π΅ΠΉΡΠΎΠ½Π°. GFP ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π±ΡΡΡ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΡΠΌ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΆΠΈΠ·Π½Π΅ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ Π² ΠΊΡΠΈΠΎΠ±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ.
ΠΠΈΠΎΠ»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ Π² ΠΌΠΎΡΠ΅: ΡΠΎΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ
Π€ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΈΠ·Π»ΡΡΠ°ΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΉ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ Π±ΠΈΠΎΠ»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ².Π€ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ°Π΅Ρ ΡΠ²Π΅Ρ ΠΏΡΠΎΠΏΠΎΡΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΌΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Ρ, ΠΊΠ°ΠΊ Π»ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΈΠ½, Π½ΠΎ Π΅Π³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΈΠ·Π»ΡΡΠ°ΡΡΠ°Ρ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΡ Π½Π΅ ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅Ρ Π»ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠ°Π·Ρ. Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΎΠΊΠΎΠ»ΠΎ Π΄Π²ΡΡ Π΄Π΅ΡΡΡΠΊΠΎΠ² ΡΠΈΠΏΠΎΠ² Π±ΠΈΠΎΠ»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ², ΠΎ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π² Π½Π°ΡΡΠΎΡΡΠ΅Π΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ ΠΎΠ±ΡΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π±ΠΈΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π·Π½Π°Π½ΠΈΡ, ΠΈ ΠΎΠΊΠΎΠ»ΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅ΡΠΈ ΠΈΠ· Π½ΠΈΡ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Ρ Ρ ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ½ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡΡΡ Π² ΠΌΠΎΡΡΠΊΠΈΡ ΠΎΡΠ³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°Ρ . Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΡΡ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΈΠΏΡ ΡΠΎΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²: ΡΠΎΡΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½Ρ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡΠ½ΡΡ , Π³ΡΠ΅Π±Π½Π΅Π²ΠΈΠΊΠΎΠ² ΠΈ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΡΡΠΈΠΉ Π½ΡΠΆΠ΄Π°ΡΡΡΡ Π² Ca 2+, ΡΡΠΎΠ±Ρ Π²ΡΠ·Π²Π°ΡΡ ΠΈΡ Π»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ; ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΈ Π΄Π²ΡΡΡΠ²ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠΎΠ»Π»ΡΡΠΊΠ° Pholas ΠΈ ΡΠ΅ΡΡΠΉΡΠ°ΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅ΡΠ²Ρ, ΠΏΠΎ-Π²ΠΈΠ΄ΠΈΠΌΠΎΠΌΡ, Π²ΠΎΠ²Π»Π΅ΠΊΠ°ΡΡ ΡΡΠΏΠ΅ΡΠΎΠΊΡΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΊΠ°Π»Ρ ΠΈ O2 Π² ΡΠ²ΠΎΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΈΠ·Π»ΡΡΠ°ΡΡΠΈΠ΅ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ; ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΊΡΠ΅Π²Π΅ΡΠΎΠΊ ΡΠ²ΡΠ°ΡΠ·ΠΈΠΈΠ΄ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ°Π΅Ρ ΡΠ²Π΅Ρ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ; ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠ½ΠΎΠΆΠΊΠΈ Luminodesmus, Π΅Π΄ΠΈΠ½ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠΉ ΠΈΠ·Π²Π΅ΡΡΠ½ΡΠΉ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ Π·Π΅ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ, ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅Ρ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΠ’Π€ ΠΈ Mg2 + ΠΈΡΠΏΡΡΠΊΠ°Π»ΠΈ ΡΠ²Π΅Ρ. Π§ΡΠ²ΡΡΠ²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊ Ca2 + ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡΠ½ΡΡ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠ°ΡΡΠΎ ΠΈΠ·ΡΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΈ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡΡΡ. ΠΠΎΡΡΠΎΠΌΡ ΠΎΠ½ΠΈ ΡΡΠ΅Π·Π²ΡΡΠ°ΠΉΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠΏΡΠ»ΡΡΠ½Ρ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌΠΈ ΡΠΈΠΏΠ°ΠΌΠΈ. ΠΡΠ΅ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΈ, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Ρ ΡΠΊΡΠΎΡΠΈΠ½, Π³Π°Π»ΠΈΡΡΠ°ΡΡΠΈΠ½, ΠΎΠ±Π΅Π»ΠΈΠ½ ΠΈ ΡΠΈΠ°Π»ΠΈΠ΄ΠΈΠ½, ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΡΡ ΠΌΠ°ΡΡΡ, Π±Π»ΠΈΠ·ΠΊΡΡ ΠΊ 20000, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Ρ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΠΈ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ°ΡΡ ΡΠΈΠ½ΠΈΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ Π² Π²ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠ΅ ΠΏΡΠΈ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ² Ca2 + Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΡΡ ΠΌΠ°ΡΡ. ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠΎΠ΄. ΠΠΊΠ²ΠΎΡΠΈΠ½ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΠΎΠΊΡΠΈΠ³Π΅Π½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΡΠΎΡΠΌΡ ΡΠ΅Π»Π΅Π½ΡΠ΅ΡΠ°Π·ΠΈΠ½Π° Π² ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΉ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π³ΡΡΠΏΠΏΠ΅.ΠΠΎΠ³Π΄Π° Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π‘Π°2 +, ΡΠΊΠ²ΠΎΡΠΈΠ½ ΡΠ°ΡΠΏΠ°Π΄Π°Π΅ΡΡΡ Π½Π° ΡΡΠΈ ΡΠ°ΡΡΠΈ, ΡΠΎ Π΅ΡΡΡ Π°ΠΏΠΎ-ΡΠΊΠ²ΠΎΡΠΈΠ½, ΡΠ΅Π»Π΅Π½ΡΠ΅ΡΠ°ΠΌΠΈΠ΄ ΠΈ Π‘Π2, ΡΠΎΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠΆΠ΄Π°ΡΡΡ ΠΈΡΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠ°. ΠΠΏΠΎ-ΡΠΊΠ²ΠΎΡΠΈΠ½ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΠΏΡΠ΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ Π² Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ ΡΠΊΠΊΠΎΡΠΈΠ½, Π½Π΅ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠΌΡΠΉ ΠΎΡ ΠΈΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ°, ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΠΈ Ρ ΠΈΠ·Π±ΡΡΠΊΠΎΠΌ ΡΠ΅Π»Π΅Π½ΡΠ΅ΡΠ°Π·ΠΈΠ½Π° Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠ΅ΠΌ 5 ΠΌΠ-ΠΠΠ’Π ΠΈ ΡΠ»Π΅Π΄Ρ 2-ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ°ΠΏΡΠΎΡΡΠ°Π½ΠΎΠ»Π°, Π΄Π°ΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΈ 0 Β° C. ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎ Π»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π·Π°ΡΡΠΆΠ°ΡΡ. Π Π΅Π³Π΅Π½Π΅ΡΠ°ΡΠΈΡ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡΠ½ΡΡ ΡΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΡΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, Π²Π΅ΡΠΎΡΡΠ½ΠΎ, ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ in vivo Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½Π°ΠΊΠΎΠΏΠ»Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΡΠ»Π΅Π½ΡΠ΅ΡΠ°Π·ΠΈΠ½Π°. Π€ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΊΠΈΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡΠ½ΡΡ ΠΈ ΠΈΡ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΎΡΠΌΡ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΡΠΈΠ½Π³Π° ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ² ΠΊΠ°Π»ΡΡΠΈΡ Π² Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ°Ρ , ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎ Π² ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ .
ΠΡΠΎΠΈΠ·ΠΎΡΠ»Π° ΠΎΡΠΈΠ±ΠΊΠ° ΠΏΡΠΈ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΉΠ»Π° cookie
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ. ΠΡΠ»ΠΈ Π²Π°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π½Π΅ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, Π²Ρ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡ ΡΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ.
ΠΠ°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠ° Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ° Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ° ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie
Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½, ΠΏΠΎ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΌ cookie Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ.ΠΠΈΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Ρ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠ°ΡΡΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½Ρ:
- Π Π²Π°ΡΠ΅ΠΌ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ΅ ΠΎΡΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie. ΠΠ°ΠΌ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΡΠ±ΡΠΎΡΠΈΡΡ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ ΡΠ²ΠΎΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ°, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ½ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π» ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, ΠΈΠ»ΠΈ ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΏΡΠΎΡΠΈΡΡ Π²Π°Ρ, Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅ Π»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie.
- ΠΠ°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ ΡΠΏΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ Π²Π°Ρ, Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅ Π»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, ΠΈ Π²Ρ ΠΎΡΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈΡΡ. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Ρ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΉΡΠ°, Π½Π°ΠΆΠΌΠΈΡΠ΅ ΠΊΠ½ΠΎΠΏΠΊΡ Β«ΠΠ°Π·Π°Π΄Β» ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie.
- ΠΠ°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie. ΠΡΠ»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ·ΡΠ΅Π²Π°Π΅ΡΠ΅ ΡΡΠΎ, ΠΏΠΎΠΏΡΠΎΠ±ΡΠΉΡΠ΅ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΉ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ.
- ΠΠ°ΡΠ° Π½Π° Π²Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ΅ Π² ΠΏΡΠΎΡΠ»ΠΎΠΌ.ΠΡΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡ Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°ΡΡ Π΄Π°ΡΡ Π΄ΠΎ 1 ΡΠ½Π²Π°ΡΡ 1970 Π³., Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π·Π°Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ» cookie. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΈΡΠΏΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΡΡΠΎ, ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡΠ΅ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈ Π΄Π°ΡΡ Π½Π° ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ΅.
- ΠΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ ΠΎΡΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π»ΠΎΠΊΠΈΡΡΠ΅Ρ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΡ ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie. ΠΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΠΎΡΠΊΠ»ΡΡΠΈΡΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΈ Π²Ρ ΠΎΠ΄Π΅ Π² ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ»ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ½ΡΠΌ Π°Π΄ΠΌΠΈΠ½ΠΈΡΡΡΠ°ΡΠΎΡΠΎΠΌ.
ΠΠΎΡΠ΅ΠΌΡ ΡΡΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΠΉΡΡ ΡΡΠ΅Π±ΡΡΡΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie?
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, Π·Π°ΠΏΠΎΠΌΠΈΠ½Π°Ρ, ΡΡΠΎ Π²Ρ Π²ΠΎΡΠ»ΠΈ Π² ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅ ΡΠΎ ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ Π½Π° ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏ Π±Π΅Π· ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅Ρ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ°ΠΉΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°Π» Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ΅Π°Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ, ΡΡΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π΄Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΠΎ Π½Π΅ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ»Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ.
Π§ΡΠΎ ΡΠΎΡ ΡΠ°Π½ΡΠ΅ΡΡΡ Π² ΡΠ°ΠΉΠ»Π΅ cookie?
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ Π½Π΅ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΡ Π½ΠΈΡΠ΅Π³ΠΎ, ΠΊΡΠΎΠΌΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΎΡΠ° ΡΠ΅Π°Π½ΡΠ° Π² cookie; Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠ°Ρ Π΄ΡΡΠ³Π°Ρ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ Π½Π΅ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΡΠ΅ΡΡΡ.
ΠΠ°ΠΊ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, Π² cookie-ΡΠ°ΠΉΠ»Π°Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΡΡΡΡ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π²Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅ΡΠ΅, ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΡΠ±ΠΎΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π²Ρ Π΄Π΅Π»Π°Π΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π²Π΅Π±-ΡΠ°ΠΉΡΠ°.ΠΠ°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΡΠ°ΠΉΡ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΠΈΡΡ Π²Π°ΡΠ΅ ΠΈΠΌΡ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΡΡ, ΠΏΠΎΠΊΠ° Π²Ρ Π½Π΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅ΡΠ΅ Π΅Π³ΠΎ. Π Π°Π·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π²Π΅Π±-ΡΠ°ΠΉΡΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π½Π΅ Π΄Π°Π΅Ρ ΡΡΠΎΠΌΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΡΠ±ΠΎΠΌΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΠΉΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ° ΠΊ ΠΎΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡΠΈ Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ°, ΠΈ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΠ°ΠΉΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π» ΡΠ°ΠΉΠ» cookie, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π΅Π³ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΈΡΠ°ΡΡ.
ΠΡΠΎΠΈΠ·ΠΎΡΠ»Π° ΠΎΡΠΈΠ±ΠΊΠ° ΠΏΡΠΈ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΉΠ»Π° cookie
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ. ΠΡΠ»ΠΈ Π²Π°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π½Π΅ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, Π²Ρ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡ ΡΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ.
ΠΠ°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠ° Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ° Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ° ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie
Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½, ΠΏΠΎ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΌ cookie Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ. ΠΠΈΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Ρ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠ°ΡΡΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½Ρ:
- Π Π²Π°ΡΠ΅ΠΌ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ΅ ΠΎΡΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie. ΠΠ°ΠΌ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΡΠ±ΡΠΎΡΠΈΡΡ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ ΡΠ²ΠΎΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ°, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ½ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π» ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, ΠΈΠ»ΠΈ ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΏΡΠΎΡΠΈΡΡ Π²Π°Ρ, Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅ Π»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie.
- ΠΠ°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ ΡΠΏΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ Π²Π°Ρ, Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅ Π»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, ΠΈ Π²Ρ ΠΎΡΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈΡΡ. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Ρ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΉΡΠ°, Π½Π°ΠΆΠΌΠΈΡΠ΅ ΠΊΠ½ΠΎΠΏΠΊΡ Β«ΠΠ°Π·Π°Π΄Β» ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie.
- ΠΠ°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie. ΠΡΠ»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ·ΡΠ΅Π²Π°Π΅ΡΠ΅ ΡΡΠΎ, ΠΏΠΎΠΏΡΠΎΠ±ΡΠΉΡΠ΅ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΉ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ.
- ΠΠ°ΡΠ° Π½Π° Π²Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ΅ Π² ΠΏΡΠΎΡΠ»ΠΎΠΌ.ΠΡΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡ Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°ΡΡ Π΄Π°ΡΡ Π΄ΠΎ 1 ΡΠ½Π²Π°ΡΡ 1970 Π³., Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π·Π°Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ» cookie. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΈΡΠΏΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΡΡΠΎ, ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡΠ΅ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈ Π΄Π°ΡΡ Π½Π° ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ΅.
- ΠΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ ΠΎΡΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π»ΠΎΠΊΠΈΡΡΠ΅Ρ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΡ ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie. ΠΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΠΎΡΠΊΠ»ΡΡΠΈΡΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΈ Π²Ρ ΠΎΠ΄Π΅ Π² ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ»ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ½ΡΠΌ Π°Π΄ΠΌΠΈΠ½ΠΈΡΡΡΠ°ΡΠΎΡΠΎΠΌ.
ΠΠΎΡΠ΅ΠΌΡ ΡΡΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΠΉΡΡ ΡΡΠ΅Π±ΡΡΡΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie?
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, Π·Π°ΠΏΠΎΠΌΠΈΠ½Π°Ρ, ΡΡΠΎ Π²Ρ Π²ΠΎΡΠ»ΠΈ Π² ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅ ΡΠΎ ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ Π½Π° ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏ Π±Π΅Π· ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅Ρ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ°ΠΉΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°Π» Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ΅Π°Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ, ΡΡΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π΄Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΠΎ Π½Π΅ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ»Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ.
Π§ΡΠΎ ΡΠΎΡ ΡΠ°Π½ΡΠ΅ΡΡΡ Π² ΡΠ°ΠΉΠ»Π΅ cookie?
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ Π½Π΅ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΡ Π½ΠΈΡΠ΅Π³ΠΎ, ΠΊΡΠΎΠΌΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΎΡΠ° ΡΠ΅Π°Π½ΡΠ° Π² cookie; Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠ°Ρ Π΄ΡΡΠ³Π°Ρ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ Π½Π΅ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΡΠ΅ΡΡΡ.
ΠΠ°ΠΊ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, Π² cookie-ΡΠ°ΠΉΠ»Π°Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΡΡΡΡ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π²Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅ΡΠ΅, ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΡΠ±ΠΎΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π²Ρ Π΄Π΅Π»Π°Π΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π²Π΅Π±-ΡΠ°ΠΉΡΠ°.ΠΠ°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΡΠ°ΠΉΡ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΠΈΡΡ Π²Π°ΡΠ΅ ΠΈΠΌΡ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΡΡ, ΠΏΠΎΠΊΠ° Π²Ρ Π½Π΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅ΡΠ΅ Π΅Π³ΠΎ. Π Π°Π·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π²Π΅Π±-ΡΠ°ΠΉΡΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π½Π΅ Π΄Π°Π΅Ρ ΡΡΠΎΠΌΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΡΠ±ΠΎΠΌΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΠΉΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ° ΠΊ ΠΎΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡΠΈ Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ°, ΠΈ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΠ°ΠΉΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π» ΡΠ°ΠΉΠ» cookie, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π΅Π³ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΈΡΠ°ΡΡ.
Π€ΠΎΡΠΎ-Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ-Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π² ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ
Π‘ΠΈΠ½ΡΠ΅Π· ΠΈ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π² Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ
ΠΡ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΡΠΈ Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ (ΡΠΈΡ.1a ΠΈ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅ΡΠ°Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ½Π»Π°ΠΉΠ½), ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΏΠΎ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠ΅ Π½Π°ΠΏΠΎΠΌΠΈΠ½Π°ΡΡ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½, Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½, Π½ΠΎ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Ρ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠΎΠ΅ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΡΡΠΎ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ Π΄Π°Π΅Ρ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ ΠΊΠ°ΡΠ±Π΅Π½ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠΈ Π°Π·ΠΎΡΠ°. ΠΡΠ΅ ΡΡΠΈ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ Ξ±-Π±ΡΠΎΠΌΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 16 ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ Π°Π·ΠΈΠΊΠ°ΡΠ±ΠΎΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠΌ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ»ΠΈΠ·ΠΎΠΌ Π°Π·ΠΈΠ±ΡΠΎΠΌΠΊΠ°ΡΠ±ΠΎΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ. Π₯ΠΎΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ Π² ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π°Ρ , ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΡ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π³ΡΠ°ΠΌΠΌΠΎΠ², ΡΠΎΡΠΎ-Ile Π±ΡΠ»ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΎ ΠΈΠ· ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΆΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΠΈΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ°ΡΠ΅ΡΠΈΠ°Π»Π° Π² 20 ΡΠ°Π· ΠΌΠ΅Π½ΡΡΠ΅.Π ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π· Strecker 17 , Π½Π°ΡΠΈΠ½Π°Ρ Ρ 4,4′-Π°Π·ΠΈΠΏΠ΅Π½ΡΠ°Π½Π°Π»Ρ, ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π΄Π°Π²Π°Π» ΠΆΠ΅Π»Π°Π΅ΠΌΡΠΉ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡ, Π½ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠΏΡΡΠΊΠΈ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Ile ΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈΡΡ Π±Π΅Π·ΡΡΠΏΠ΅ΡΠ½ΡΠΌΠΈ. Π€Π΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ ΡΠ°Π·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ½Π°Π½ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΠΎΠ² Π΄Π°Π²Π°Π»ΠΎ ΡΠΈΡΡΡΠΉ L-ΡΠΎΡΠΎ-Leu, L-ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΈ D-ΡΠΎΡΠΎ-Met (ΡΠΈΡ. 1b). ΠΡ Π½Π΅ Π΄Π΅Π»Π°Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠΏΡΡΠΎΠΊ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΠΈΡΡ ΡΠ½Π°Π½ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡ ΠΈ Π΄ΠΈΠ°ΡΡΠ΅ΡΠ΅ΠΎΠΌΠ΅ΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΠ»Π΅. DL-ΡΠΎΡΠΎ-Met, ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ 14 C, Π±ΡΠ» ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΎΠΌ Π¨ΡΡΠ΅ΠΊΠ΅ΡΠ° Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ [ 14 C] NaCN (ΡΠΈΠ³. 1b).
Π ΠΈΡΡΠ½ΠΎΠΊ 1: ΠΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ Π² Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ.( a ) Π‘ΡΡΡΠΊΡΡΡΡ ΡΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ²ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ, ΡΠΎΡΠΎ-Ile, ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met (ΡΠ»Π΅Π²Π°), ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ ΡΡΠ΄ΠΎΠΌ ΡΠΎ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Π½ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π°, Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π° ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° (ΡΠΏΡΠ°Π²Π°). ( b ) Π‘ΠΌΠ΅ΡΠΈ DL ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΈΡΡΡΠ΅ ΡΠ½Π°Π½ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡ (ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ) ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΎΠ½ΠΊΠΎΡΠ»ΠΎΠΉΠ½ΠΎΠΉ Ρ ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠΈ Π½Π° Ρ ΠΈΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΈΠ½Π΅. ΠΠ°ΡΠ°Π»ΠΎ ΠΈ ΡΡΠΎΠ½Ρ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»Ρ Π½Π°Ρ ΠΎΠ΄ΡΡΡΡ Π²Π½ΠΈΠ·Ρ ΠΈ Π²Π²Π΅ΡΡ Ρ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ.ΠΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠΊΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ΄ΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ (Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 1-7) ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π²ΡΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ (Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 8). ( c ) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7 Π²ΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ (Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 2 ΠΈ 4) ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ (Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 1 ΠΈ 3) [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met. ΠΠ΅Π»ΠΊΠΈ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ SDS-PAGE, Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΎΠΊΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΊΡΠΌΠ°ΡΡΠΈ ΡΠΈΠ½ΠΈΠΌ (Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 1 ΠΈ 2) ΠΈ ΡΠ»ΡΠΎΡΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ (Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 3 ΠΈ 4). ( d ) ΠΡΠ°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²Π°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ½Π°Π·ΠΎΠΉ. ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΈΠ·Π±ΡΡΠΎΠΊ Π½Π΅ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π»ΡΡΠ°ΠΌΠΈΠ½Π° ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met, ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ Π½Π°Π³ΡΠ΅Π²Π°Π»ΠΈ Ρ 7 Π½. HCl.ΠΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ Ρ ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ Π½Π° Dowex 50WX8. Π€ΡΠ°ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ½ΠΊΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π½Π° Π½Π°Π»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ, ΡΠΎΡΠΎ-Met (ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎ ΠΏΠΎΠ³Π»ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΈ 350 Π½ΠΌ) ΠΈ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ³ΡΡΠΏΠΏ (ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠΈΠΌΠΈΠ½Π°). ΠΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ ΠΏΠΎ ΡΠΎΠ½Ρ ΠΈ Π½ΠΎΡΠΌΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π΄ΠΎ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΈΠΊΠ°. ΠΠ±ΡΠ΅Π΅ Π²ΠΎΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ Π² ΡΠ»ΡΠ°ΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ½ΠΊΠΈ ΡΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ 85%.
Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΎΠ΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Met Π² Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΌΡ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠΈΠ±ΡΠΎΠ±Π»Π°ΡΡΠΎΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7 ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΌΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ Π·Π° Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΡ ΡΠ ΠΠ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°Π·, ΠΌΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΊΡΠ»ΡΡΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ΅Π΄Ρ, Π»ΠΈΡΠ΅Π½Π½ΡΡ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π° ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° (LM-2) ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΠΈΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π°, ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½Π°, ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π° ΠΈ Π²Π°Π»ΠΈΠ½Π° (LM-4). ΠΠ΅Π»ΠΊΠΈ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Π»ΠΈ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ, ΡΠ°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΌΡ ΡΠΌΠΎΠ³Π»ΠΈ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΡΡ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ, ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΡΡ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ, Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π°Π²ΡΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ SDS-PAGE (ΡΠΈΡ. 1c, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 3). Π§ΡΠΎΠ±Ρ Π΄ΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΡ, ΡΡΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΡΠ°ΠΊΡΠ½ΡΠΉ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met, ΠΌΡ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π»ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠΌΡ Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΠ»ΠΈΠ·Ρ ΠΈ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ Π½Π° ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠΎΠ±ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ»ΠΎΠ½ΠΊΠ΅ 18 .ΠΠ· ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² 88% Π±ΡΠ»ΠΎ ΠΈΠ½ΡΠ°ΠΊΡΠ½ΡΠΌ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met (ΡΠΈΡ. 1d, ΡΠΎΡΠΎ-Met). ΠΠ΅Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΎΠΉ ΠΏΠΈΠΊ (7%) ΡΠ»ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°Π½ΡΡΠ΅, ΡΠ΅ΠΌ Π³Π»ΡΡΠ°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ²Π°Ρ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ° (ΡΠΈΡ. 1d, Glu), ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΡΡ, Π΅ΡΠ»ΠΈ ΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠ΄Π½ΡΠΉ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΏΡΠΎΡΡΠΎ Π½Π°Π³ΡΠ΅Π²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΡ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΠ»ΠΈΠ·Π° (Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ), ΠΈ ΠΏΠΎΡΡΠΎΠΌΡ ΠΌΡ ΠΏΡΠΈΡΠ»ΠΈ ΠΊ Π²ΡΠ²ΠΎΠ΄Ρ, ΡΡΠΎ ΠΎΠ½ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡ ΡΠ΅ΡΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°Π·Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ. Π Π°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ, Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ°ΡΡΠ°Ρ Π² ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅ ΡΠ°Π·Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠ΅ΠΉ ΡΠ΅ΠΈΠ½ΡΠ΅Π³ΡΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ, ΠΏΡΠΎΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π² Π²ΠΈΠ΄Π΅ Π°ΡΠΏΠ°ΡΠ°Π³ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΠΈ Π³Π»ΡΡΠ°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ, Π½ΠΎ ΡΡΠΎΡ ΠΏΡΡΡ Π½Π΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅Ρ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ.ΠΡ ΠΏΡΠΈΡΠ»ΠΈ ΠΊ Π²ΡΠ²ΠΎΠ΄Ρ, ΡΡΠΎ ΠΏΠΎ ΠΊΡΠ°ΠΉΠ½Π΅ΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠ΅ 95% Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Π½Π΅ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΡΠΉ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met. ΠΡ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΎ ΡΠ°ΡΡΠΎΡΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΠΎ-Met Π²ΠΎ Π²Π½ΠΎΠ²Ρ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Ρ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΈ [ 3 H] ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π»Π°Π½ΠΈΠ½ΠΎΠΌ. Π‘ΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΡ ΠΈΠ·ΠΎΡΠΎΠΏΠΎΠ² (ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΠ° 1) ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΎ, ΡΡΠΎ ΡΠ°ΡΡΠΎΡΠ° Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ»Π° 14% ΠΎΡ ΡΠ°ΡΡΠΎΡΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ [ 3 H] Phe, ΡΡΠΎ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ 0.7% ΠΎΡ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ.
Π’Π°Π±Π»ΠΈΡΠ° 1 ΠΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°ΡΡΠΎΡΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΠΎ-Met Π²ΠΎ Π²Π½ΠΎΠ²Ρ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈΠ€ΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½Ρ ΠΈ Π½Π΅ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ½Ρ
ΠΠ΅Π΅ΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΡΠ°ΡΡΠΎ ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΠΌΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π· Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ [ 3 H] Phe ΠΈ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΆΠΈΠ·Π½Π΅ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, Π²ΡΡΠ°ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ, ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΡΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΈΠΏΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠ½Π΅Π³ΠΎ (Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½Π°Ρ ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΠ° 1 ΠΎΠ½Π»Π°ΠΉΠ½). ΠΠ·-Π·Π° Π½Π΅Ρ Π²Π°ΡΠΊΠΈ Π΄Π²ΡΡ Π½Π΅Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΠΌΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π· Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Π±ΡΠ» ΡΠ½ΠΈΠΆΠ΅Π½ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎ Π΄ΠΎ 65% ΠΎΡ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Π° Π² ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅Π΄Π΅.ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Ile Π½Π΅ ΠΈΠΌΠ΅Π»ΠΎ ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠ°, ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΎ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π· Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π₯ΠΎΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠΎΡΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ΅Π΄Π»Π΅Π½Π½Π΅Π΅, ΡΠ΅ΠΌ Π² ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅Π΄Π΅, ΠΈΡ ΠΆΠΈΠ·Π½Π΅ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΡ (Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½Π°Ρ ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΠ° 1) ΠΈ ΠΌΠΎΡΡΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ (Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ) Π½Π΅ ΠΏΠΎΡΡΡΠ°Π΄Π°Π»ΠΈ. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΡ Π£Π€-ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ, Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½Π°Ρ Π΄Π»Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 99% Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏ, Π½Π΅ Π²Π»ΠΈΡΠ»Π° Π½Π° ΠΆΠΈΠ·Π½Π΅ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ (Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½Π°Ρ ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΠ° 2 ΠΎΠ½Π»Π°ΠΉΠ½). ΠΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΈΠ»ΠΈ, ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ Π»ΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ , Π²ΡΡΠ°ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ, ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅Ρ.Π‘ ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ΅Π»ΡΡ ΠΌΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π²Π΅ΠΊΡΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠ»ΠΈΡΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ GFP ΠΈΠ· GTPase Rab5 ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΈΡΡΡΠΈΠ²Π½ΠΎ Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ (GFP-Rab5QL) ΠΈΠ»ΠΈ Π΄ΠΎΠΌΠΈΠ½Π°Π½ΡΠ½ΠΎ-ΠΎΡΡΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ (GFP-Rab5SN) ΠΌΡΡΠ°Π½ΡΠΎΠ² 19 , ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΠ»ΡΡΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π½Π° ΡΡΠ΅Π΄Ρ, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ, ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ GFP Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΎΠΊΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΈΠΈ (Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠΈΡ. 1 ΠΎΠ½Π»Π°ΠΉΠ½). GFP-Rab5 Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ Π² ΡΠ½Π΄ΠΎΡΠΎΠΌΠ°Ρ , GFP-Rab5QL — Π² ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½Π½ΡΡ ΡΠ½Π΄ΠΎΡΠΎΠΌΠ°Ρ ΠΈ GFP-Rab5SN — Π² ΡΠΈΡΠΎΠ·ΠΎΠ»Π΅, Π²ΡΠ΅ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΡΠ΅ΡΡΡ Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΠ΄ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΠΎΡΡΠ΅ΡΠ°ΠΌΠΈ 19 . ΠΠΈ Π½Π° ΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ, Π½ΠΈ Π½Π° Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΡ Π½Π΅ Π²Π»ΠΈΡΠ»ΠΎ ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ ΠΈΠ· ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ.ΠΡΠΈ ΡΠ°ΡΡΠΎΡΠ΅ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Met Π½Π° Met 35% (ΡΠΌ. ΠΠΈΠΆΠ΅) Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 80% ΡΠ»ΠΈΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π±ΡΠ΄ΡΡ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΊΠ°ΠΊ Π² Rab5-, ΡΠ°ΠΊ ΠΈ Π² GFP-ΡΠ°ΡΡΠΈ ΡΠ»ΠΈΡΠ½ΠΈΡ, ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 99% Ρ ΠΎΡΡ Π±Ρ Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ· Π΄Π²ΡΡ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΉ. ΠΡ ΠΏΡΠΈΡΠ»ΠΈ ΠΊ Π²ΡΠ²ΠΎΠ΄Ρ, ΡΡΠΎ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ Π½Π΅ Π½Π°ΡΡΡΠ°ΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΡ Rab5 ΠΈΠ»ΠΈ GFP.
Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠ²Π΅ΡΠ΄ΠΈΡΡ ΡΡΠΈ ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°, ΠΌΡ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠΈΠ»ΠΈ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ Ξ²-Π³Π°Π»Π°ΠΊΡΠΎΠ·ΠΈΠ΄Π°Π·Ρ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ Π±ΡΠ»Π° Π²ΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½Π° Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ Π² ΡΡΠ΅Π΄Π΅ (Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½Π°Ρ ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΠ° 3 ΠΎΠ½Π»Π°ΠΉΠ½).ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π»ΡΠ±ΠΎΠΉ ΠΈΠ· ΡΡΠ΅Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΌΠ΅ΡΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Leu Π½Π΅ Π²Π»ΠΈΡΠ»ΠΎ Π½Π° Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΡΠ΅ΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°. Escherichia coli Ξ²-Π³Π°Π»Π°ΠΊΡΠΎΠ·ΠΈΠ΄Π°Π·Π° ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ 23 ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½Π°, ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π² ΡΡΠ΅Π΄Π½Π΅ΠΌ 8 Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΡΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Met; ΠΎΠΆΠΈΠ΄Π°Π΅ΡΡΡ, ΡΡΠΎ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ 0,01% Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Π½Π΅ Π±ΡΠ΄Π΅Ρ Π·Π°ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎ ΡΠΎΡΠΎ-Met. ΠΡ ΠΏΡΠΈΡΠ»ΠΈ ΠΊ Π²ΡΠ²ΠΎΠ΄Ρ, ΡΡΠΎ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ Π½Π΅ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ, ΠΏΠΎ ΠΊΡΠ°ΠΉΠ½Π΅ΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠ΅ ΡΠ°ΡΡΠΈΡΠ½ΠΎ, ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ Ρ ΡΠ°Π·Π²Π΅ΡΠ²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΏΡΡ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½.
Π‘ΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΡΡΠ°ΡΠ΅Π³ΠΈΠΈ Β«ΠΊΠΎΡΠΌΠ»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΈ Π²ΡΠΏΡΡΠΊΠΈΒ»
ΠΠ»Ρ ΠΈΠ·ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ, ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ, ΠΌΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7 ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄ΠΎΠΉ, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠ΅ΠΉ Π³Π΅Π½, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡΡΠΈΠΉ ΠΊΠ°Π²Π΅ΠΎΠ»ΠΈΠ½-1 (ΡΠΌ. 20), ΠΊΠΎΡΠΌΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΡΠ΅ΠΌΡ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΈ ΠΈΡΠΊΠ°Π»ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΡΡ Π΄ΠΈΠΌΠ΅ΡΠΎΠ² ΠΊΠ°Π²Π΅ΠΎΠ»ΠΈΠ½Π°-1 ΠΏΡΠΈ Π£Π€-ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ (ΡΠΈΡ. 2Π°). ΠΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈ, ΡΡΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ (ΡΠΈΡ. 2Π°, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 1), ΠΈ ΠΌΡ Π½Π΅ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠ³ΠΎ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π² Π½Π΅ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ°Ρ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ (ΡΠΈΡ.2Π°, ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡ 2β4). ΠΠ½ΠΎΠ³Π΄Π° ΡΠ»Π°Π±ΠΎΠ΅ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΎΡΡ ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ (ΡΠΌ. ΠΡΠΈΠΌΠ΅Ρ Π½Π° ΡΠΈΠ³. 3b, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 1), ΡΡΠΎ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΡΠ΅ΡΡΡ Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΠ΄ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ΅Π½ΠΈΡΠΌΠΈ ΠΎ ΠΏΡΡΠΌΠΎΠΌ Π£Π€-ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ 21 . Π ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ°Ρ , ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ (ΡΠΈΡ. 2Π°, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 5-7), ΠΌΡ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΠΈ, ΡΡΠΎ Π·Π½Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΡΡΠΈΡΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΈΠΌΠ΅ΡΠ° ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²ΡΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met, Π½ΠΎ Π½Π΅ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Ile.
Π ΠΈΡΡΠ½ΠΎΠΊ 2: Π€ΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅, ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ.( a — c ) ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7 ( a , b ) ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HeLa ( c ) Π²ΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² LM-4 ( a ) ΠΈΠ»ΠΈ LM-2 ( b , c ) Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ L-ΡΠΎΡΠΎ-Leu (pL), L-ΡΠΎΡΠΎ-Met (pM) ΠΈΠ»ΠΈ DL-photo-Ile (pI) ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΡ ΡΠΌΠ΅ΡΠ΅ΠΉ (pLM ΠΈΠ»ΠΈ pLMI), Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ°Π»ΠΈ Π£Π€-ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ. (+) ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ (-). Π‘ΡΠΈΡΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΡ, ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΡΡΠΈΠ΅ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π£Π€-ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ, Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½Ρ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ SDS-PAGE ΠΈ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³Π° Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π°Π½ΡΠΈ-ΠΊΠ°Π²Π΅ΠΎΠ»ΠΈΠ½Π° 1 ( a ) Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ²Π΅ΡΡ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠ°Π²Π΅ΠΎΠ»ΠΈΠ½Π° 1, Π°Π½ΡΠΈΡΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Π° ( b ) Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ½Π΄ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΡΡΠΈΡΠ° ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈ-EEA1 ( c ) Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ½Π΄ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ EEA1.Π‘ΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ Π΄Π²ΡΠΌΡ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΡΠΌΠΈ DSS ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ Π΄Π»Ρ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ( b , Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 8 ΠΈ 9). Π€ΠΎΡΠΎ-ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ½Π΄ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ EEA1 Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ DSS ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠ°ΡΠ°ΡΠΎΡΠΌΠ°Π»ΡΠ΄Π΅Π³ΠΈΠ΄Π° (PFA), ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ ( c ).
Π ΠΈΡ. 3. Π‘ΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Leu.( a , b ) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7, ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ HA-ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ PGRMC1 ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°, Π²ΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² LM-4 Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ( a ) ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met ( b ) ΠΏΠ»ΡΡ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Π°Ρ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠΈΡΡΡΡΠ°Ρ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°.ΠΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ, ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π²ΡΠΈΠ΅ΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π£Π€-ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ, Π²ΡΡΠ²Π»ΡΠ»ΠΈ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³ΠΎΠΌ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π» ΠΊ ΡΠΏΠΈΡΠΎΠΏΡ ΠΠ. ( c ) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7 Π²ΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met, ΠΏΠΎΡΡΠΎΡΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π° [ 3 H] Phe ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ Π½Π΅ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ. ΠΠ΅Π»ΠΎΠΊ ΠΎΡΠ°ΠΆΠ΄Π°Π»ΠΈ, ΠΈ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠΌ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ ΡΡΠΈΠ½ΡΠΈΠ»Π»ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΌ ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ. ΠΡΠ°ΡΠΈΠΊ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅Ρ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met, Π½ΠΎΡΠΌΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΏΠΎ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΎ ΠΏΠΎ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ [ 3 H] Phe.ΠΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠΈΡΡΡΡΠ΅ΠΉ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ (Con), ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΎ Π½Π° 100. ΠΠ°Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ ΡΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΠΌΠΈ Β± ΡΡΠ°Π½Π΄Π°ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΡΠΊΠ»ΠΎΠ½Π΅Π½ΠΈΠ΅. ΡΡΠ΅Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠΉ.
ΠΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ Π½Π΅ ΠΎΠ³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΎΡΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠ½Π΄ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΡΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΠ½ 22 (ΡΠΈΠ³. 2b) ΠΈ EEA1 (ΡΡΡΠ»ΠΊΠ° 23; ΡΠΈΠ³. 2c) ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΡΠΈΡΡ Ρ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡΡ, ΡΡΠ°Π²Π½ΠΈΠΌΠΎΠΉ Ρ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡΡ, ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ Π΄ΠΈΡΡΠΊΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠΈΠ΄ΠΈΠ»-ΡΡΠ±Π΅ΡΠ°ΡΠΎΠΌ (DSS) ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠ°ΡΠ°ΡΠΎΡΠΌΠ°Π»ΡΠ΄Π΅Π³ΠΈΠ΄ΠΎΠΌ. Π ΡΠ°ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, Π΄Π»Ρ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° EEA1 ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΡΠ΅Π²ΠΎΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π·ΡΠ΅ΡΠΈΡΡ Π΄ΠΈΡΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠΈΡΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡ (ΡΠΈΡ. 2c, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 1-3), ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΎ ΠΊ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΡΡ Π°Π³ΡΠ΅Π³Π°ΡΠΎΠ², ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π½Π΅ Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»Π΅Π½Ρ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ SDS-PAGE (ΡΠΈΡ. 2c, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 5,6).
Π‘ΡΡΡΠΊΡΡΡΠ° ΡΡΠ΅Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ, ΡΡΠΎ ΡΠΎΡΠΎ-Ile, ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½, Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ. ΠΡΠ»ΠΈ ΡΡΠΎ ΡΠ°ΠΊ, Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΉ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ ΡΠ½ΠΈΠ·ΠΈΡΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅. ΠΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄ΠΎΠΉ, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡΡΠ΅ΠΉ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ PGRMC1 (ref.24) ΠΈ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΈ, ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠΈΡΡΡΡ Π»ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½, Π²Π°Π»ΠΈΠ½, Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ Π·Π° ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met. ΠΡ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ Π·Π° ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Leu (ΡΠΈΡ. 3a, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 3β7) Π² ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΌ Ρ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ, Π° ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ Π·Π° ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-Met (ΡΠΈΡ. 3b, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 3β7) Π² ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΌ Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½ΠΎΠΌ ΠΈ Π² ΠΌΠ΅Π½ΡΡΠ΅ΠΉ ΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½ΠΈ ΠΎΡ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π°. ΠΠ°Π»ΠΈΠ½ ΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ Π½Π΅ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Met, Π° ΡΠΊΠΎΡΠ΅Π΅ ΡΡΠΈΠ»ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅. ΠΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½ ΠΈ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ [1- 14 C] ΡΠΎΡΠΎ-Met Π·Π° Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π² Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ Π²Π°Π»ΠΈΠ½Π° ΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π° ΡΠ»Π΅Π³ΠΊΠ° ΡΡΠΈΠΌΡΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΎ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ (ΡΠΈΡ. 3Π²). ΠΡΠΈΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ, ΡΡΠΎ Π²ΡΠ΅ ΡΠ΅ΡΡΡΠ΅ ΠΈΠ· ΡΡΠΈΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠΈΡΡΡΡΡΡ Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ L-ΡΠΈΠΏΠ° 25 , ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠΈΡΡΠ΅Ρ ΡΡΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ. Π‘ΠΈΠ»ΡΠ½Π°Ρ ΡΠ°Π·Π½ΠΈΡΠ° Π² ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½ΠΎΠΌ ΠΈ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Π²Π°Π»ΠΈΠ½ΠΎΠΌ ΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΠ»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ ΠΈΡΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅Ρ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ Π½Π° ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ³Π»ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ.
Π‘ΡΠΈΠ²ΠΊΠ° Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Π° Π±ΡΡΡ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΈΠ·-Π·Π° ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠΈΠΎΠ΄Π° ΠΏΠΎΠ»ΡΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ ΠΊΠ°ΡΠ±Π΅Π½Π° Π² Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΌ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠΈ ΠΈ ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΡ ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ ΡΠΏΠ΅ΠΉΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΎΠ΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΡΡ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΡ, ΠΌΡ ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ 19S ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π°ΡΠΎΠΌΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅Π³ΡΠ»ΡΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡΠΈΡΡ, ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ° ΠΈΠ· 17 Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΡ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ. Π ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΎΡ ΡΠ΄Π΅ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡΠΈΡΡ 20S ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π°ΡΠΎΠΌΡ, ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠ½ΡΠ΅ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Ρ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΈΠΌ ΡΠ°Π·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ° 19S Π½Π΅Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ. ΠΠ·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π΄ΡΠΎΠΆΠΆΠ΅Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π²ΡΠ³ΠΈΠ±ΡΠΈΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΠΈ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΠΏΠΎΠ΄Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ² in vitro , ΡΡΠΎ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅Π»ΠΎ ΠΊ ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠ°ΡΡΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ 26,27 . ΠΡ ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠΈΡΠΎΠ·ΠΎΠ»Ρ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎ-ΡΡΠΈΡΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ HeLa Ρ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π°ΠΌΠΈ ΠΊ Π΄Π²ΡΠΌ ΠΈΠ· ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ 19S, Rpt4 (S10b) ΠΈ Rpt1 (S7) (ΡΠΈΡ.4). ΠΠΎΡΠ»Π΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ Rpt4 Π±ΡΠ» ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ Π² ΡΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎ-ΡΡΠΈΡΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ°Ρ Ρ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΌΠ°ΡΡΠ°ΠΌΠΈ 120, 140 ΠΈ 145 ΠΊΠΠ° (ΡΠΈΠ³. 4, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 3), ΡΡΠΎ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΡΠ΅ΡΡΡ Ρ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡΠΌΠΈ Ρ ΡΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌΠΈ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π°ΡΠΎΠΌΡ 26 . ΠΠ°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ², Rpt1 Π½Π΅ Π±ΡΠ» ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ Π² ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎ-ΡΡΠΈΡΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ΅ (ΡΠΈΠ³. 4, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 4). ΠΠΎΠ»ΠΎΡΠ° 115 ΠΊΠΠ°, ΡΠΆΠ΅ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ (ΡΠΈΠ³. 4, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 2), ΠΎΡΡΠ°ΠΆΠ°Π΅Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΡΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π°. Π’ΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΠ»Π°Π±Π°Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΈ 155 ΠΊΠΠ° ΠΏΠΎΡΠ²Π»ΡΠ»Π°ΡΡ ΠΏΡΠΈ Π³ΠΎΡΠ°Π·Π΄ΠΎ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π΄Π»ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΌ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π½Π° Π±Π»ΠΎΡ (Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ).ΠΠ΅ΡΠΌΠΎΡΡΡ Π½Π° Π²ΡΡΠΎΠΊΡΡ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ Π΄Π²ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² (44% ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, 62% ΡΡ ΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π°), ΠΎΠ±ΡΠΈΡ ΠΏΠ°ΡΡΠ½Π΅ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΎ Π½Π΅ Π±ΡΠ»ΠΎ, ΡΡΠΎ ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅ΡΠ΅Π»ΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΎ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΉ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π΄ΡΡΡ. ΠΠΈ ΠΎΠ΄Π½Π° ΠΈΠ· ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎ-ΡΡΠΈΡΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΈΠΌΠ΅Π»ΠΈ Rpt4, Π½Π΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π»Π° Rpt1, ΡΡΠΎ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΡΠ΅ΡΡΡ Ρ ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ΠΌ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π΄Π²ΡΠΌΡ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΠ°ΠΌΠΈ, ΠΎ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΌ ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π»ΠΎΡΡ Π² ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΠ΄ΡΡΠΈΡ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡΡ 26,27 .
Π€ΠΈΠ³ΡΡΠ° 4: Π€ΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π°ΡΠΎΠΌΠ½ΡΡ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ in vivo . ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈHeLa Π±ΡΠ»ΠΈ Π²ΡΡΠ°ΡΠ΅Π½Ρ Π² LM-2 Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Leu ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-Met, Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½Ρ Π£Π€ (+) ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½Ρ (-).Π¦ΠΈΡΠΎΠ·ΠΎΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ°ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π»ΠΈ SDS-PAGE ΠΈ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³Ρ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² hRpt1 ΠΈΠ»ΠΈ hRpt4. Rpt4 Π΄Π°Π΅Ρ ΡΡΠΈ Π΄ΠΈΡΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠΈΡΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡ, Π½ΠΈ ΠΎΠ΄Π½Π° ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π½Π΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ Rpt1. ΠΡΠ΅Π½Ρ Π΄ΠΎΠ»Π³Π°Ρ Π²ΡΠ΄Π΅ΡΠΆΠΊΠ° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅Ρ, ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎ-ΡΡΠΈΡΠ°Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° Rpt1 ΠΌΠΈΠ³ΡΠΈΡΡΠ΅Ρ ΠΌΠ΅Π΄Π»Π΅Π½Π½Π΅Π΅, ΡΠ΅ΠΌ ΡΡΠΈ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎ-ΡΡΠΈΡΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡ, ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Rpt4 (Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ).
PGRMC1 Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ Ρ Insig-1 ΠΈ SCAP
ΠΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π½ΠΎΠ²ΡΡ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ Π΄Π»Ρ ΠΈΠ·ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ-Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ Π² ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π½ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ², ΡΡΠ°ΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ Π² ΡΠ΅Π³ΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π³ΠΎΠΌΠ΅ΠΎΡΡΠ°Π·Π° Π»ΠΈΠΏΠΈΠ΄ΠΎΠ².ΠΠΎ ΠΊΡΠ°ΠΉΠ½Π΅ΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠ΅, ΡΡΠΈ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π½ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, SCAP, Insig-1 ΠΈ SREBP 28,29,30 , ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ ΡΠ°ΡΡΡΡ ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ±ΠΎΡΠΊΠΈ, ΠΈ Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΈΠ΅ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°ΡΡ ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ Π½Π΅ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½ΡΠΎΠ² 31 . ΠΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡ ΡΠ°ΡΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ Π² ΡΠ½Π΄ΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΌ ΡΠ΅ΡΠΈΠΊΡΠ»ΡΠΌΠ΅, Π² ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΌ ΠΎΠ½ ΡΠ΅Π°Π³ΠΈΡΡΠ΅Ρ Π½Π° Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΉ ΡΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ Ρ ΠΎΠ»Π΅ΡΡΠ΅ΡΠΈΠ½Π°. PGRMC1, ΠΏΡΠΎΠ³Π΅ΡΡΠ΅ΡΠΎΠ½-ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΡΠ½Π΄ΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅ΡΠΈΠΊΡΠ»ΡΠΌΠ° 24,32 , ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠΌ, ΡΡΠ°ΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΠΌ Π² ΡΡΠΎΠΌ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅. Π ΡΠ°ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΠΌΡ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ·ΡΠ΅Π²Π°Π»ΠΈ, ΡΡΠΎ ΠΎΠ½ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π½Π°ΠΏΡΡΠΌΡΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΎΠ²Π°ΡΡ Ρ Insig-1.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΈΡΡ ΡΡΠΎ, ΠΌΡ ΡΠΎΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ PGRMC1 (PGRMC1-HA) Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ Π³Π΅ΠΌΠ°Π³Π³Π»ΡΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° (HA) ΠΈ Insig-1 Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ Myc (Insig-1-Myc) Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ COS7, Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Met ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΊΡΠΎΡΡΠΎΠΌ ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π΅Π· Π½Π΅Π³ΠΎ. -ΡΠ²ΡΠ·Π°Π» ΠΈΡ . ΠΠ»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΈΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΌΡ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠΊΡΡΡΠ°ΠΊΡΡ, ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ Π΄Π΅ΡΠ΅ΡΠ³Π΅Π½ΡΠΎΠΌ, Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΎΠΌ ΠΊ ββHA ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠ°ΡΡ Π½Π° Π½Π°Π»ΠΈΡΠΈΠ΅ Insig-1 Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³Π° Ρ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΎΠΌ ΠΊ ββMyc. ΠΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π²ΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Met, Π±ΡΠ»ΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΎ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π½Π΅Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΎΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΊΠΎΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Insig-1, Π½ΠΎ Π½Π΅ Π±ΡΠ»ΠΎ ΡΡΠΈΡΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡ (ΡΠΈΡ.5Π°, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 2). Π ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ , Π²ΡΡΠ°ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Ρ ΡΠΎΡΠΎ-Met, ΡΠΈΠ»ΡΠ½Π°Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΠΎΡΠ²Π»ΡΠ»Π°ΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΎΠΆΠΈΠ΄Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΌΠ°ΡΡΠ΅ ΡΡΠΈΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ° Insig-1 β PGRMC1 (ΡΠΈΡ. 5a, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 1). ΠΡ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΡ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ½ΡΠΉ ΠΏΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠΊ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ, ΡΠΎ Π΅ΡΡΡ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠ°ΡΠΈΡ Π°Π½ΡΠΈ-Myc Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠΌ Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³ΠΎΠΌ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΎΠΌ ΠΊ ββΠΌΠ΅ΡΠΊΠ΅ ΠΠ (ΡΠΈΠ³. 5Π°, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 3). ΠΡΠΈ ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡΡΠΈΡΡΡΡ ΠΏΡΡΠΌΠΎΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ Π΄Π²ΡΠΌΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ Π² ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ . Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΆΠ΅ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±ΠΎΠΌ ΠΌΡ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΡΠΌΠΎΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ SCAP ΠΈ PGRMC1 (ΡΠΈΡ.5b, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ° 3), Π½ΠΎ ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ Insig-1 ΠΈ Π½Π΅ΡΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΡ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠΌ Ρ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ Π² ΡΠ½Π΄ΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΌ ΡΠ΅ΡΠΈΠΊΡΠ»ΡΠΌΠ΅ (ΡΠΈΡ. 5b, Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠΈ 5 ΠΈ 6), ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠ²Π΅ΡΠΆΠ΄Π°Π΅Ρ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π΄ΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ.
Π€ΠΈΠ³ΡΡΠ° 5: ΠΡΡΠΌΠΎΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅ in vivo ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ Insig-1 ΠΈ PGRMC1.( a ) ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ COS7 ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ HA-ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ PGRMC1 ΠΈ Myc-ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ Insig-1 ΠΈ Π²ΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² LM-4 Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΎΡΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΡΠΎΡΠΎ-Met. ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π»ΠΈ Π£Π€-ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅Ρ, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ, Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π»ΠΈ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠ°ΡΠΈΠΈ (IP) Π°Π½ΡΠΈ-HA ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈ-Myc, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ. ΠΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π»ΠΈ SDS-PAGE ΠΈ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³Ρ (WB) Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Π΅ΠΉ Ρ Π°Π½ΡΠΈ-Myc ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½ΡΠΈ-HA, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ. ΠΠ΅Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ°Ρ ΡΠ°Π·Π½ΠΈΡΠ° Π² ΠΊΠ°ΠΆΡΡΠ΅ΠΉΡΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΌΠ°ΡΡΠ΅ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ»ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π° ββΡΠ°Π·Π½ΡΠΌ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΌ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π³Π΅Π»Π΅ΠΉ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΡ Π΄Π»Ρ SDS-PAGE. ΠΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ Π½Π΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ³ΠΎ Insig-1 Π² Π»Π΅Π²ΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ°Ρ ΡΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅Ρ Π½Π° Π½Π΅ΠΊΠΎΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΡΡ ΠΊΠΎΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠ°ΡΠΈΡ. Π‘ΠΈΠ»ΡΠ½Π°Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° Π½Π° Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠΊΠ°Ρ 3 ΠΈ 4 (IgG-HC) ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠ΅Π°Π³ΠΈΡΡΡΡΡΡ ΡΡΠΆΠ΅Π»ΡΡ ΡΠ΅ΠΏΡ IgG. (b ) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ COS7 ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π²Π΅ΠΊΡΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡΡΠΈΠΌΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π»ΠΈ ΠΈΠΌΠΌΡΠ½ΠΎΠΏΡΠ΅ΡΠΈΠΏΠΈΡΠ°ΡΠΈΠΈ Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠΌ SDS-PAGE ΠΈ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³ΠΎΠΌ, ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΎ Π²ΡΡΠ΅.ΠΠ±ΡΠ°ΡΠΈΡΠ΅ Π²Π½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠ΅, ΡΡΠΎ SCAP ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ΅Ρ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Ρ, Π²Π΅ΡΠΎΡΡΠ½ΠΎ, Π΄ΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΠΈ Insig-1 ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Ρ PGRMC1, ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ Insig-1 Π½Π΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Ρ TRP-1-ER, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ Π² ΡΠ½Π΄ΠΎΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠ°Ρ ΡΠ΅ΡΡ.
ΠΠ΅ΡΠ²ΡΠ΅ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ΠΎΡΠ½ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π±Π»Π°Π³ΠΎΠ΄Π°ΡΡ Π»ΠΈΡΡΡ Π³ΡΠ°ΡΠ΅Π½Π°
Π―ΠΊΠΎΠ± ΠΡΠΎΠ½
ΠΡ Π±Ρ Π΄Π²Π°ΠΆΠ΄Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠΌΠ°Π»ΠΈ, ΠΏΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅ ΡΠ΅ΠΌ ΡΠ΄Π΅Π»Π°ΡΡ ΡΠ΅Π»ΡΠΈ, Π΅ΡΠ»ΠΈ Π±Ρ Π²ΡΠΏΡΡΠΊΠ° ΠΊΠ°ΠΌΠ΅ΡΡ Π±ΡΠ»Π° Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ ΡΡΠΊΠΎΠΉ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΆΠ΅ΡΡ ΠΊΠΎΠΆΡ. ΠΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈ ΡΡΠ°Π»ΠΊΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΡΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈ ΠΈΠ·ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ΄ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΎΠΌ, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΡΠ°Π·ΡΡΡΠΈΡΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ.Π’Π΅ΠΏΠ΅ΡΡ Π½Π° ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡ ΠΏΡΠΈΡΠ΅Π» Π³ΡΠ°ΡΠ΅Π½ — ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΎΠ½ΠΊΠ°Ρ ΡΠΎΡΠΌΠ° ΡΠ³Π»Π΅ΡΠΎΠ΄Π° — ΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΠ» ΡΠ°ΠΌΡΠ΅ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΠ΅ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π΅Π΄ΠΈΠ½ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°.
Π€ΠΎΡΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΠ΅Ρ Π½Π°ΠΌ ΠΏΠΎΠ½ΡΡΡ ΠΈΡ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΡ ΠΈ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΈ. ΠΡΠΎ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΠΉ, ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π½Π°ΡΡΡΠ°ΡΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΡΠ°ΠΊΠΈΡ ΠΊΠ°ΠΊ Π±ΠΎΠ»Π΅Π·Π½Ρ ΠΠ»ΡΡΠ³Π΅ΠΉΠΌΠ΅ΡΠ°. ΠΠΎ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ, ΡΠ°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠ΅Π½ΡΠ³Π΅Π½ΠΎΠ²ΡΠΊΠ°Ρ ΠΊΡΠΈΡΡΠ°Π»Π»ΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΡΠΈΠΎΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π½Π°Ρ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΈΡ, ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²ΡΠ²Π°ΡΡΡΡ Π½Π° ΡΡΡΠ΅Π΄Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΈΠΉ ΠΌΠΈΠ»Π»ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ² ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ», ΡΡΠΎ Π΄Π°Π΅Ρ Π½Π°ΠΌ Π½Π΅ΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅.
Π£ΡΡΠ΅Π΄Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ, ΠΏΠΎΡΠΎΠΌΡ ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ» ΡΠ΅Π½ΡΠ³Π΅Π½ΠΎΠ²ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ Π»ΡΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΡΠ½Π΅ΡΠ³Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π°ΠΌΠΈ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅Π΄ΠΈΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, Π° ΡΡΠΎ ΠΎΠ·Π½Π°ΡΠ°Π΅Ρ, ΡΡΠΎ Π²Ρ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΡΡ ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΡ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ½Ρ ΠΈΠ· ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ, Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΡΠΎΠΌΡ, ΡΡΠΎ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°ΡΡ ΠΎΠ΄Π½Ρ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ Π΄ΠΎΠ»Π³ΠΎ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΡΠΎΡΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΡΡΠΉ Π΅Π³ΠΎ.Π’Π΅ΠΏΠ΅ΡΡ ΠΠ°Π½-ΠΠΈΠΊΠΎΠ»Ρ ΠΠΎΠ½ΡΠ°Π½ ΠΈΠ· Π¦ΡΡΠΈΡ ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ½ΠΈΠ²Π΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠ°, Π¨Π²Π΅ΠΉΡΠ°ΡΠΈΡ, ΠΈ Π΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ»Π»Π΅Π³ΠΈ ΠΏΡΠΈΠ΄ΡΠΌΠ°Π»ΠΈ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ± ΡΠ΄Π΅Π»Π°ΡΡ ΠΈΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ ΡΡΠΎ.
ΠΠ½ΠΈ Π½Π°ΡΠΈΠ½Π°ΡΡ Ρ ΡΠ°ΡΠΏΡΠ»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠ° Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π½Π° Π»ΠΈΡΡ Π³ΡΠ°ΡΠ΅Π½Π°, ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ Π½Π° ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅. ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΏΠΎΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡ ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π½ΡΠΉ Π³ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ½Ρ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π°ΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ.
Π ΡΡΠ½Π°Ρ Π³ΠΎΡΠΊΠ°
ΠΡΠΎΡ Π²ΠΈΠ΄ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠ² ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Ρ Ρ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠ΅ΠΉ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π°ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ.ΠΠ°Π³Π²ΠΎΠ·Π΄ΠΊΠ° Π² ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ ΠΎΠ½ΠΈ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Ρ ΡΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ½ΠΈΠΊΠ°ΡΡ Π² Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡΠΎΡ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠ°. ΠΠΎΡ Π·Π΄Π΅ΡΡ ΠΈ ΠΏΡΠΈΠ³ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ Π³ΡΠ°ΡΠ΅Π½. Β«Π ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΈΠΈ Ρ Π²Π°Ρ Π΅ΡΡΡ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΠΎ. ΠΠ»Ρ Π½Π°ΡΠ΅ΠΉ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΈΠΈ Π½Π°ΠΌ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ Π±ΡΠ»ΠΎ Π½Π°ΠΉΡΠΈ Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ½ΠΊΡΡ ΠΏΠΎΠ΄Π»ΠΎΠΆΠΊΡ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· Π½Π΅Π΅ ΠΏΡΠΎΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Ρ Β», — Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΡ ΠΠΎΠ½Π³ΡΠ°ΠΌΠΏ.
ΠΠΎΠΌΠ°Π½Π΄Π° ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΈΠ»Π° ΡΠ²ΠΎΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ Π½Π° ΡΡΠ΄Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ» ΡΠ°Π·ΠΌΠ΅ΡΠΎΠΌ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π½Π°Π½ΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΎΠ², ΡΠ°ΠΊΠΈΡ ΠΊΠ°ΠΊ Π³Π΅ΠΌΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½, ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π² ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΡΡ ΠΊΡΠΎΠ²ΡΠ½ΡΡ ΡΠ΅Π»ΡΡΠ°Ρ . Π Π΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Ρ ΠΎΡΠΎΡΠΎ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΡΡΡΡΡ Ρ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΡΠΌΠΈ, ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠ΅Π½ΡΠ³Π΅Π½ΠΎΠ²ΡΠΊΠΎΠΉ ΠΊΡΠΈΡΡΠ°Π»Π»ΠΎΠ³ΡΠ°ΡΠΈΠΈ (ΡΠΌ. ΠΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΈΠΆΠ΅), ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΠ΅Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡΡ, ΡΡΠΎ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ ΡΠΎΡΠ½ΡΠΌΠΈ.
Π’Π΅ΠΏΠ΅ΡΡ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΏΠ»Π°Π½ΠΈΡΡΡΡ Π΄Π΅Π»Π°ΡΡ ΡΠ½ΠΈΠΌΠΊΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ», ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π½Π΅Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΡΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΈΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΉ, ΠΈ Π½Π°Π΄Π΅ΡΡΡΡ Π² ΠΊΠΎΠ½Π΅ΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΈΡΠΎΠ³Π΅ Π²Π½Π΅ΡΡΠΈ ΡΠ²ΠΎΠΉ Π²ΠΊΠ»Π°Π΄ Π² Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡΠΈΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ. Β«ΠΡΡΡ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π·Π°Π±ΠΎΠ»Π΅Π²Π°Π½ΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Ρ Ρ Π½Π΅ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠΎΠΉ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²Β», — Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΡ ΠΠΎΠ½Π³ΡΠ°ΠΌΠΏ. Β«Π Π±ΡΠ΄ΡΡΠ΅ΠΌ ΠΌΡ ΡΠΌΠΎΠΆΠ΅ΠΌ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΡΠ°Π·Π½ΠΈΡΡ Π² ΡΡΡΠΎΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π·Π΄ΠΎΡΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ° ΠΈ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ΡΒ».
Π‘ΡΡΠ»ΠΊΠ°: arxiv.org/abs/1512.08958
(ΠΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΎ: ΠΠ°Π½-ΠΠΈΠΊΠΎΠ»Ρ ΠΠΎΠ½ΡΠ°Π½ ΠΈΠ· Π¦ΡΡΠΈΡ ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ½ΠΈΠ²Π΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠ°, Π¨Π²Π΅ΠΉΡΠ°ΡΠΈΡ)
Π₯ΠΈΠΌΠΈΡ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΡ Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ² | Thermo Fisher Scientific
Π€ΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΡΠ΅ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ Π² ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°Ρ Π΄Π»Ρ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈ Π±ΠΈΠΎΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ» Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ (ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ) ΠΈ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Ρ.Π ΡΡΠΎΠΉ ΡΡΠ°ΡΡΠ΅ ΠΎΠΏΠΈΡΡΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΈ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠ»Π°ΡΡΠ° ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ².
ΠΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅
Π Π΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°
Π€ΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ (ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΎΡΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅) ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΡΠ΅Π±ΡΡΡ ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π΄Π»Ρ ΠΈΠ½ΠΈΡΠΈΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ. Π€ΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΡΡΡΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΡΠΈ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΠΈΠ΄ΠΈΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ°. ΠΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π²ΡΠ΅ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ΄Π½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΡ Π² ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°Ρ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ, ΡΡΠ΅Π±ΡΡΡ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° (Π£Π€-ΡΠ²Π΅ΡΠ°) Π΄Π»Ρ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠΈ.ΠΠ° ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ ΡΠΈΠΏΠ° ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Ρ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠΌΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΈ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π£Π€-ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ.
Π’ΠΈΠΏΠΈΡΠ½Π°Ρ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²Π°Ρ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°. Π£Π»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Thermo Scientific Pierce — ΡΡΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°ΠΊΡΠ½ΡΠ΅, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Ρ Π½Π°ΡΡΡΠ°ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ Π΄Π»ΠΈΠ½ΠΎΠΉ Π²ΠΎΠ»Π½Ρ 252 Π½ΠΌ, 302 Π½ΠΌ ΠΈ 365 Π½ΠΌ, Π½Π°ΡΡΡΠ°ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΡΠ΅ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π΄ΠΈΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅Π»Ρ, ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΠΌΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°ΠΌΠΈ Π£Π€-ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ.
Π€ΠΎΡΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΡΠ΅ΠΈΠΌΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΡΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅ΡΠΌΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΠΎΠ²ΠΊΠΈ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠΎΠ² ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ². Π§ΡΠΎ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ, ΠΎΠ½ΠΈ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΡ Π½Π° ΡΠ°Π½Π½Π΅ΠΌ ΡΡΠ°ΠΏΠ΅ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ°, Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΈΡΠΈΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ (ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π£Π€-ΡΠ²Π΅ΡΠ°) Π½Π° Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΏΠΎΠ·Π΄Π½Π΅ΠΌ ΡΡΠ°ΠΏΠ΅, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΡΠ΅ΡΡΡ Ρ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΌ ΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ΅ΡΡΡΡΠΈΠΌ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠ΅ΠΌ. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ ΠΈΠ· ΡΡΠΈΡ Π³ΡΡΠΏΠΏ Π±ΡΠ΄ΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Ρ Π»ΡΠ±ΠΎΠΉ ΠΈΠ· Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠΈΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏ Π² Π±Π΅Π»ΠΊΠ°Ρ , Ρ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΌΠΈ ΠΎΠ½ΠΈ ΡΡΠ°Π»ΠΊΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΎΠ½ΠΈ Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΡΡΡΡ. ΠΡΠ° ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΡ Π΄Π΅Π»Π°Π΅Ρ ΠΈΡ ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΡΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² (ΡΠΌ. ΠΠ±ΡΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΈΠΆΠ΅).
Π€ΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π±ΡΠ»ΠΈ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ Π² ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π΅ ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΡΡΡΠ΅Π΅ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π² ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°Ρ Π±ΠΈΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ, Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎ-ΠΌΠ΅ΡΠΈΠ»-ΠΊΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ, Π±Π΅Π½Π·ΠΎΡΠ΅Π½ΠΎΠ½Ρ, Π°Π½ΡΡΠ°Ρ ΠΈΠ½ΠΎΠ½Ρ, Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΎΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ, Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Ρ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΡΠ°Π»Π΅Π½Π°. ΠΠ°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΡΠΌΠΈ ΠΈΠ· Π½ΠΈΡ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ ΠΈ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Ρ.
ΠΠ·Π±ΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΠΏΡΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². Π’ΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ΄Π½ΠΎΡΡΠΈ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎΠ² (ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π½Π°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΠΌΡΠ΅ ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π°ΠΌΠΈ, Π΄Π²Π° Π²Π΅ΡΡ Π½ΠΈΡ ΡΡΠ΄Π°). ΠΡΠΎΡΠ°Π»Π΅Π½ (Π²Π½ΠΈΠ·Ρ ΡΠΏΡΠ°Π²Π°) ΡΠ΅Π°Π³ΠΈΡΡΠ΅Ρ ΠΏΠΎΡΡΠΈ ΠΈΡΠΊΠ»ΡΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Ρ Π ΠΠ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΠΠ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Ρ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Ρ (Π²Π½ΠΈΠ·Ρ ΡΠ»Π΅Π²Π°) — ΡΡΠΎ Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΠΊΠ»Π°ΡΡ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠΉ, ΠΏΠΎΠΏΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΈ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ ΡΠ°ΡΡΠ΅Ρ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². ΠΠΎΠ»Π½ΠΈΡΡΡΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°, ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ.
Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌ
ΠΡΠΎ 45-ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎΠ»Π΅Π·Π½ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ Π΄Π»Ρ Π½ΠΎΠ²ΠΈΡΠΊΠΎΠ², ΡΠ°ΠΊ ΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΠ΅Ρ , ΠΊΡΠΎ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ ΠΎΠΏΡΡ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ.ΠΠ½ Π½Π°ΡΠΈΠ½Π°Π΅ΡΡΡ Ρ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΡΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΡ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ². Π ΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ, Π² ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ»ΠΎΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅, Π² ΡΠΎΠΌ ΡΠΈΡΠ»Π΅ ΠΌΠΎΡΠ½ΡΡ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠ° ΠΌΠ΅ΡΠΎΠΊ Π΄Π»Ρ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠ²Π΅ΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ. Π₯ΠΈΠΌΠΈΡ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ°ΡΡΠΌΠ°ΡΡΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π² ΡΠ΄ΠΎΠ±Π½ΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠ΅, ΠΏΡΠ΅Π΄Π½Π°Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π°ΡΠΈ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ Π²Π°ΠΌ Π½ΡΠΆΠ½Π°, Π±Π΅Π· ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠΈ Π΄Π΅ΡΠ°Π»Π΅ΠΉ. ΠΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½Ρ ΠΠΈΡΡΠ° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ Ρ Π΅Π³ΠΎ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΠΎΠΉ, ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΌΠ°ΡΡΠΎΠΉ, Π΄Π»ΠΈΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΏΠ΅ΠΉΡΠ΅ΡΠ° ΠΈ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΡΡ.Π‘ΠΏΡΠ°Π²ΠΎΡΠ½ΠΈΠΊ Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠ°Π΅ΡΡΡ ΡΠΏΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΡΡΡΠ»ΠΎΠΊ Π½Π° ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΡ Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΈ Π³Π»ΠΎΡΡΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΌ ΠΎΠ±ΡΠΈΡ ΡΠ΅ΡΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ² ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ.
ΠΠ°Π³ΡΡΠ·ΠΈΡΡ Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌ
Π₯ΠΈΠΌΠΈΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π°
ΠΠΎΠ³Π΄Π° Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π΅ΡΡΡ Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π£Π€-ΡΠ²Π΅ΡΠ° (ΠΎΡ 250 Π΄ΠΎ 350 Π½ΠΌ), ΠΎΠ½ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΡΡΠ΅Π½ΠΎΠ²ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΈΠ½ΠΈΡΠΈΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Π΄Π²ΠΎΠΉΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠΌΠΈ, Π²ΡΡΠ°Π²ΠΊΡ Π² ΡΠ°ΠΉΡΡ C β H ΠΈ N β H ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠ΅Π΅ ΡΠ°ΡΡΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΡΡΠ° Π΄Π»Ρ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ Ρ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΎΡΠΈΠ» (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ,, ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½Ρ). ΠΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΠΉ ΠΏΡΡΡ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ Π΄ΠΎΠΌΠΈΠ½ΠΈΡΡΠ΅Ρ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π² ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΡΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½Ρ.
Π’ΠΈΠΎΠ»ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΠ΅ Π²ΠΎΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠ΅ Π°Π³Π΅Π½ΡΡ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, DTT ΠΈΠ»ΠΈ 2-ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ°ΠΏΡΠΎΡΡΠ°Π½ΠΎΠ») ΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅Ρ ΠΈΠ·Π±Π΅Π³Π°ΡΡ Π² ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ° Π½Π° Π²ΡΠ΅Ρ ΡΡΠ°ΠΏΠ°Ρ Π΄ΠΎ ΠΈ Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠΈ, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ ΠΎΠ½ΠΈ Π²ΠΎΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡΡ Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ Π΄ΠΎ Π°ΠΌΠΈΠ½Π°, ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΠ²ΡΠ°ΡΠ°Ρ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΡ. Π Π΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡ Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ , Π½Π΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ². ΠΡΠΈ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ΅ Ρ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΌΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠΉΡΠ΅ Π±ΡΡΠ΅ΡΡ, ΡΠΎΠ²ΠΌΠ΅ΡΡΠΈΠΌΡΠ΅ Ρ ΠΎΠ±Π΅ΠΈΠΌΠΈ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ.ΠΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΏΡΠΈΠ³Π»ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠ΅ ΠΈ / ΠΈΠ»ΠΈ Ρ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΌΠΈ ΡΠΎΡΡΠ΄Π°ΠΌΠΈ, ΠΏΠΎΠΊΡΡΡΡΠΌΠΈ ΡΠΎΠ»ΡΠ³ΠΎΠΉ, Π΄ΠΎ ΡΠ΅Ρ ΠΏΠΎΡ, ΠΏΠΎΠΊΠ° Π½Π΅ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΡ. ΠΠ±ΡΡΠ½ΠΎ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΡ ΠΎΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ Π£Π€-Π»Π°ΠΌΠΏΡ, ΡΠ°ΡΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΄ΠΎΠΌ Ρ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΌ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠΎΠΌ ΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ΅ΠΉ ΠΏΡΡΠΌΠΎ Π½Π° Π½Π΅Π³ΠΎ (ΡΠΎ Π΅ΡΡΡ Π½Π΅ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· ΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΏΡΠΎΠΏΠΈΠ»Π΅Π½) Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΡ ΠΌΠΈΠ½ΡΡ.
Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΡΡ ΡΡΠΈ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΡΠ΅ ΡΠΎΡΠΌΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎΠ²: ΠΏΡΠΎΡΡΡΠ΅ ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ, Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ ΠΈ Π½ΠΈΡΡΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ. ΠΠ°ΠΊ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ»Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ Π£Π€-ΡΠ²Π΅Ρ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, 254 Π½ΠΌ; 265-275 Π½ΠΌ) Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠΉ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠΈ ΠΏΡΠΎΡΡΡΡ ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎΠ², ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΡΠΉ Π£Π€-ΡΠ²Π΅Ρ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ.g, 365 Π½ΠΌ; ΠΡ 300 Π΄ΠΎ 460 Π½ΠΌ) Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ Π½ΠΈΡΡΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎΠ². ΠΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ»Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ Π£Π€-ΡΠ²Π΅Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅Π΄ΠΈΡΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ, Π½ΠΈΡΡΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΠΎ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΡΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½Ρ Π΄Π»Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ.
Π‘Ρ Π΅ΠΌΠ° ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π° Π΄Π»Ρ ΡΠΎΡΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ. ΠΠΎΠ»Π½ΠΈΡΡΡΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°, ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ Ρ ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎΠΌ; R ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΈΠ»ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΡΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΡΡ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΎΡΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π²ΠΎΠ΄ΠΎΡΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ.ΠΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΡΠ΅Π»ΠΊΠΈ ΡΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°ΡΡ Π½Π° Π΄ΠΎΠΌΠΈΠ½ΠΈΡΡΡΡΠΈΠΉ ΠΏΡΡΡ. ΠΠ°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Ρ ΡΠ΅Π°Π³ΠΈΡΡΡΡ Π½Π°ΠΏΡΡΠΌΡΡ (Π±Π΅Π· ΡΠ°ΡΡΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΊΠΎΠ»ΡΡΠ°) ΠΈΠ· Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π½ΠΈΡΡΠ΅Π½ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΡ.
ΠΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ Π±ΠΈΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ, 3-Π΅ ΠΈΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΠ΅
Bioconjugate Techniques, 3 rd Edition (2013) ΠΡΠ΅Π³Π° Π’. Π₯Π΅ΡΠΌΠ°Π½ΡΠΎΠ½Π° ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΊΡΡΠΏΠ½ΡΠΌ ΠΎΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΊΠ½ΠΈΠ³ΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎ ΠΈΠ·Π²Π΅ΡΡΠ½Π° ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈΡΡΠ΅ΡΠΏΡΠ²Π°ΡΡΠ΅Π΅ ΡΠΏΡΠ°Π²ΠΎΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡΠΈ Π±ΠΈΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ.
Bioconjugate Techniques — ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠΉ ΡΡΠ΅Π±Π½ΠΈΠΊ ΠΈ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΎΠΊΠΎΠ»Π°ΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΡΠ΅Π½ΡΡ -Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΎΠ², ΠΆΠ΅Π»Π°ΡΡΠΈΡ ΠΈΠ·ΡΡΠΈΡΡ ΠΈ ΠΎΡΠ²ΠΎΠΈΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ Π±ΠΈΠΎΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ, ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΈΠΌΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Ρ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ Π»Π°Π±ΠΎΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ. ΠΠ½ΠΈΠ³Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΈΡΡΠ΅ΡΠΏΡΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌ ΠΈ Π½Π°Π΄Π΅ΠΆΠ½ΡΠΌ ΡΠΏΡΠ°Π²ΠΎΡΠ½ΡΠΌ ΠΏΠΎΡΠΎΠ±ΠΈΠ΅ΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ, ΡΡΡΠ΅ΠΌΡΡΠΈΡ ΡΡ ΡΠ°Π·ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°ΡΡ Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΡΡΠ°ΡΠ΅Π³ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³Π°ΡΠΈΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΠΎΠ²Π΅ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎ Π½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ. ΠΠ½ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡΡ Π±ΠΈΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ ΠΎΡ Π²Π°ΡΡΠ²Π°Π΅Ρ Π²ΡΠ΅ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ Π½Π°ΡΡΠ½ΡΡ Π΄ΠΈΡΡΠΈΠΏΠ»ΠΈΠ½Π°Ρ , Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΡΠΎΠ²Π΅ΡΡ ΠΏΠΎ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΡ ΠΎΠΏΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΠΈΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³Π°ΡΠ° Π΄Π»Ρ Π»ΡΠ±ΡΡ ΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ.
ΠΠ°Π³ΡΡΠ·ΠΈΡΡ Bioconjugate Techniques, 3 rd Edition
ΠΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π°
Π₯ΠΎΡΡ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠ΅ Π°Π³Π΅Π½ΡΡ Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ Π² ΠΏΡΠΎΡΠ»ΠΎΠΌ, ΠΎΠ½ΠΈ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΠΎΠ³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠ΅Π½Π½ΡΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΠΈΠΌΠΎΡΡΡ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Π°Π»ΡΡΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ ΠΈ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅ Π½Π΅ ΠΏΡΠΎΠ΄Π°ΡΡΡΡ (ΠΏΠΎΠΈΡΠΊΠΎΠ²Π°Ρ Π»ΠΈΡΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ° Π΄Π»Ρ Β«BASED, Π±ΠΈΡ- [Ξ²- (Π°Π·ΠΈΠ΄ΠΎΡΠ°Π»ΠΈΡΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈΠ΄ΠΎ) ΡΡΠΈΠ»] Π΄ΠΈΡΡΠ»ΡΡΠΈΠ΄)Β»).ΠΠΎΡΡΠΈ Π²ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΡ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ² Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡ, Π² ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΉ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½Π°Ρ Π³ΡΡΠΏΠΏΠ° ΡΠΏΠ°ΡΠ΅Π½Π° Π½Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠΏΠ° ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΠΉ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΡΠ°ΠΊΠΎΠΉ ΠΊΠ°ΠΊ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎ-ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΡΠΉ ΡΡΠΈΡ NHS. ΠΡΠΈ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡΡΡ Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΡΡΡΠ°ΡΠ΅Π³ΠΈΡΡ Β«Π½Π°ΠΆΠΈΠ²ΠΊΠ° ΠΈ Π΄ΠΎΠ±ΡΡΠ°Β» Π΄Π»Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ-Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΈΠ»ΠΈ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ-Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²Π°Ρ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ°.
1. Π£Π»Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ
ΠΠ΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠ΅ Π°Π³Π΅Π½ΡΡ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ NHS-ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΡΠ° / Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π° ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡΡΡ Π² ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Ρ Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠΉ, Π² ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅.
ΠΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΠΌ, ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ (X) ΠΈ ΠΆΠ΅Π»Π°Π΅Ρ ΡΡΠ°Π²Π½ΠΈΡΡ Π΄Π²Π° ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π½ΠΈΡ Π²ΡΠΎΡΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° (Y), ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈΠ·Π²Π΅ΡΡΠ½ΠΎ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»Ρ, ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΏΡΡΠΌΡΠΌ ΠΏΠ°ΡΡΠ½Π΅ΡΠΎΠΌ ΠΏΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ X. ΠΠΎ-ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΡ , ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉ Π°Π³Π΅Π½Ρ Π²ΡΡΡΠΏΠ°Π΅Ρ Π² ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎ ( ΠΈ Π² ΠΏΡΠΈΠ³Π»ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠ΅) Ρ X; ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉ Π°Π³Π΅Π½Ρ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠ²ΠΎΠΈΠΌ NHS-ΡΡΠΈΡΠ½ΡΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΎΠΌ ΠΊ ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ Π½ΠΎΡΡΠ½ΡΠΌ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠΌ Π°ΠΌΠΈΠ½Π°ΠΌ X, ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΡΡ X Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ Π³ΠΎΡΠΎΠ²ΡΠΌΠΈ ΠΊ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠΈ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΠΌΠΈ Π³ΡΡΠΏΠΏΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠΎΡΠ»Π΅ ΠΎΠ±Π΅ΡΡΠΎΠ»ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ X Π΄Π»Ρ ΡΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π°Π³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ° X Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΡΡ ΠΊ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ°ΠΌ Y, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠΈ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ,g. , ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΡΠ΅ Π»ΠΈΠ·Π°ΡΡ, ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, Π²ΡΡΠ°ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ ). ΠΠ°ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ, ΠΏΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΈΠΈ Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ X ΠΈ Y Π΄ΡΡΠ³ Ρ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·Π΅Ρ ΠΎΠ±Π»ΡΡΠ°ΡΡ Π£Π€-ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠΈ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ°Π³ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΡΠ΅ΡΡΡ Ρ Π»ΡΠ±ΠΎΠΉ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π³ΡΡΠΏΠΏΠΎΠΉ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, Ρ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΉ ΠΎΠ½ Π½Π°Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ.
ΠΡΠ»ΠΈ ΡΡΠ΄ΠΎΠΌ ΡΠ°ΡΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½Ρ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΠΏΠ°ΡΡΠ½Π΅ΡΠ° ΠΏΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ (Y), ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΡΡΡΡ ΠΊΠΎΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΠΈ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ X ΠΈ Y. ΠΠ° ΡΡΠΎΠΌ ΡΡΠ°ΠΏΠ΅ ΡΠ΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π°ΠΌΠΈ. ΠΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Ρ, ΡΡΠΎ Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»Ρ Π΅ΡΡΡ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ X, ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π·Π° ΠΈ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³Π°.ΠΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ Π±ΡΠ΄ΡΡ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°ΡΡ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΡΡΠΏΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ, Π° Π½Π΅ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΈ ΡΡΠΎ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΎ ΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΎ.
Π Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΎΡ Π΄Π»ΠΈΠ½Ρ ΡΠΏΠ΅ΠΉΡΠ΅ΡΠ° ΠΈ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΏΠ»ΡΠ΅ΠΌΠΎΡΡΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°, ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠ°ΡΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΡ ΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ°ΠΊΡΠΎΡΠΎΠ² ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π±ΡΡΡ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ ΠΏΠΎ-ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠΌΡ. ΠΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ Ρ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎ-ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΌΠΈ, ΡΡΠ»ΡΡΠ³ΠΈΠ΄ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΈ ΠΊΠ°ΡΠ±ΠΎΠ½ΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π³ΡΡΠΏΠΏΠ°ΠΌΠΈ, ΠΊΠΎΠΌΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ.
2. ΠΠ·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ-ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ
ΠΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠΊ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠ°ΡΡΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΡΠΎ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠΉ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠΎΠΌΠΈΠΌΠΎ Π΄Π²ΡΡ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΎΠ², ΡΡΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΡ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Ρ Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΊΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΊΡ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΡΠ»ΡΠΎΡΠΎΡΠΎΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½) ΠΈ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΏΠ»ΡΠ΅ΠΌΡΡ ΡΠΏΠ΅ΠΉΡΠ΅ΡΠ½ΡΡ Π²Π΅ΡΠ²Ρ (ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΠΎ Π΄ΠΈΡΡΠ»ΡΡΠΈΠ΄Π½ΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Ρ).
Sulfo-SBED, ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠ° Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΈ. Π₯Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊΠΈ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ° Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎ-ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΡΠΉ ΡΡΠΈΡ ΡΡΠ»ΡΡΠΎ-NHS ββ(Π²Π½ΠΈΠ·Ρ ΡΠ»Π΅Π²Π°), Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ (Π²Π²Π΅ΡΡ Ρ ΡΠ»Π΅Π²Π°), Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ (ΡΠΏΡΠ°Π²Π°) ΠΈ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΏΠ»ΡΠ΅ΠΌΡΡ Π΄ΠΈΡΡΠ»ΡΡΠΈΠ΄Π½ΡΡ ΡΠ²ΡΠ·Ρ Π² ΠΏΠ»Π΅ΡΠ΅ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΡΠ° NHS.
ΠΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠ°ΡΡ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΡΠΈΡΡ (ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎ Π²ΡΡΠ΅ Π΄Π»Ρ Π³ΠΈΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² X ΠΈ Y), ΡΠΏΠ΅ΠΉΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΠ»Π΅ΡΠΎ, ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΡΡΡΠ΅Π΅ ΠΈΡ , ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΠΎΡΡΠ΅ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΎ. ΠΡΠΎ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ΅Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ, Π½ΠΎ ΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΡ (Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ Π² ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Sulfo-SBED) ΠΏΡΠΈΠΊΡΠ΅ΠΏΠ»Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΊ Y. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, Π±ΠΈΠΎΡΠΈΠ½ΠΎΠ²Π°Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ° ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠΈΡΡΡ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Β«ΠΏΡΠΈΠΌΠ°Π½ΠΊΠΈΒ» (X) Π½Π° Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ Β«ΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΡΒ» (Y).
Π Π΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½Π°Ρ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡ Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ
ΠΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Ρ — ΡΡΠΎ Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΠΊΠ»Π°ΡΡ ΡΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡΡ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ Π³ΡΡΠΏΠΏ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡΡΡ Π² ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π²ΠΈΠ΄Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΡ ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΡΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ².Π€ΡΠ°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Π° (Π°Π·ΠΈΠΏΠ΅Π½ΡΠ°Π½ΠΎΠ°Ρ) ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ Π»ΡΡΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎΡΡΠ°Π±ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΡΡΡ, ΡΠ΅ΠΌ ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΠΈ Π΅Π³ΠΎ Π»Π΅Π³ΡΠ΅ ΠΈ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½Π΅Π΅ Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΡΡΡ Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ²ΠΎΠ»Π½ΠΎΠ²ΡΠΌ Π£Π€-ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ (ΠΎΡ 330 Π΄ΠΎ 370 Π½ΠΌ).
Π€ΠΎΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΡ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Π° ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π΅Ρ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ°ΡΠ±Π΅Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΠΌΠ΅ΠΆΡΡΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ. Π’Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΎΠΌΠ΅ΠΆΡΡΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΡ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²ΡΠ²Π°ΡΡ ΠΊΠΎΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΠΈ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²ΠΎΠΌ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΉ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Π»ΡΠ±ΠΎΠΉ Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΏΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ΄Π½ΡΠΌ ΠΎΡΡΠΎΠ²ΠΎΠΌ Π½Π° ΡΠ°ΡΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΡΡ , ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ Π΄Π»ΠΈΠ½Π΅ ΡΠΏΠ΅ΠΉΡΠ΅ΡΠ½ΡΡ ΠΏΠ»Π΅Ρ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°.
Π‘Ρ Π΅ΠΌΠ° ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Π° Π΄Π»Ρ ΡΠΎΡΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ. R ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°, ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ; (P) ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΈΠ»ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΡΡ ΠΌΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»Ρ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΎΡΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π²ΠΎΠ΄ΠΎΡΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ R ‘.
ΠΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠΈΠ²ΠΊΠΈ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠΌ
Π₯ΠΎΡΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΡ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠΈΡΠΎΠΊΠΎ ΡΠΈΡΠΈΡΡΡΡΡΡ Π² Π»ΠΈΡΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅, ΡΡΠΎ, Π²Π΅ΡΠΎΡΡΠ½ΠΎ, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡΡ ΠΏΠΎ ΠΌΠ΅ΡΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΠΊΠ°ΠΊ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½Π½ΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄ Π² Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ½ΡΡΠ²Π΅ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ.
1.ΠΠ·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Ρ Π·Π°Ρ Π²Π°ΡΠΎΠΌ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²
ΠΡΠ»ΠΈ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠΊΠ²ΠΈΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΡ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Π°ΡΠΈΠ»Π°Π·ΠΈΠ΄Π½ΡΡ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠ², Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½Ρ Π²ΡΠ΅ ΡΠ΅ ΠΆΠ΅ Π²ΠΈΠ΄Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Ρ Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ. Π Π½Π°ΡΡΠΎΡΡΠ΅Π΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΠΎ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ΄Π½ΠΎΡΡΠ΅ΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠΉ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ Π½Π° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎ-ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΉ ΡΡΠΈΡ NHS.
ΠΡΠΈΠΌΠ΅Ρ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³Π°ΡΠΈΠΈ Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠΌ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌ Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠΌ. SDA ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Π³Π΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ±ΠΈΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΉ Π°Π³Π΅Π½Ρ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΡΡΠΈΡΠ° NHS ΠΈ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½Π°. ΠΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π°ΠΌΠΈΠ½Ρ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠΌΠ΅ΡΠΈΡΡ Π² ΡΠ΅ΠΌΠ½ΠΎΡΠ΅.ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΡΡΠΎΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²ΠΈΡΡ ΠΊ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΡ (Π½Π°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΌΡ Π»ΠΈΠ·Π°ΡΡ) ΠΈ Π΄Π°ΡΡ Π΅ΠΌΡ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ Π΅Π³ΠΎ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠ°ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ, Π²ΠΎΠ·Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ»Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° ΠΈΠ½ΠΈΡΠΈΠΈΡΡΠ΅Ρ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³Π°ΡΠΈΡ Ρ Π»ΡΠ±ΡΠΌΠΈ Π±Π»ΠΈΠΆΠ°ΠΉΡΠΈΠΌΠΈ Ρ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ Π³ΡΡΠΏΠΏΠ°ΠΌΠΈ (ΡΠΎ Π΅ΡΡΡ Ρ ΠΏΠ°ΡΡΠ½Π΅ΡΠΎΠΌ ΠΏΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ).
2. ΠΠ΅ΡΠ°Π±ΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
Π‘ΡΠ°Π±ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΈ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΌΠ°Π»Π΅Π½ΡΠΊΠΈΠΉ ΡΠ°Π·ΠΌΠ΅Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ ΠΏΠΎ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠ°Π±ΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅. ΠΠ°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΡΠΎΡΠΎ-L-Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½ ΠΈ ΡΠΎΡΠΎ-L-ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½ ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³Π°ΠΌΠΈ ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ΄Π½ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Ρ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ Π² ΡΠ²ΠΎΠΈΡ Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΡΡ ΡΠ΅ΠΏΡΡ .ΠΠΎΠ³Π΄Π° ΡΡΠΈ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΡ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΡΡΡΡ Π² ΠΊΡΠ»ΡΡΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ΅Π΄Ρ Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠΎ ΠΈΡ Π½Π°ΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ², ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π΄Π»Ρ ΡΠΈΠ½ΡΠ΅Π·Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ Π²Π΅ΡΡΠΈΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π½ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ². Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΡΠ°ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΡΡΡΡ ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΡΡΠ°ΡΠ΅Π³ΠΈΠΉ ΡΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ in vivo.
Π‘ΡΡΡΠΊΡΡΡΡ ΡΠΎΡΠΎΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ. ΠΡΠΈ Π΄ΠΈΠ°Π·ΠΈΡΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ Π»Π΅ΠΉΡΠΈΠ½Π° ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΠ½Π° ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π±ΡΡΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΌΠ΅Ρ Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° ΡΡΠ°Π½ΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ Π² Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΡ Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ ΡΠΎΡΠΌΡ ΠΌΠ΅ΡΠ°Π±ΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π²Π·Π°ΠΈΠΌΠΎΠ΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ².